余上斌
華中科技大學同濟醫(yī)學院基礎醫(yī)學實驗教學中心,武漢430030
高分子右旋糖酐(HMWD)法:選擇2~3Kg的健康家兔,雌雄不限。制模當天禁食、禁水。將平均分子量為20~40萬的HMWD配成10%生理鹽水溶液,以7~15ml/Kg體重的劑量作耳緣靜脈快速推注,同時觀察動物球結膜微循環(huán)。用藥前家兔眼球結微膜血管中的微動脈和毛細血管呈樹枝狀分布,微靜脈常與微動脈平行,血管由粗到細,光滑自然,微血流呈帶狀或線狀,偶見流動很快的粒線狀血流,但不會出現血細胞聚集的顆粒狀血流,毛細血管,特別是近瞳孔處毛細血管網血流常呈粒線狀流動;微血管周圍無出血及滲出,背景較白(鞏膜),視野清晰。用藥后,眼球結膜微循環(huán)中可見下列典型的急性微循環(huán)障礙表現:(1)毛細胞血管和微靜脈中紅細胞流速明顯減慢,血流呈斷線狀、虛線狀或粒狀,局部區(qū)域甚至完全停滯;(2)微血管中出現明顯血細胞聚集,嚴重時見到血細胞團塊;(3)有時尚可見到微血管發(fā)生輕度痙攣,微血管周圍有滲出和出血,以及微靜脈中有血細胞貼壁翻滾等現象。用藥后24h內,上述急性微循環(huán)障礙表現最嚴重,少數動物可因急性栓塞而突然死亡,也有少數動物出現偏癱癥狀。存活者,如經精心護理,則72h后微循環(huán)障礙逐漸好轉。經測定,在此種急性微循環(huán)障礙模型中,動物血粘度明顯升高、紅細胞電泳變慢、血沉加速。
這種急性微循環(huán)障礙動物模型的復制方法簡便,出現快,成功率高(95%以上),適于探索與急性微循環(huán)障礙有關的各種疾病的發(fā)病機制及藥物作用原理的研究。
胎兒羊水靜脈注射法:給予家兔1~4ml/Kg體重劑量靜脈注射新鮮胎兒羊水,注射完成即刻,可見血細胞流動速度減慢,毛細血管中微血流呈間歇性流動,呈紅白交替現象;在微靜脈或較大的毛細血管中??梢姷诫S血流流動的透明細胞(可能為羊水細胞)。2min后,微血流明顯瘀滯,局部出現凝血,微循環(huán)毛細血管中出現體積逐漸加大的白色團塊(可能是流動的白色血栓,以羊水細胞為核心構成)。1h左右,大部分微血流停止流動,僅有部分微血管中可見血流緩慢移動,而且常可出現栓塞所致的突然死亡。這種急性微循環(huán)障礙動物模型的復制成功率常因羊水的質量而異。
兔腦粉浸出液靜脈注射法:取新鮮兔腦粉100mg,加生理鹽水5ml,50℃溫箱孵育20min后,取上清液備用。給家兔耳緣靜脈推注上述溶液,1~4ml/Kg體重,同時可給1/4MCaCl24ml,必要時添加少量乳酸靜脈注射。球結膜微循環(huán)觀察所見與HMWD復制模型類似。此法缺點是劑量不易控制,每個動物的敏感程度不一,用量太小,急性微循環(huán)障礙表現不顯;劑量稍大,動物可發(fā)生突然死亡,必須十分注意。