秦建軍
(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院,上海 021500)
標(biāo)本狀態(tài)對血液檢驗結(jié)果的影響
秦建軍
(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院,上海 021500)
目前臨床上已經(jīng)把血液檢驗作為診斷和反映疾病治療效果的一種重要手段,其結(jié)果是診斷疾病、鑒別診斷、臨床用藥觀察的重要依據(jù)。在實際工作中,血液臨床檢驗質(zhì)量控制始終貫穿于分析前、分析中和分析后等環(huán)節(jié)[1]。嚴格控制標(biāo)本質(zhì)量、減少相關(guān)因素的干擾,才能得到高質(zhì)量的檢驗結(jié)果,否則,再好的儀器也得不到臨床準(zhǔn)確、可靠的依據(jù),從而影響疾病判斷,造成不良結(jié)果。為此,作者經(jīng)過多年的工作經(jīng)驗,參考相關(guān)文獻,對影響血液檢驗的標(biāo)本狀態(tài)因素(溶血、黃疸和脂血)進行分析,以供探討。
溶血是臨床檢驗中最常見的一種影響因素,它能引起很多指標(biāo)明顯異常。引起標(biāo)本溶血的原因有很多:真空管質(zhì)量不合格,負壓過大,血液流出過快,產(chǎn)生氣泡[2];注射器或容器內(nèi)不干凈;抽血時使用的針頭過小、抽血用力過大、較長時間用止血帶、產(chǎn)生過多的泡沫;抽血后未取下針頭直接將血液注入容器內(nèi)、混勻抗凝劑時用力過大等,有研究者主張抽血時不扎止血帶,因扎帶可造成局部淤血、缺氧、水腫、溶血等而影響檢驗結(jié)果,若確需扎帶,也不宜過緊,且不能超過1 min。溶血的干擾機制有以下三種。
1.1 血細胞中高濃度成分逸出,使測定結(jié)果增高,血細胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH、ACP、AST、K+,只要輕微溶血就可以對這些項目產(chǎn)生很大影響。另外若某些物質(zhì)的血細胞內(nèi)濃度低于血清濃度時,則溶血相當(dāng)于血清被稀釋,重度溶血時使這些血清成分的檢測值降低,這類項目主要有Ca2+、Na+、Cl-、UA等。
1.2 血細胞成分進入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其它物質(zhì)的濃度改變,如溶血后紅細胞的磷脂進入血清,被血清中的磷酸酯酶水解,其結(jié)果造成血清無機磷濃度顯著增高。
1.3 血紅蛋白本身顏色對檢測的光學(xué)干擾,血紅蛋白的顏色在431 nm和555 nm波長附近能使比色、比濁法的吸光度增高,如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測定結(jié)果明顯升高。
實際上,以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時存在并可相互作用,因而使受影響的檢測項目更為復(fù)雜,因此,嚴格控制標(biāo)本溶血是保證檢驗質(zhì)量的重要方面。一般標(biāo)本溶血時,對RBC計數(shù)、紅細胞比容、血紅蛋白測定、WBC計數(shù)、嗜酸性粒細胞計數(shù)等有影響,使紅細胞計數(shù)降低,溶血越嚴重,RBC計數(shù)降低越大。標(biāo)本溶血對WBC分類有影響,使中性粒細胞比例明顯降低,淋巴細胞比例明顯升高,而對WBC計數(shù)無影響。標(biāo)本溶血常常使血小板計數(shù)升高,其原因是電阻抗法將紅細胞碎片誤認為血小板。實際工作中應(yīng)避免標(biāo)本溶血,發(fā)現(xiàn)異常分類結(jié)果,應(yīng)通過手工分類法進行復(fù)核或重新采取標(biāo)本,因此手工分類法仍為WBC分類的參考方法。標(biāo)本溶血時,紅細胞中含量高的成分大量進入血清。文獻報道溶血對多種成分有影響[3]。標(biāo)本溶血時如AST、LDH、K+等升高,主要是由于紅細胞內(nèi)含有大量這些物質(zhì)而引起。有的降低如P、ALP、GGT等,主要是血紅蛋白干擾了這些物質(zhì)的測定反應(yīng)。因此這類標(biāo)本在審核時應(yīng)注明標(biāo)本性質(zhì),嚴重溶血時最好是重新采集標(biāo)本。
