孟慶國(guó)，尹立雪，郭智宇，岳文勝，白 艷，劉會(huì)若

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院超聲醫(yī)學(xué)中心，四川 成都 610072;2.GE公司，四川 成都 610016; 3.川北醫(yī)學(xué)院，四川 南充 637007;4.四川省婦幼保健院，四川 成都 610072;5.河南中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450003)

目前，心臟起搏再同步化治療已成為心力衰竭非藥物治療的主要技術(shù)方法。國(guó)內(nèi)外學(xué)者［1，2］已經(jīng)對(duì)心臟單腔、雙腔起搏、同步化起搏治療效果進(jìn)行了系列評(píng)價(jià)。各種起搏治療均存在各自的不足之處，其原因主要是:起搏電刺激介導(dǎo)的電機(jī)械傳導(dǎo)在時(shí)間和空間上與心臟生理性或基礎(chǔ)狀態(tài)最佳電機(jī)械傳導(dǎo)時(shí)空順序的不匹配，導(dǎo)致心臟電機(jī)械傳導(dǎo)不恰當(dāng)?shù)闹貥?gòu)，從而造成各種臨床起搏治療效果不佳或失敗。因此，優(yōu)化起搏位點(diǎn)、尋找最佳的起搏治療方式以達(dá)到最接近生理狀態(tài)心臟電機(jī)械興奮過(guò)程依然是亟待解決的重要臨床問(wèn)題。本研究應(yīng)用M型組織多普勒超聲觀測(cè)離體蛙腿骨骼肌在不同電刺激方式下電傳導(dǎo)時(shí)間、電機(jī)械延遲時(shí)間和機(jī)械收縮傳導(dǎo)時(shí)間的變化差異及其相關(guān)關(guān)系，旨在深入揭示電刺激與機(jī)械興奮和電傳導(dǎo)的時(shí)空變化規(guī)律，為臨床優(yōu)化心臟起搏治療提供相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器 實(shí)驗(yàn)材料:132只重量0.25～0.35 kg牛蛙，［(0.28±0.03)kg］。設(shè)備儀器:Acuson512彩色多普勒超聲診斷儀，7v3c型心臟探頭，發(fā)射頻率為7 MHz;Lead2000多通道電生理儀(成都錦江電子，實(shí)際刺激電壓范圍為1～8V;刺激頻率范圍為1～999 ms);本實(shí)驗(yàn)電刺激參數(shù)分別設(shè)為電壓1～5V，頻率:電刺激間期為900 ms。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 室溫下，將牛蛙斷髓去皮、上肢和頭后用大頭釘固定軀干及下肢足部于干燥平面木板上。超聲診斷儀心電信號(hào)導(dǎo)聯(lián)線與固定軀干和下肢足部處的金屬大頭釘相連，記錄電脈沖刺激信號(hào);將自制電刺激導(dǎo)線(內(nèi)徑1 mm絕緣銅線)一端連接電生理儀發(fā)放電脈沖刺激信號(hào)線源，另一端刺入蛙大腿腹側(cè)肌內(nèi)(本實(shí)驗(yàn)中電極置入位置為蛙大腿中外側(cè)，刺激肌群為股三頭肌和縫匠肌。