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        桑椹質(zhì)量分析方法及其臨床應(yīng)用研究的進(jìn)展

        2012-01-25 14:14:16甄漢深馬雯芳
        中國(guó)民族民間醫(yī)藥 2012年16期
        關(guān)鍵詞:桑椹光度法分光

        耿 旦 甄漢深 馬雯芳,3

        1.廣西欽州市第一人民醫(yī)院,廣西 欽州 535000;2.廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西 南寧 530001 3.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川 成都 611137

        桑椹為桑科植物桑Morus alba L.干燥的果穗。又名桑葚、桑實(shí)、烏椹、黒椹等。中醫(yī)傳統(tǒng)認(rèn)為,其味甘、酸,性寒,歸肝、腎經(jīng)。具有滋陰補(bǔ)血,生津潤(rùn)燥之功效。主治肝腎陰虛,頭暈?zāi)垦?,腰酸耳鳴,須發(fā)早白,失眠多夢(mèng),津傷口渴,消渴,腸燥便秘等證[1]。桑椹的使用歷史悠久,桑椹入藥,始見(jiàn)于唐代《新修本草》,其后《本草綱目》、《本草備要》等本草書籍均有記載,近代《全國(guó)中草藥匯編》[2]、《中藥大辭典》[3]等均收錄,并在藏、蒙、侗、苗、傈傈、傣、佤、阿昌、哈尼、水、土家、瑤等多個(gè)民族的民間藥書中有記載[4]。桑椹營(yíng)養(yǎng)成分主要有維生素、礦物質(zhì)、脂肪酸、多糖、蛋白質(zhì)等,與其藥用功效相關(guān)的化學(xué)成分主要有花色苷、非色素酚類物質(zhì)、多糖和白藜蘆醇等[5]。本文概述桑椹近三年來(lái)質(zhì)量分析方法及其臨床應(yīng)用研究。

        1 質(zhì)量分析方法

        1.1 分光光度法 楊奕[6]以蘆丁為對(duì)照品,采用紫外分光光度法測(cè)定黃酮類在桑椹口服液中的含量,為桑椹口服液制劑提供了質(zhì)量控制依據(jù)。張錦衛(wèi)等[7]以分光光度法測(cè)定浙江不同產(chǎn)地桑椹中原花色素的含量,結(jié)果表明,不同產(chǎn)地的桑椹中所含的原花色素含量有差異。伍春等[8]利用紫外分光光度法對(duì)4個(gè)果桑品種桑椹中的總多酚、總黃酮等抗氧化物質(zhì)進(jìn)行含量測(cè)定和總還原活力的測(cè)定、比較,測(cè)定結(jié)果為桑椹制品的原料藥選擇提供了參考依據(jù)。王振江等[9]研究桑椹成熟過(guò)程中酚類物質(zhì)、總黃酮及花色苷含量的動(dòng)態(tài)變化。以蘆丁為對(duì)照品,采用Al(NO3)3-NaNO2分光光度比色法,測(cè)定總黃酮含量;以沒(méi)食子酸為對(duì)照品,采用福林-肖卡 (Folin-Ciocaltu)法測(cè)定總酚類物質(zhì)的含量;采用pH示差法測(cè)定總花色苷的含量。結(jié)果表明桑椹在幼果期及成熟期的總酚類和總黃酮類含量較高,而花色苷則在白熟期開(kāi)始大量合成,在紫黑期含量最高。閆祝煒等[10]采用分光光度法,以沒(méi)食子酸為對(duì)照品測(cè)定紅色、黃白色、黑紫色3種顏色桑葚鮮果中的總多酚,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黑紫色桑葚鮮果中總多酚的含量相對(duì)于其他兩種為高?;萸锷车龋?1]采用分光光度法,以葡萄糖為對(duì)照品,運(yùn)用蒽酮-硫酸法對(duì)桑葚烏發(fā)粥中水提醇沉所得供試品溶液進(jìn)行多糖含量的測(cè)定。

        1.2 薄層層析色譜法 王錦紅等[12]采用薄層鑒別方法,根據(jù)TLC法2005年版《中國(guó)藥典 (一部)》附錄ⅥB對(duì)長(zhǎng)壽長(zhǎng)樂(lè)口服液中的桑椹進(jìn)行鑒別試驗(yàn)。

