姜彬言，王巧民，胡樂(lè)義

(安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院、安徽省立醫(yī)院消化內(nèi)科，合肥230001)

腸易激綜合征(IBS)指一組包括腹痛、腹脹、排便習(xí)慣和大便性狀異常，持續(xù)存在或間歇發(fā)作，而無(wú)形態(tài)學(xué)和生化異常改變的癥候群，用解剖、生化或組織學(xué)等檢查結(jié)果都難以解釋的功能性疾病。由于其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，所以臨床治療上多以緩瀉劑、止瀉藥、調(diào)節(jié)腸道動(dòng)力等對(duì)癥治療藥物為主，其療效并不肯定。國(guó)內(nèi)外研究表明，IBS發(fā)病與腸道菌群紊亂有密切關(guān)系，補(bǔ)充益生菌能夠改善IBS患者癥狀，而其療效及機(jī)制尚無(wú)統(tǒng)一定論。本研究旨在通過(guò)對(duì)IBS患者腸道菌群分析及益生菌治療IBS的療效觀察，了解IBS患者腸道菌群變化，進(jìn)一步明確益生菌制劑對(duì)IBS的療效，初步了解其治療機(jī)制。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2011年3月至2011年6月于安徽省立醫(yī)院消化內(nèi)科門(mén)診就診的IBS患者26例，年齡(42.9 ±13.4)歲，男性14 例，女性12 例;同時(shí)根據(jù)年齡、性別比例，選取健康對(duì)照組25例，年齡(38.8±9.3)歲，男性13例，女性12例。兩組間年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 診斷符合羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)(反復(fù)發(fā)作的腹痛或腹部不適，最近3個(gè)月內(nèi)每月發(fā)作至少3日，伴有以下2項(xiàng)或2項(xiàng)以上:(1)排便后癥狀緩解;(2)發(fā)作時(shí)伴有排便頻率的改變;(3)發(fā)作時(shí)伴有糞便性狀改變)，經(jīng)體格檢查，血、尿、糞常規(guī)、血生化及腹部超聲，電子結(jié)腸鏡或鋇劑灌腸檢查排出腸道器質(zhì)性疾病。排除:年齡小于18歲及大于75歲，有腸道器質(zhì)性疾病或有心血管、呼吸、腎臟等其他系統(tǒng)的嚴(yán)重疾病者，有腹部手術(shù)史者，妊娠期或哺乳期者，且患者近1個(gè)月內(nèi)過(guò)使用膨脹劑、止瀉藥、解痙藥、益生菌及抗生素等藥物，對(duì)益生菌制劑過(guò)敏者。

1.3 方法

1.3.1 腸道菌群培養(yǎng)計(jì)數(shù)方法 ①培養(yǎng)基的選擇:雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基莫匹羅星鋰鹽改良MRS、乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基LBS、擬桿菌(主要為弱脆擬桿菌)選擇性培養(yǎng)基BBE、腸球菌(主要為糞腸球菌)選擇性培養(yǎng)基PSE瓊脂、腸桿菌(主要為大腸埃希菌)選擇性培養(yǎng)基EMB。②糞便標(biāo)本收取:IBS患者分別于治療前后各收集糞便樣品1次進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)正常對(duì)照人群收集糞便樣品1次進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。常溫?zé)o菌收集新鮮糞便0.5g，按照10倍連續(xù)稀釋法稀釋至10-2～10-65個(gè)稀釋度。③標(biāo)本的接種與培養(yǎng):取20 μl的10－4/10－5/10－63 個(gè)稀釋度稀釋液分別滴種于腸桿菌、擬桿菌、雙歧桿菌專屬培養(yǎng)基;取20 μl的 10－3/10－4/10－53 個(gè)稀釋度稀釋液分別滴種于腸球菌、乳酸桿菌專屬培養(yǎng)基。厭氧菌專屬培養(yǎng)基分別置入手套式厭氧箱中培養(yǎng)48h，需氧菌專屬培養(yǎng)基分別置于常規(guī)的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h。④菌群的計(jì)數(shù)與鑒定:選擇菌落數(shù)量在30-300培養(yǎng)基進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，同一稀釋度取平均數(shù)，按公式CFU/g(ml)標(biāo)本=某稀釋度平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×50計(jì)算出每克標(biāo)本中的菌含量。取常用對(duì)數(shù)值log10 CFU/g形式，通過(guò)計(jì)算雙歧桿菌和腸桿菌對(duì)數(shù)值的比值(B/E值)來(lái)代表腸道定植抗力(CR)，正常值＞1。采用細(xì)菌三級(jí)鑒定法將細(xì)菌鑒定到屬的水平。

1.3.2 療效評(píng)價(jià) IBS患者雙歧三聯(lián)活菌制劑［上海醫(yī)藥(集團(tuán))有限公司信誼制藥總廠生產(chǎn)，由雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、糞鏈球菌、乳糖、淀粉等組成。］3片，0.21g/片，3 次/d，治療 4 周，分別于治療前后填寫(xiě)IBS患者腸道癥狀評(píng)分量表，由?？漆t(yī)生參照評(píng)分量表對(duì)IBS患者治療前后各項(xiàng)癥狀評(píng)分及總分進(jìn)行對(duì)比觀察，腹痛時(shí)間、腹痛頻率、排便形狀異常、排便通過(guò)異常、黏液便和排便時(shí)腹脹情況6個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估，每項(xiàng)計(jì)為0～3分，總分0～l8分。顯效:癥狀消失或癥狀積分減少80%以上;有效:癥狀積分減少≥50%并且＜80%;無(wú)效:癥狀積分減少少于50%。總有效包括顯效和有效。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，用t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果