見(jiàn)圖1)。發(fā)放電脈沖刺激前用手上下、左右微動(dòng)電刺激導(dǎo)線，通過(guò)二維灰階超聲及彩色組織多普勒顯像準(zhǔn)確觀察并確定導(dǎo)線頭端位置。將超聲探頭通過(guò)支架固定于蛙大腿上方約1 cm(用輕薄紙巾圍合醫(yī)用耦合劑使超聲探頭與蛙腿保持穩(wěn)定距離避免直接接觸)以防止因操作者手疲勞抖動(dòng)造成的圖像采集失真。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，用生理鹽水間斷濕潤(rùn)蛙大腿骨胳肌，以延緩其生理功能喪失的速度。組織多普勒超聲速度量程分別設(shè)定為0.009 m/s和0.11 m/s兩級(jí)。采用M型組織多普勒采集圖像時(shí)，目標(biāo)掃描速度設(shè)為100 m/s。 Lead2000電生理儀發(fā)放電壓以1 V為間距，從1 V開(kāi)始逐步提高到5 V為止(改變刺激電壓幅度采集圖像，中間沒(méi)有設(shè)定時(shí)間間隔)。參數(shù)設(shè)定后，進(jìn)行單點(diǎn)單極電極和雙點(diǎn)單極電極電脈沖刺激。M型組織多普勒超聲分別取樣刺激點(diǎn)1～2點(diǎn)和/或接收點(diǎn)3～4點(diǎn)(圖2、圖3)，采集連續(xù)4個(gè)電脈沖刺激周期的圖像，獲取并測(cè)量以下參數(shù):電機(jī)械延遲時(shí)間(t1)(圖2)、機(jī)械收縮傳導(dǎo)時(shí)間(t2)(圖3)、機(jī)械收縮持續(xù)時(shí)間(Tm)及兩電極點(diǎn)間電傳導(dǎo)時(shí)間差(T) (圖4)等，為減少測(cè)量誤差，所有分析參數(shù)均為4個(gè)電脈沖刺激周期測(cè)量參數(shù)的均數(shù)。實(shí)驗(yàn)流程:①單點(diǎn)單極電極刺激，兩電極位點(diǎn)相距2 cm。電刺激位點(diǎn)和探頭置于1～2點(diǎn)時(shí)，觀測(cè)電與機(jī)械傳導(dǎo)延遲(t1)。探頭移到3～4點(diǎn)，觀測(cè)機(jī)械傳導(dǎo)時(shí)間(t2)。②單點(diǎn)單極電極刺激，兩電極位點(diǎn)相距2 cm，在兩電極位點(diǎn)中間位點(diǎn)注入0.2 ml濃度75%的酒精，觀察蛙大腿肌局部注射酒精部位顏色變白后，觀測(cè)t2、T和Tm(圖5)。③雙點(diǎn)單極電極刺激，兩電極位點(diǎn)相距3 cm，將探頭固定于兩電極點(diǎn)中點(diǎn)位置。于1～2位點(diǎn)和3～4位點(diǎn)同時(shí)發(fā)放電脈沖刺激，觀測(cè)雙點(diǎn)單極電極刺激方式下，t2以及Tm變化(圖6)。