        1.3 HPLC法 耿旦[13]等采用HPLC法測(cè)定桑椹中蘆丁的含量,以單因素考察優(yōu)化提取桑椹樣品液,得到最佳提取條件,考察流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)等建立其最佳的HPLC測(cè)定方法。趙康等[14]以不同成熟期的鮮果桑椹為研究對(duì)象,采用HPLC方法,測(cè)定桑椹中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的含量及在不同品種的桑椹成熟過(guò)程中二者的含量差異。結(jié)果表明,白藜蘆醇含量較高的最佳采摘期為紅果剛轉(zhuǎn)紫時(shí)。游元元等[15]還采用HPLC法建立了桑椹藥材的指紋圖譜。采收不同基源不同產(chǎn)地的桑椹藥材,對(duì)其化學(xué)成分組成和數(shù)量進(jìn)行聚類分析,結(jié)果表明桑椹藥材品質(zhì)的好壞與產(chǎn)地?zé)o明顯相關(guān)性,與藥材加工或貯存有著密切關(guān)系。耿旦等[16]對(duì)廣西產(chǎn)桑椹進(jìn)行HPLC指紋圖譜研究,標(biāo)定了10個(gè)共有峰,相似度較高,相似度均大于0.9。李升鋒等[17]利用HPLC發(fā)對(duì)不同品種桑椹糖酸組分進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)果糖和葡萄糖是桑椹的主要糖類,桑椹不含有蔗糖。各品種桑椹均含有有機(jī)酸,如檸檬酸、蘋果酸、琥珀酸、草酸、丙酸和富馬酸等,大部分品種桑椹含有酒石酸,部分桑椹含有丙酮酸。檸檬酸、蘋果酸及琥珀酸含量較高,其中檸檬酸占總酸比例41.30% ~68.80%。

        1.4 氣相色譜-質(zhì)譜法 陳娟等[18]用二氯甲烷對(duì)桑椹汁進(jìn)行萃取、離心、脫水、濃縮后得到樣品,再運(yùn)用GC-MS的方法對(duì)其進(jìn)行香氣成分分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同品種的桑椹中含有四十到五十種揮發(fā)性成分,其中高脂脂肪酸的相對(duì)含量最高,是重要的香氣前體物質(zhì)。還表明了不同品種的桑椹有著其獨(dú)特的香氣成分。張莉等[19]也采用文獻(xiàn)[18]的樣品處理方法得到樣品,在運(yùn)用GC-MS的方法對(duì)桑椹汽酒中的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析,檢出69個(gè)峰,鑒定了63種化合物,以醇類和酯類化合物為主。

        1.5 氨基酸自動(dòng)分析法 劉峻池等[20]采用氨基酸自動(dòng)分析儀,對(duì)新育成的桑椹品種中的氨基酸成分進(jìn)行檢測(cè)與比較。結(jié)果表明桑椹中含有十多種氨基酸,其中也包括部分人體必需的氨基酸,而培育過(guò)程中受基因劑量的影響,染色體加倍會(huì)影響到桑樹(shù)是否豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的問(wèn)題。

        1.6 火焰原子吸收光譜法 梁多[21]采用火焰原子吸收光譜法測(cè)定桑椹中鉀 (K)、鈉 (Na)、鈣 (Ca)、鎂 (Mg)、鐵 (Fe)、鋅 (Zn)、錳 (Mn)、銅 (Cu)八種微量元素含量,桑椹中質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高的依次是鉀 (K),鈣 (Ca),鎂(Mg),鈉 (Na),鐵 (Fe),上述各種元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于100 mg/kg,呈現(xiàn)出高鉀低鈉的特點(diǎn)。

        2 臨床應(yīng)用

        2.1 治療血枯閉經(jīng)及婦女更年期綜合癥 更年期綜合癥是由雌激素水平下降而引起的一系列癥狀。中醫(yī)認(rèn)為更年期綜合征是腎氣不足,天癸衰少,以至陰陽(yáng)平衡失調(diào)造成。因此在治療時(shí),以補(bǔ)腎氣、調(diào)整陰陽(yáng)為主要方法。盧吉良等[22]采用女貞桑椹飲治療婦女更年期綜合癥80例,臨床結(jié)果:治愈70例,較好8例,無(wú)效2例,有效率達(dá)到97.5%。

