向含忠 強(qiáng)清芳 任正文 黃安慶 譚忠平 黎明安

（陜西省寧強(qiáng)縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，寧強(qiáng) 724400）

豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病疫苗免疫方法比較

向含忠 強(qiáng)清芳 任正文 黃安慶 譚忠平 黎明安

（陜西省寧強(qiáng)縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，寧強(qiáng) 724400）

目前，開(kāi)展豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病春秋2季基礎(chǔ)免疫，必須分步分階段實(shí)施，費(fèi)工、費(fèi)時(shí)，防疫成本大。如果對(duì)豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病免疫實(shí)施分點(diǎn)注射，同步免疫，將會(huì)簡(jiǎn)化防疫程序，大大降低防疫成本。為此，我們進(jìn)行了口蹄疫O型滅活苗、豬瘟活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合癥滅活苗3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射免疫，觀察免疫效果，為制定合理的免疫程序提供數(shù)據(jù)支持。

1 試驗(yàn)材料

1.1 疫苗

豬口蹄疫O型滅活苗（OZK/93株），中牧股份蘭州生物藥廠生產(chǎn)；豬瘟活疫苗（脾淋源），四川華派生物制藥有限公司生產(chǎn)；豬繁殖與呼吸綜合癥滅活苗（NVDC-JXA1株），南京天幫生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

選擇未經(jīng)豬瘟、豬口蹄疫、豬藍(lán)耳病免疫45～80日齡以上的斷乳仔豬26頭（其中，80日齡以上7頭，45～60日齡19頭）。

1.3 診斷試劑

O型口蹄疫間接血凝診斷液及陽(yáng)性血清、豬瘟間接血凝診斷液及陽(yáng)性血清均是中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)；豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)試紙卡（ELISA），上海快靈生物科技有限公司生產(chǎn)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)分組

第1組為80日齡以上的7頭豬，第2組為45～60日齡豬，2組飼養(yǎng)環(huán)境、飼料配方、免疫方法相同。

2.2 免疫方法

3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫。在豬左頸部、右頸部和后腿胴部肌肉分別分點(diǎn)注射豬瘟脾淋活疫苗、豬O型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合癥滅活疫苗。

免疫劑量：豬瘟疫苗1頭份/頭，口蹄疫疫苗1ml/頭，高致病性藍(lán)耳病滅活苗2ml/頭。

2.3 觀察臨床反應(yīng)

對(duì)豬進(jìn)行免疫后，臨床觀察7～10 d，觀察豬只精神狀況是否良好，采食是否正常，體溫有無(wú)升高，是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)。

2.4 免疫抗體檢測(cè)

2.4.1 母源抗體檢測(cè) 于免疫前（同步免疫當(dāng)天7月28日）采集25頭仔豬血液2 ml/頭，分離血清，進(jìn)行豬瘟、O型口蹄疫、豬藍(lán)耳病母源抗體檢測(cè)。

2.4.2 免疫抗體檢測(cè) 于免疫后34 d采集試驗(yàn)豬25頭血液2 ml/頭，分離血清，進(jìn)行O型口蹄疫、豬瘟、藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)。

2.4.3 免疫抗體檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)豬瘟抗體檢測(cè)：采用間接血凝方法檢測(cè)，具體操作參照NY/ SY156-2000標(biāo)準(zhǔn)。判定標(biāo)準(zhǔn)：抗體效價(jià)≥1∶32，則判定被檢血清豬瘟抗體合格；抗體效價(jià)＜1∶32，則判定被檢血清豬瘟抗體不合格。

O型口蹄疫抗體檢測(cè)：采用間接血凝方法檢測(cè)，具體操作參照農(nóng)業(yè)部口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)。判定標(biāo)準(zhǔn)：抗體效價(jià)≥1∶128，則判定被檢血清豬O型口蹄疫抗體合格；抗體效價(jià)＜1∶128，則判定被檢血清O型口蹄疫抗體不合格。