圖1 a.箭頭所指為超聲確定電極頭的位置;b.可以清楚觀察到紅色電脈沖信號(hào)從電極頭處開(kāi)始，M型組織多普勒取樣線通過(guò)電極頭處，獲取所需時(shí)間測(cè)量參數(shù)同圖7。

圖2 單點(diǎn)單極電極刺激示意圖 兩電極點(diǎn)間距2 cm，(+)(1～2)點(diǎn)為電極脈沖發(fā)射點(diǎn)和探頭位置，(－)(3～4)為電極脈沖接收點(diǎn)。t1:電機(jī)械延遲時(shí)間，Tm:組織多普勒M型紀(jì)錄1～2點(diǎn)機(jī)械收縮持續(xù)時(shí)間。

圖3 單點(diǎn)單極電極刺激示意圖 兩電極點(diǎn)間距2 cm，探頭置于3～4點(diǎn)。t2:機(jī)械收縮傳導(dǎo)時(shí)間，Tm:組織多普勒M型紀(jì)錄3～4點(diǎn)機(jī)械收縮持續(xù)時(shí)間。

圖4 電生理儀測(cè)量?jī)呻姌O點(diǎn)間時(shí)間(T) 黃色線為1～2點(diǎn)電脈沖發(fā)放點(diǎn)電位記錄，綠色線為3～4點(diǎn)接收點(diǎn)電位記錄:所測(cè)即為T(mén)值。 圖5 注射酒精電機(jī)械傳導(dǎo)阻滯后重復(fù)圖3試驗(yàn)兩電極位點(diǎn)中間位注射酒精后，1－2點(diǎn)發(fā)放電脈沖刺激信號(hào)，超聲探頭置于3～4點(diǎn)(接收點(diǎn))，觀測(cè)t2和Tm

圖6 雙點(diǎn)單極電極刺激方式示意圖 兩電極位點(diǎn)分別距探頭1.5 cm，兩實(shí)線電極同時(shí)發(fā)放電脈沖刺激，觀測(cè)t2和Tm。

圖7 實(shí)際測(cè)量t1、t2及Tm:黃色線為1～2點(diǎn)電脈沖發(fā)放點(diǎn)和接收點(diǎn)測(cè)量t1、t2方法;綠色箭頭:Tm的測(cè)量方法

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件。所有參數(shù)均經(jīng)過(guò)正態(tài)檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組組內(nèi)各參數(shù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，分析電、機(jī)械傳導(dǎo)與刺激電壓幅度改變間的差異及關(guān)聯(lián)關(guān)系;各組組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，比較刺激方式、刺激電壓幅度改變對(duì)各時(shí)間參數(shù)的影響;同時(shí)對(duì)T、t1、t2及Tm進(jìn)行Pearson雙變量相關(guān)性分析，以確立電、機(jī)械收縮在時(shí)間和空間的關(guān)聯(lián)關(guān)系。以上參數(shù)分析P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單點(diǎn)單極電極組、雙點(diǎn)單極電極組t1、t2的比較 各組組內(nèi):不同刺激電壓，單點(diǎn)單極電極組和雙點(diǎn)單極電極組刺激，t2差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05);t1總體趨勢(shì)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05)，見(jiàn)表1，保持刺激距離、電壓不變單純把組織多普勒速度量程由低到高改變，t2差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。各組組間:相同刺激電壓，單點(diǎn)單極電極組和雙點(diǎn)單極電極組刺激，t2總體上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2。①相同組織多普勒速度標(biāo)尺且刺激電壓幅度相同時(shí)，單點(diǎn)單極電極刺激t2與雙點(diǎn)單極電極刺激t2之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);不同組織多普勒速度標(biāo)尺、相同刺激電壓時(shí)，t1、t2差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表現(xiàn)為:降低組織多普勒速度標(biāo)尺，t1和t2均明顯延長(zhǎng)(P＜0.05)，見(jiàn)表2。②相同組織多普勒速度標(biāo)尺、刺激電極距探頭相同距離情況下，單點(diǎn)單極刺激電壓為1V和2V時(shí)，二者分別與不同電壓的雙點(diǎn)單極電極刺激相比較，雙點(diǎn)單極刺激組隨著刺激電壓升高，t2相對(duì)單點(diǎn)單極組明顯縮短(P＜0.05)，見(jiàn)表3。

2.2 Tm的比較 各組組內(nèi):生理狀態(tài)下，Tm沒(méi)有隨著刺激電壓幅度改變而出現(xiàn)明顯的變化(P＞0.05);各組組間:1～2點(diǎn)(刺激點(diǎn))和3～4點(diǎn)(接收點(diǎn))的Tm差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表4。

2.3 相關(guān)性分析 Tm與t1、t2間沒(méi)有顯著相關(guān)性(P＞0.05)，見(jiàn)表5、表6。T與t1、t2、Tm間沒(méi)有顯著相關(guān)性(P＞0.05)，見(jiàn)表7。

2.4 注射酒精前后對(duì)比 注射酒精前后，組織多普勒速度標(biāo)尺設(shè)定為0.009 m/s時(shí)，t2出現(xiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表現(xiàn)為:注射酒精造成電機(jī)械傳導(dǎo)阻滯后t2明顯縮短(P＜0.05)，Tm沒(méi)有明顯的變化(P＞0.05)。組織多普勒速度標(biāo)尺設(shè)定為0.11 m/s時(shí)，注射酒精后t2沒(méi)有明顯的變化(P＞0.05)，Tm表現(xiàn)為明顯延長(zhǎng)(P＜0.05)，見(jiàn)表8、表9。

