晏紅

(江油市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 四川江油 621701)

HBsAg的酶免疫檢驗(yàn)方法根據(jù)反應(yīng)模式分為“一步法”和“兩步法”。“一步法”是將待測樣品和酶標(biāo)記抗體同時加入到反應(yīng)孔中進(jìn)行反應(yīng),從反應(yīng)開始到反應(yīng)結(jié)束大約需要1個小時,而“兩步法”則是先將樣品加入到反應(yīng)孔中,待反應(yīng)結(jié)束后再加入酶標(biāo)記抗體,從而使得待測樣品的“捕獲反應(yīng)”和酶標(biāo)記抗體的“酶聯(lián)反應(yīng)”分開進(jìn)行,從反應(yīng)開始到結(jié)束大約需要2個小時。兩步法較一步法相比大大延長了檢測時間,降低了檢測效率,不利于基層醫(yī)院的廣泛推廣。由于HBeAg多見于HBsAg陽性的患者血清,HBeAg的檢出是HBV在體內(nèi)復(fù)制及血清具有強(qiáng)感染性的一個指標(biāo),血中HBsAg的滴度越高HBeAg的檢出率亦越高[1]。HBeAg陽性可以作為一步法測HBsAg是否出現(xiàn)鈎鐮效應(yīng)的一個判斷指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

已診斷為慢性乙肝患者的血清標(biāo)本200份來自我院2010年門診及住院病人以及肝病醫(yī)院,372份血液標(biāo)本來自我院2010年體檢者,186份陰性對照標(biāo)本來自我院門診體檢者。

1.2 試劑與儀器

試劑由北京萬泰生物藥業(yè)有限公司提供;酶標(biāo)儀KHBST——360,洗板機(jī)DNX——9620A系北京普朗新技術(shù)有限公司產(chǎn)品。

1.3 方法

嚴(yán)格按照雙抗體夾心“一步法”及“兩步法”的操作規(guī)程進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

(1)2種方法檢測758份血清HBsAg結(jié)果,見表1

(2)2種方法的靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率[2]結(jié)果(表2)

表1 2種方法檢測758份血清HBsAg結(jié)果

表2 2種方法的靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率結(jié)果

3 討論

將372例體檢者標(biāo)本分別用一步法和兩步法檢測,其陽性結(jié)果和陰性結(jié)果個數(shù)及其對應(yīng)標(biāo)本的結(jié)果是完全吻合的;另外將其中24例陽性標(biāo)本檢測其HBeAg結(jié)果均為陰性。而上述200例乙肝患者標(biāo)本用一步法測出陰性的2例再進(jìn)一步檢測HBeAg,發(fā)現(xiàn)其HBeAg為陽性,這便是一步法因鈎鐮效應(yīng)引起的HBsAg假陰性。從上表還可以知道一步法和兩步法檢測的特異度和假陽性率均相同,即二者的誤診率均為零。因此本人認(rèn)為,2011年國家強(qiáng)制將兩步法取代一步法,雖然一定程度降低了鈎鐮效應(yīng)提高了檢出率,但大大延長了HBsAg的檢測時間降低了檢測效率,這是檢驗(yàn)同仁們不愿看到的;為了提高檢測效率,方便就診較遠(yuǎn)的同志能當(dāng)天取得報告,同時發(fā)現(xiàn)鈎鐮效應(yīng)引起的假陰性,可以用一步法聯(lián)合檢測HBeAg。當(dāng)然對于足以引起鈎鐮效應(yīng)的高濃度的HBsAg,為了有利于臨床診療和治療效果的監(jiān)測,可以用靈敏度更高的電化學(xué)發(fā)光和時間分辯熒光免疫檢測進(jìn)行定量或半定量。由于電化學(xué)發(fā)光和時間分辯熒光免疫檢測大大增加了檢測成本,加重了就醫(yī)負(fù)擔(dān),對于需治療的乙肝患者進(jìn)行臨床治療效果的監(jiān)測來說是很必要的,但對于絕大多數(shù)不用臨床治療的乙肝攜帶者及健康體檢者來說卻是沒有多大的必要。本人通過大量臨床實(shí)踐認(rèn)為,對于兩對半檢測的標(biāo)本可以先用一步法檢測其HBsAg,如果HBeAg陽性而HBsAg為陰性則是因抗原濃度太高致鈎鐮效應(yīng)引起的假陰性,此時可以用靈敏度更高的電化學(xué)發(fā)光和時間分辯熒光免疫檢測進(jìn)行定量或半定量以準(zhǔn)確測出其HBsAg的含量,便于臨床治療及療效觀察;而對于隨診及體檢兩對半者只需進(jìn)行雙抗體夾心一步法檢測HBsAg就可以了;這樣既降低了檢測成本,同時也大大縮短了檢測時間,適合在基層醫(yī)院廣泛開展。

[1]許化溪.病原生物學(xué)檢驗(yàn)—理論與臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2007.

[2]馬斌榮.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006.