藍(lán)耳病抗體檢測(cè)：具體操作參照試紙卡說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)：被檢樣品檢測(cè)線（T）條帶色澤≥對(duì)照卡1∶40（效價(jià)），則判定被檢血清藍(lán)耳病抗體合格；被檢樣品檢測(cè)線（T）條帶色澤對(duì)照卡＜1∶40（效價(jià)），則判定被檢血清藍(lán)耳病抗體不合格。

3 結(jié)果

3.1 臨床不良反應(yīng)

第1組在采血時(shí)及免疫前后一切正常，無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生；第2組于7月28日中午免疫注射前采血時(shí)，1頭45日齡仔豬出現(xiàn)口吐白沫、眼瞼腫脹、共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀后迅速死亡；免疫注射半小時(shí)內(nèi)有3頭45日齡左右的仔豬表現(xiàn)體溫稍有升高、口吐白沫、精神不振、食欲下降等癥狀，于次日晨恢復(fù)正常，之后一切正常。采血時(shí)發(fā)生突然死亡可能與當(dāng)天舍內(nèi)氣溫較高、圈舍擁劑出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)引發(fā)仔豬水腫病有關(guān)；免疫后出現(xiàn)反應(yīng)，可能與免疫時(shí)氣溫較高及圈舍擁劑也有一定的關(guān)系。

3.2 血清檢測(cè)結(jié)果

第1次檢測(cè)于免疫前34 d對(duì)25頭試驗(yàn)豬采血，分離血清后進(jìn)行口蹄疫O型、豬瘟及藍(lán)耳病母源抗體檢測(cè)；第2次于免疫后34天對(duì)25頭試驗(yàn)豬采血，分離血清后進(jìn)行口蹄疫O型、豬瘟及藍(lán)耳病免疫抗體檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果詳見(jiàn)表1。

從表1可以看出，第1組為80日齡以上的7頭生豬，未免疫前豬瘟、口蹄疫、藍(lán)耳病幾乎沒(méi)有免疫抗體，免疫后34 d3種傳染病免疫抗體合格率由0上升到100%，平均免疫效價(jià)均較高，說(shuō)明本組豬群對(duì)這3種傳染病有了較強(qiáng)的抵抗力；第2組免疫后，豬瘟、藍(lán)耳病免疫抗體合格率達(dá)到了100%，平均免疫效價(jià)也較高，說(shuō)明對(duì)豬瘟、藍(lán)耳病具有了較強(qiáng)的抵抗力，口蹄疫免疫合格率及平均免疫效價(jià)雖有較大提高，但免疫抗體合格率未達(dá)國(guó)定標(biāo)準(zhǔn)，平均免疫效價(jià)也較低。

表1 血清檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

4 結(jié)論

4.1 O型口蹄疫、豬瘟和豬藍(lán)耳病疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫注射，臨床上無(wú)嚴(yán)重的不良反應(yīng)。

4.2 對(duì)于80日齡以上的豬3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，3種病群體免疫抗體合格率、平均效價(jià)均高，具有較好的免疫效果。

4.3 對(duì)于60日齡以下的豬3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射，豬瘟、藍(lán)耳病群體免疫抗體合格率和平均效價(jià)均高，免疫效果好，但口蹄疫抗體群體合格率不高，平均效價(jià)也不高，免疫效果不佳。

5 討論

5.1 分析第1組3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射后從抗體效價(jià)可以看出，豬瘟、口蹄疫、藍(lán)耳病群體動(dòng)物免疫抗體合格率及平均效價(jià)均較高，似乎3種疫苗之間不存在相互干擾或抑制現(xiàn)象。

5.2 分析第2組3種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射后從抗體效價(jià)可以看出，豬瘟、藍(lán)耳病免疫抗體合格率及平均效價(jià)均較高，但口蹄疫免疫效果欠佳，似乎與母原抗體或應(yīng)激反應(yīng)較重相關(guān)，有待進(jìn)一步試驗(yàn)和觀察。

5.3 本次試驗(yàn)由于時(shí)間較為倉(cāng)促，未能對(duì)分點(diǎn)免疫注射后的抗體消長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行觀察，導(dǎo)致3種傳染病免疫抗體究竟何時(shí)開(kāi)始上升無(wú)法明確，有待進(jìn)一步研究和觀察。