表1 單點(diǎn)單極電極在不同電壓刺激下t1、t2比較 (ms)

表2 單點(diǎn)單極電極與雙點(diǎn)單極電極刺激模式t2間比較 (ms)

表3 單點(diǎn)單極電極刺激與不同電壓的雙點(diǎn)單極電極刺激模式T2間比較 (ms)

表4 相同刺激電壓下，刺激點(diǎn)和接收點(diǎn)間Tm的比較 (ms)

表5 不同刺激電壓下，Tm與t1間的相關(guān)性分析

表6 不同刺激電壓下，Tm與t2間的相關(guān)性分析

表7 T與t1、Tm的相關(guān)性分析

表8 t2注射酒精前、后自身對(duì)比 (ms)

表9 Tm注射酒精前、后自身對(duì)比 (ms)

3 討論

不同類(lèi)型肌纖維在收縮、電傳導(dǎo)和收縮速度等方面存在明顯差異。而不論何種肌纖維，電刺激與整體和局部肌纖維機(jī)械收縮發(fā)生和傳導(dǎo)均必定存在著多種尚未完全認(rèn)知的時(shí)空關(guān)聯(lián)關(guān)系。此前，有Neher等［7～9］通過(guò)膜片鉗技術(shù)、激光共聚焦技術(shù)、細(xì)胞內(nèi)微電技術(shù)等方法對(duì)鈣離子、膜電位變化和收縮偶聯(lián)機(jī)制等微觀方面進(jìn)行了深入地研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn):鈣火花興奮-收縮偶聯(lián)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。從鈣火化產(chǎn)生至到達(dá)峰值，骨骼肌和心肌平均需時(shí)分別約為5 ms和10 ms。Yong-Jin［10］通過(guò)雙向紅外線探測(cè)器-計(jì)算機(jī)控制的電刺激與超低溫快速冷凍固定同步技術(shù)發(fā)現(xiàn)蛙腿骨胳肌在受到電刺激后產(chǎn)生收縮約需時(shí)8 ms。以上研究均是在微觀方面對(duì)電機(jī)械收縮加以闡釋?zhuān)鴳?yīng)用臨床組織多普勒M型超聲可視化技術(shù)手段觀察骨骼肌電機(jī)械時(shí)空關(guān)系研究鮮有報(bào)道。

M型組織多普勒超聲時(shí)間分辨率極高，每秒可達(dá)2000～4000幀以上，間期觀察以個(gè)位數(shù)毫秒計(jì)，能區(qū)分和捕獲組織運(yùn)動(dòng)時(shí)相的微小差異。本研究嘗試應(yīng)用可視化的M型組織多普勒超聲觀測(cè)離體蛙腿骨骼肌在不同方式、不同電壓 電脈沖刺激下，t1、t2、T以及Tm的變化情況。試驗(yàn)中為了嘗試剔除一些影響因素，從組織多普勒速度最低起逐步提高量程，當(dāng)彩色混疊恰好和或彩色干擾消失，我們對(duì)超聲儀器組織多普勒速度標(biāo)尺設(shè)定了兩種狀態(tài)(彩色靶標(biāo)標(biāo)尺調(diào)為0.009和0.11)采集圖像，以期捕獲更多的研究信息。結(jié)果發(fā)現(xiàn):組織多普勒速度標(biāo)尺相同、電壓相同，即使刺激電極點(diǎn)位置、方式改變時(shí)，電機(jī)械延遲時(shí)間、電機(jī)械傳導(dǎo)時(shí)間以及機(jī)械傳導(dǎo)時(shí)間等均沒(méi)有明顯的差異;在不同速度標(biāo)尺的情況下，即使應(yīng)用相同電壓刺激，t1、t2也會(huì)明顯出現(xiàn)明顯差異。說(shuō)明儀器參數(shù)的設(shè)定對(duì)研究觀察結(jié)果有一定的影響;當(dāng)組織多普勒速度標(biāo)尺設(shè)為0.11時(shí)，得到的電機(jī)械延遲時(shí)間更接近10 ms，說(shuō)明通過(guò)可視化組織多普勒超聲技術(shù)可以觀察并基本接近前面眾多學(xué)者通過(guò)顯微微觀技術(shù)手段觀測(cè)的結(jié)果。