2.1 治療前后兩組菌群數(shù)量分析 見(jiàn)表1。

2.2 療效觀察 所有患者均完成原定治療計(jì)劃，26例患者中3例顯效，13例有效，10例無(wú)效，總有效率為62%，無(wú)不良反應(yīng)報(bào)道。治療組治療前癥狀總積分為(11.23 ±2.40)，治療后降至(6.04 ±3.01)，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);各項(xiàng)癥狀評(píng)分見(jiàn)表2。

3 討論

目前普遍共識(shí)認(rèn)為腸道微生態(tài)平衡對(duì)人類的健康至關(guān)重要，腸道菌群通過(guò)以上皮組織為基礎(chǔ)、包含大量免疫細(xì)胞的腸道黏膜屏障與宿主腸道組織隔離，與腸腔環(huán)境保持動(dòng)態(tài)平衡，被稱為腸道微生態(tài)平衡，一旦平衡被打破便會(huì)導(dǎo)致疾病［1］。IBS患者存在菌群失調(diào)已得到公認(rèn)，本組研究采用糞便細(xì)菌培養(yǎng)的方法，對(duì)糞便細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果顯示:IBS患者與健康對(duì)照組相比雙歧桿菌、乳桿菌比例明顯降低，腸桿菌比例明顯升高，定植抗力指標(biāo)雙歧桿菌/腸桿菌(B/E)比例＜1且明顯降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與Si等［2］研究相似;而腸球菌和擬桿菌無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IBS患者存在腸道菌群變化，主要表現(xiàn)為乳酸桿菌與雙歧桿菌等益生菌的減少以及兼性菌大腸桿菌和腸球菌的增加、腸道定植抗力的降低。

表1 治療前IBS患者與正常人群糞便中菌群數(shù)量及BE值比較(±s，Log10 CFU/g濕糞)

表1 治療前IBS患者與正常人群糞便中菌群數(shù)量及BE值比較(±s，Log10 CFU/g濕糞)

注:治療前與對(duì)照組比較，aP＜0.05，bP＜0.01;治療后與治療前比較，cP＜0.01，dP＜0.05

組別 例數(shù)腸桿菌 腸球菌 乳酸桿菌 雙歧桿菌 擬桿菌B/E 值治療前 治療后對(duì)照組 25 8.20 ±0.73 6.76 ±0.95 7.07 ±1.14 8.92 ±0.88 8治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后.43 ±0.53 1.09 ±0.13 IBS 組 26 8.66 ±0.82a8.56 ±0.99 6.59 ±1.17 6.30 ±1.24 6.21 ±0.97b 7.28 ±1.08c 8.36±1.03a 8.80±0.88d 8.64 ±0.75 8.66 ±0.76 0.97±0.15b 1.04 ±0.15

表2 治療前后26例IBS患者各項(xiàng)癥狀評(píng)分及總積分比較(±s)

表2 治療前后26例IBS患者各項(xiàng)癥狀評(píng)分及總積分比較(±s)

注:與治療前比較，aP＜0.05，bP＜0.01

黏液便比例 排便時(shí)腹脹比 總積分治療前 1.61 ±0.85 1.92 ±0.93 2.23 ±0.95 1.96 ±1.08 1.4時(shí)間 腹痛時(shí)間(h/d) 腹痛發(fā)生頻率(d/周)排便形狀異常比例排便發(fā)生通過(guò)異常比例2 ±0.76 2.08 ±1.06 11.23 ±2.40治療后 1.15 ±0.88a 0.81 ±0.75b 1.23 ±0.91b 0.92 ±0.84b 0.77 ±0.71b 1.15 ±0.67b 6.04 ±3.01b

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充益生菌能夠改變腸道菌群的種類與數(shù)量［3-6］，改變腸腔環(huán)境，從而改善IBS癥狀［7-9］。對(duì)IBS治療有效，但其機(jī)制、獲益程度、有效菌株并不完全明確。本研究通過(guò)對(duì)雙歧三聯(lián)活菌制劑治療前后的癥狀評(píng)分及菌群數(shù)量變化分析發(fā)現(xiàn):治療后，有效率為62%;患者糞便中雙歧桿菌及乳桿菌含量均高于治療前(P＜0.05);B/E值增加(B/E＞1)，但較治療前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;腸桿菌、腸球菌、擬桿菌差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示IBS患者補(bǔ)充雙歧桿菌及乳酸桿菌能夠調(diào)節(jié)腸道菌群，改善IBS癥狀，對(duì)IBS治療有效，為益生菌治療IBS提供了臨床依據(jù)。

益生菌作用廣泛、用藥安全，已廣泛的用于臨床尤其是消化疾病的治療，但由于其具體機(jī)制并未完全明確，缺乏大樣本循證醫(yī)學(xué)的臨床實(shí)驗(yàn)研究，其臨床應(yīng)用上仍存在多方面亟待解決的問(wèn)題。一方面宿主個(gè)體化差異(包括宿主受體細(xì)胞、飲食、遺傳因素)可能引起不同個(gè)體間對(duì)益生菌的反應(yīng)不同，在不同的生理狀態(tài)下可能表現(xiàn)為不同的效果［10-11］;另一方面不同的種屬、甚至同一菌屬的不同菌株作用并不完全相同，在組合益生菌中并非每一菌株都發(fā)揮作用，組合治療是否優(yōu)于單一菌株治療以及其有效劑量尚無(wú)定論。相信隨著分子生物技術(shù)的不斷發(fā)展，對(duì)腸道菌群與IBS關(guān)系及益生菌作用會(huì)有更深層次的認(rèn)識(shí)，能夠提出更為有效的治療方案。

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