膽紅素對反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大,一般可以用樣本空白或兩點比色法、連續(xù)監(jiān)測法來消除膽紅素對黃色結(jié)果的影響,但由于膽紅素不穩(wěn)定,隨著膽紅素被氧化為膽綠素、膽褐素而變色,此時如果使用兩點法、連續(xù)監(jiān)測法同樣也不能排除膽紅素對結(jié)果的干擾。此外,膽紅素作為一種還原劑對氧化反應(yīng)有干擾,如氧化酶法測定Glu、三酰甘油(TG)、UA、膽固醇等,因為膽紅素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng),從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少,導(dǎo)致結(jié)果偏低。此時也可用雙波長法或設(shè)計樣本空白消除干擾,亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時可先除蛋白,然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素,可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。對于黃疸血清標(biāo)本,可導(dǎo)致血磷、高密度脂蛋白結(jié)果明顯偏低[4],主要原因是黃疸可干擾這些物質(zhì)的測定反應(yīng)。因此遇到這類血清標(biāo)本應(yīng)在審核時注明標(biāo)本性質(zhì)。
在生化檢測時,如果遇到直接膽紅素較高,總膽紅素或低密度脂蛋白呈負值時,應(yīng)查看標(biāo)本是否是脂血。高脂血癥患者檢測時,血紅蛋白測定和血小板計數(shù)增高。乳糜血中的乳糜成分主要為CM和VLDL,TG含量達60%以上,甚至高達90%,故采用TG濃度來表示。TG對Hb的測定也存在正干擾,當(dāng)TG≥7.0 mmol/L時,Hb明顯增高,二者之間呈較強的直線相關(guān)性。因為血紅蛋白是通過光電比色法測定,乳糜血標(biāo)本使透光度降低,吸光度增加,從而使血紅蛋白的測定結(jié)果假性增高,相似的實驗結(jié)果也有報道。在去乳糜后得到準(zhǔn)確的血紅蛋白濃度。血液脂濁可散射光線,所以對吸光度一般產(chǎn)生正向干擾,導(dǎo)致某些項目如ALB、UA、總蛋白(TP)等測定結(jié)果偏高,此時即使使用兩點法或連續(xù)監(jiān)測法不能排除脂血干擾。而在pH為10以上的環(huán)境中,乳糜中的TG會皂化,可使血清逐漸變清,使許多比色法測定如Ca2+、Cr、ALP、TP等結(jié)果產(chǎn)生負誤差,此時可以用雙波長法或設(shè)計樣本空白消除干擾。在某些實驗室用乙醚處理脂血以消除脂濁對生化檢驗結(jié)果的影響,但是乙醚處理的脂濁標(biāo)本雖然可以排除脂濁對ALT、AST、TP等指標(biāo)的干擾,但是不能排除對ALB、GGT、LDH、尿素氮(BUN)、Glu、Ca2+等指標(biāo)的干擾。因此遇到這類血清標(biāo)本應(yīng)在審核時注明標(biāo)本性質(zhì)。
[1]叢玉隆,鄧新立.醫(yī)學(xué)實驗室全面質(zhì)量管理體系的概念與建立[J].臨床檢驗雜志,2001,19(5):305-309.
[2]張小潔,劉建芝.真空采血標(biāo)本溶血原因分析及預(yù)防措施[J].護士進修雜志,2001,16(3):180.
[3]沈伽第.溶血對臨床生物化學(xué)檢驗的干擾和影響[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,1994,17(4):250-253.
[4]劉素蘭,梁華.膽紅素對磷烏酸鎂沉淀HDL-C的影響及消除方法探討[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1999,14(1):88-89.
R446.11
B學(xué)科分類代碼32011
1001-8131(2012)04-0295-01
2012-04-01