我們首先采用單點(diǎn)單極電極刺激模式，并改變刺激電壓幅度，結(jié)果發(fā)現(xiàn):t1、t2和Tm均沒(méi)有明顯差異，說(shuō)明骨骼肌細(xì)胞在發(fā)生動(dòng)作電位后，機(jī)械收縮傳導(dǎo)時(shí)間在一定的空間內(nèi)傳播沒(méi)有明顯的衰減，電機(jī)械傳導(dǎo)延遲時(shí)間同樣沒(méi)有隨著刺激電壓改變而有所變化，也間接證實(shí)了細(xì)胞膜電位的全或無(wú)變化;細(xì)胞收縮傳導(dǎo)與刺激電位強(qiáng)度的增加沒(méi)有明顯關(guān)聯(lián)關(guān)系，即機(jī)械收縮傳導(dǎo)時(shí)間并沒(méi)有隨著電壓幅度的增大而加快。但改變電極刺激方式，采用雙點(diǎn)單極電極刺激后，隨著刺激電壓的變化雙點(diǎn)單極電極刺激導(dǎo)致肌纖維機(jī)械興奮傳導(dǎo)速度明顯比單點(diǎn)單極電極刺激的快;說(shuō)明肌纖維發(fā)生動(dòng)作電位后，盡管肌肉收縮傳導(dǎo)與刺激位點(diǎn)電壓大小無(wú)關(guān)，但增加刺激位點(diǎn)(采用雙點(diǎn)單極電極刺激模式)同時(shí)增加刺激電壓幅度后，肌纖維機(jī)械興奮收縮傳導(dǎo)時(shí)間比單點(diǎn)單極刺激明顯縮短。說(shuō)明采用雙點(diǎn)單極電極刺激t2明顯縮短，是因?yàn)樗鄬?duì)于單點(diǎn)單極電極刺激t2是空間上矢量的疊加;但是，隨著單點(diǎn)單極組刺激電壓幅度的逐漸增大，這種差異性卻又消失了。推測(cè):這可能是因?yàn)楫?dāng)刺激強(qiáng)度過(guò)小時(shí)，不能引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)，此時(shí)為閾下刺激;逐漸增加刺激強(qiáng)度，收縮的幅度逐漸增大;當(dāng)全部肌肉均發(fā)生最大收縮時(shí)，此時(shí)的最小刺激值為最適刺激;超過(guò)最適刺激之后，肌肉收縮的幅度不會(huì)再增大［11］;亦可能是因?yàn)殡x體肌肉組織在持續(xù)電刺激下無(wú)氧做功，肌肉更容易發(fā)生疲勞，從而降低Na-K泵功能，泵功能的降低會(huì)影響肌肉的收縮峰值幅度［12，13］;David等證實(shí):機(jī)械引起的疲勞遠(yuǎn)小于電刺激引起的，所有感受器部位對(duì)刺激的反應(yīng)效果不一致，1/3神經(jīng)單位代謝率增加持續(xù)時(shí)間很短，刺激起始的潛伏時(shí)間的加速率與刺激強(qiáng)度成反比。從而出現(xiàn)上述在增大刺激電壓t2反而沒(méi)有差異性的結(jié)果。

