高西紅

（山東省郯城縣畜牧局，郯城 276100）

山東省臨沂市郯城縣慶剛家禽養(yǎng)殖合作社雞場所養(yǎng)肉雞出現(xiàn)了嚴(yán)重的慢性呼吸道疾病癥狀。其中，2、4、7棚尤其嚴(yán)重。從患病雞只癥狀和剖檢變化推斷為雞支原體病，通過從病雞中分離病原微生物，進(jìn)而進(jìn)行分離培養(yǎng)和顯微鏡檢查，雞胚的接種、全血凝集實驗，最后確診為雞支原體病。通過藥敏實驗，確定合適藥物，有效控制了疫情。

1 流行病學(xué)

雞對本病易感，病雞和隱性感染雞是本病的傳染源。本病既可以垂直傳播，又可以水平傳播。傳播途徑：（1）雞通過咳嗽，噴嚏的飛沫和塵埃經(jīng)呼吸道傳染；（2）被支原體污染的水、飼料、用具等通過消化道傳染；（3）垂直傳播可構(gòu)成代代相傳，使本病在雞群中連續(xù)不斷。本病在雞群中傳播較為緩慢，但在新發(fā)病的雞群中傳播較快。

2 臨床癥狀

病雞初期精神不振，食欲減退或不食，腹瀉。鼻液增多，流漿液性或粘液性鼻液，部分病雞鼻孔周圍和頸部羽毛粘污明顯，鼻孔堵塞，妨礙呼吸，頻頻搖頭或發(fā)出奇聲。如鼻甲骨或氣管粘膜發(fā)炎時，漿液增多，呼吸困難，打噴嚏。嚴(yán)重時，病雞呼吸困難伸頸張口喘，呼吸時發(fā)出啰音，咳嗽。有時病初流淚，繼而眼瞼腫脹，眼瞼上下粘合，甚至失明。全身癥狀表現(xiàn)為體溫升高，生長發(fā)育遲緩，逐漸消瘦。

3 病理變化

單純感染敗血支原體的病例，可見輕度的鼻和眶下竇炎。自然感染的病例多為混合感染，可見到呼吸道粘膜水腫，充血，肥厚，竇腔內(nèi)充滿粘液和干酪樣滲出物。早期氣囊輕度渾濁，外觀呈灰白色，水腫，表層有增生的結(jié)節(jié)狀病灶。病情嚴(yán)重時，氣囊增厚，囊腔內(nèi)含有大量干酪樣滲出物。

4 實驗室檢驗

采集慶剛家禽養(yǎng)殖合作社的患病雞的病料。用雞肉浸出湯、雞血清、葡萄糖、瓊脂等，煮沸溶解，高壓滅菌，制作好培養(yǎng)基，立即分裝成平板。在無菌情況下，取有典型癥狀的雞只的支氣管中下部的滲出液，加液體培養(yǎng)基磨碎制成懸液，接種于液體培養(yǎng)基，放于27℃的恒溫箱中培養(yǎng)5 d。

將接種環(huán)在酒精燈上火焰消毒，然后粘取雞的呼吸道下部的滲出液體，均勻的涂抹在玻璃片上，待其自然干燥或在酒精燈上晃動使液體干燥，然后放于過濾盆的2條玻璃棒上，用滴管吸取姬姆薩染色液滴于玻璃片上，5 min后，傾斜玻璃片倒掉姬姆薩染色液，再在玻璃片上滴上相同劑量的酒精，3 min后，用生理鹽水沖洗掉殘留的染色液，沖洗干凈后，自然風(fēng)干或用濾紙吸干水分，放于顯微鏡下觀察。

取病雞的呼吸道無細(xì)菌污染的滲出液經(jīng)卵黃囊接種于7日齡雞胚。接種在24 h以內(nèi)死亡的雞胚為細(xì)菌感染死亡；如果是霉形體，在5～7 d可以引起雞胚的死亡，可見到雞胚的呼吸道有干酪樣的滲出物，關(guān)節(jié)膿腫，肝和脾腫大，心包炎，或全身水腫和肝臟壞死等癥狀。多次繼代后，死亡更加有規(guī)律且病變更明顯。該病菌容易產(chǎn)生抗藥性，而且各地的血清型和流行情況不同，根據(jù)藥敏實驗選擇藥物。將紅霉素，強力霉素，鏈霉素，慶大霉素，氯霉素，丁胺卡那霉素，新霉素，環(huán)丙沙星，蒽諾沙星的注射液10倍稀釋，取無菌濾紙片分別浸泡于上述溶液中，制成藥敏濾紙片，再將這些藥敏濾紙片分別置于有雞血清的瓊脂培養(yǎng)基中，放于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)24 h。多次重復(fù)試驗，觀察抑菌直徑，選用合適藥物。判定標(biāo)準(zhǔn)：抑菌圈直徑6 mm以下為不敏感，7～9 mm為低敏感，10～15 mm為中敏感，16 mm以上為高敏感。

在清潔的白瓷板或玻璃板上，滴上2滴著色的已知抗原，然后用注射器刺破被檢雞只的翅靜脈，采少量血液，滴1滴于白瓷板上，用牙簽將血液與抗原充分混勻，片刻后將白瓷板輕輕的左右搖晃，在1～2min內(nèi)即可判定結(jié)果。

5 結(jié)果與分析

5.1 支原體分離

通過細(xì)菌的分離與培養(yǎng)，可見到菌落，典型的菌落呈圓形，微小，透明如露滴狀。在40倍光學(xué)顯微鏡下觀察時，表面光澤閃光，如玻璃珠樣，菌落中心常深埋于培養(yǎng)基中，呈致密的圓形的突起，周圍環(huán)繞以透明的金邊，突起部分變?yōu)榈S色乃至棕黃色。鑒定為支原體。

5.2 顯微鏡觀察

大部分分離菌呈球狀，但還有的呈絲狀，螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)。小球狀是基本形態(tài)，姬姆薩染色良好呈淡紫色。

5.3 凝集反應(yīng)

將血液滴入抗原中，如果出現(xiàn)藍(lán)紫色凝塊的為陽性；僅在液滴邊緣部分出現(xiàn)藍(lán)紫色帶，或超過2 min僅在邊緣部分出現(xiàn)顆粒狀物，即可判為可疑；經(jīng)過2min液滴無變化的為隱性。

通過了解觀察雞只，支原體的高發(fā)時期一般為4～7周齡，此時雞只生長發(fā)育很快，可對營養(yǎng)的需求造成雞只的抵抗力有所下降，加之飼養(yǎng)環(huán)境不好，此時雞容易得病。在飼養(yǎng)過程中，天氣的變化，晝夜的溫度差異很大，受飼的條件限制及棚里面的溫度不能恒定，溫差在4℃。另外，雨天也促成雞只支原體病暴發(fā)。

藥敏試驗結(jié)果表明，強力霉素和環(huán)丙沙星為高敏，選擇2種藥治療，用飲水加藥治療。同時，加入了一些抗病毒的中藥新型支沖靈。1個療程以后，雞只的死亡率明顯的下降，采食量增加，支原體和大腸桿菌得到了有效的控制。