我們采用組織多普勒加速度超聲技術(shù)就已經(jīng)觀察了電刺激和心肌纖維收縮運(yùn)動(dòng)的時(shí)空關(guān)系，發(fā)現(xiàn)電-機(jī)械延遲時(shí)間約為7 ms［14］。這與前面所述研究［10］結(jié)果基本一致。為了更多了解當(dāng)改變刺激電壓后電機(jī)械的關(guān)聯(lián)關(guān)系以及改變電刺激模式，電機(jī)械傳導(dǎo)有無(wú)不同變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在相同刺激強(qiáng)度情況下，針對(duì)相同距離位置點(diǎn)，采用單點(diǎn)單極電極刺激與雙點(diǎn)單極電極刺激并沒(méi)有引起t2、Tm的明顯改變。對(duì)T、t1、t2以及Tm的彼此相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，單點(diǎn)單極電極組、雙點(diǎn)單極電極組均沒(méi)有建立起良好的相關(guān)性。前面我們業(yè)已證實(shí):只要刺激引起蛙腿肌細(xì)胞發(fā)生動(dòng)作電位后，即使提高刺激電壓幅度，細(xì)胞間的電傳導(dǎo)速度、電傳導(dǎo)時(shí)間不發(fā)生改變;在傳導(dǎo)距離不變的情況下，根據(jù)距離=速度×?xí)r間公式，得出肌肉收縮速度不發(fā)生變化(因?yàn)榻Y(jié)果中t2和Tm沒(méi)有發(fā)生明顯的差異)，因此也就未能在它們之間建立起良好的關(guān)聯(lián)性;

在生理狀態(tài)下，Tm于各組內(nèi)及組間比較幾乎為恒定不變，說(shuō)明肌纖維細(xì)胞受到閾上刺激后，無(wú)論改變刺激電壓還是刺激模式，動(dòng)作電位產(chǎn)生的機(jī)械收縮運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生力學(xué)效果不再發(fā)生改變;從而說(shuō)明臨床各種方式起搏治療之所以沒(méi)有取得預(yù)期療效，很大程度取決于起搏器電極放置位置的不理想，未能使起搏電刺激介導(dǎo)的電機(jī)械傳導(dǎo)在時(shí)間和空間上與生理性或病理狀態(tài)最佳電機(jī)械傳導(dǎo)時(shí)空順序達(dá)到匹配。這就需要臨床尋找一種刺激方式保證受損肌細(xì)胞在閾上刺激后能和周?chē)＜〖?xì)胞保持時(shí)間同步性，只有這樣才能使電刺激產(chǎn)生的力學(xué)效果表現(xiàn)為最佳，也就是臨床上所說(shuō)同步性收縮。

試驗(yàn)中，我們亦嘗試了在保證蛙腿骨骼肌新鮮狀態(tài)下，在兩電極點(diǎn)中點(diǎn)位置注射酒精人為造成電機(jī)械傳導(dǎo)阻滯，采用以上同樣刺激方式觀察T、t1、t2和Tm。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，刺激電壓為1V和2V時(shí)，M型組織多普勒超聲未能觀察到機(jī)械收縮傳導(dǎo)信號(hào)，提示:注射酒精后，蛙大腿肌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境被改變或破壞，甚至導(dǎo)致部分肌細(xì)胞喪失了動(dòng)作電位，結(jié)果電產(chǎn)生機(jī)械傳導(dǎo)信號(hào)敏感性降低或者被阻斷;當(dāng)刺激電壓升高到3V以上時(shí)，才出現(xiàn)機(jī)械收縮波信號(hào)。并發(fā)現(xiàn):較低多普勒速度標(biāo)尺下的t2與未施加干預(yù)條件下前的蛙腿肌纖維電刺激比較出現(xiàn)明顯差異，表現(xiàn)為注射酒精造成電機(jī)械傳導(dǎo)阻滯后t2明顯比注射酒精前生理狀態(tài)下的要縮短。有實(shí)驗(yàn)［15］表明只要處于恒流源所形成的電場(chǎng)下，有肌肉收縮就一定有肌組織的阻抗變化，二者同步發(fā)生，收縮越強(qiáng)，阻抗變化亦越大;各單元的收縮越同步，阻抗變化越大。當(dāng)局部肌組織損傷后，首先直接破壞了興奮得傳遞，因而影響了整體肌收縮的同步性。同步性降低，阻抗變化越小，那么相同距離情況下電傳導(dǎo)時(shí)間就相對(duì)長(zhǎng)。而提高多普勒速度標(biāo)尺后，這種差異性又消失了。這個(gè)現(xiàn)象通過(guò)Wood等［16］提出的假說(shuō)似乎可以解釋:除了細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流以外，細(xì)胞內(nèi)貯存點(diǎn)相結(jié)合的和動(dòng)作電位釋放的鈣離子量，是收縮力的主要決定者。在動(dòng)作電位復(fù)極化的當(dāng)時(shí)和以后，鈣離子再結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)貯存點(diǎn)的過(guò)程按指數(shù)速率下降。結(jié)合的鈣離子量決定著細(xì)胞收縮幅度的變化，隨著不斷的刺激再結(jié)合的鈣離子減少就越明顯，收縮幅度降低就會(huì)明顯。那么在收縮幅度降低的情況下提高多普勒速度標(biāo)尺，低速信息是否就會(huì)被漏掉，結(jié)果造成縮短的t2沒(méi)有表現(xiàn)出來(lái)，這還需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)Tm和t2出現(xiàn)完全相反的狀況:在較高多普勒速度標(biāo)尺的情況下，注射酒精后Tm明顯比注射前延長(zhǎng)。這可能是因?yàn)檎＜〖?xì)胞在傳導(dǎo)電興奮產(chǎn)生收縮時(shí)逐步、逐個(gè)興奮臨近細(xì)胞的，注射酒精前兩個(gè)電極點(diǎn)間是沒(méi)有“障礙”存在的，興奮可以沿細(xì)胞間連接直線直接傳導(dǎo)過(guò)去;而注射酒精后，電傳導(dǎo)興奮產(chǎn)生收縮則不能直接通過(guò)，它要使接收點(diǎn)觀察到電機(jī)械興奮則只能繞過(guò)“障礙”，從旁邊正常細(xì)胞傳導(dǎo)過(guò)去;再有部分細(xì)胞功能受到影響后，除極時(shí)鈣離子較慢地釋放至收縮結(jié)構(gòu)(引起緩慢激活)和復(fù)極時(shí)鈣離子下降速度緩慢(引起緩慢舒張)［17］。故注射酒精后Tm出現(xiàn)延長(zhǎng)。還有一種可能是因?yàn)橥芡缺┞稌r(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，在持續(xù)電刺激下，肌肉出現(xiàn)疲勞，導(dǎo)致骨骼肌收縮和舒張能力的下降。代謝產(chǎn)物在肌細(xì)胞內(nèi)大量堆積，從而導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)單位動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度減慢［18，19］。當(dāng)然這只是推測(cè)，尚需今后進(jìn)一步試驗(yàn)研究證實(shí)。

本研究的不足之處:為了在探頭與蛙腿肌肉表面間排除空氣干擾，人為增加的耦合劑具有一定重量，可能造成骨骼肌前負(fù)荷的差異;每次選擇刺激點(diǎn)與蛙腿骨骼肌纖維走向可能存在差異等。

總之，本研究只是初步對(duì)蛙腿肌纖維在電刺激下，通過(guò)高幀頻M型組織多普勒超聲觀察電、機(jī)械收縮傳導(dǎo)和機(jī)械收縮功能在時(shí)間上的一些差異以及二者的相關(guān)性，為今后臨床進(jìn)一步改進(jìn)心臟起搏治療研究提供了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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