        2.2 治療慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜 原發(fā)性血小板減少性紫癜是一種免疫性綜合病征,是常見(jiàn)的出血性疾病。特點(diǎn)是血循環(huán)中存在抗血小板抗體,使血小板破壞過(guò)多,引起紫癜;而骨髓中巨核細(xì)胞正?;蛟龆?,幼稚化。臨床上可分為急性及慢性兩種,二者發(fā)病機(jī)理及表現(xiàn)有顯著不同。趙華等[23]用桑椹三仙膠治療30例慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜,以6個(gè)月為療程,并觀察其療前療后癥狀變化。臨床結(jié)果表明,治療有效率達(dá)到89.99%,桑椹三仙膠對(duì)此病癥有較好的臨床療效。

        2.3 治斑禿 斑禿俗稱“鬼剃頭”,是一種驟然發(fā)生的局限性斑片狀的脫發(fā)性毛發(fā)病。中醫(yī)認(rèn)為一般是肝腎不足,精血虧虛等引起。李清平等[24]采用梅花針,并結(jié)合首烏桑椹生發(fā)湯內(nèi)服治療42例斑禿患者,總有效率達(dá)83.33%。

        3 結(jié)語(yǔ)

        3.1 桑椹質(zhì)量分析方法,有分光光度法、薄層色譜法、HPLC法、氣相色譜-質(zhì)譜法、氨基酸自動(dòng)分析法等。但在《中國(guó)藥典》一部2010年版中[25],桑椹的鑒別方法只收載有性狀和顯微鑒別項(xiàng),無(wú)薄層色譜法;在定量分析中,只收載有浸出物測(cè)定,而無(wú)有效成分的含量測(cè)定項(xiàng)。筆者建議應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)上述方面的研究,盡快完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),以保證其用藥的質(zhì)量。

        3.2 桑椹補(bǔ)血滋陰,生津潤(rùn)燥等,為健體美顏,抗衰老的佳果與良藥。不僅在臨床上有較多應(yīng)用,在民間也用于多種疾病治療,如慢性咽炎、減肥和通便、糖尿病、耳鳴、老年花眼等等。在現(xiàn)代臨床應(yīng)用中,可以利用桑椹治療血枯閉經(jīng)、治療婦女更年期綜合癥、治療慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜、治斑禿等。今后應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)這些方面的研究,以使桑椹能進(jìn)一步開(kāi)發(fā)與應(yīng)用。

        [1]《中華本草》編委會(huì).中華本草 (第二卷)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:531.

        [2]《全國(guó)中草藥匯編》編寫組.全國(guó)中草藥匯編 (第二卷)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:698.

        [3]南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典 (第二版)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:2790.

        [4]賈敏如,李星煒.中國(guó)民族藥志要[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科出版社,2005:411.

        [5]張文娜,姚清國(guó),俞龍泉,等.桑椹化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(14):8371-8375.

        [6]楊奕.桑椹口服液中黃酮類化合物蘆丁含量的測(cè)定研究[J].金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,10(3):61-63.

        [7]張錦衛(wèi),竹劍平.浙江不同產(chǎn)地桑椹中原花色素的含量測(cè)定[J].藥物分析雜志,2010,30(6):1136-1137.

        [8]伍春,徐立,周林,等.幾個(gè)果桑品種桑椹中的主要抗氧化活性物質(zhì)含量比較[J].蠶業(yè)科學(xué),2010,36(2):337-340.

        [9]王振江,羅國(guó)慶,唐翠明,等.桑椹成熟過(guò)程中酚類物質(zhì)、總黃酮及花色苷含量的動(dòng)態(tài)變化[J].熱帶作物學(xué)報(bào),2011,32(9):1658-1660.

        [10]閆祝煒,鹿 毅,楊 濤.分光光度法測(cè)定3種顏色桑葚中的總多酚[J].光譜實(shí)驗(yàn)室,2011,28(1):325-328.

        [11]惠秋沙.蒽酮-硫酸法測(cè)定桑葚烏發(fā)粥中粗多糖的含量[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2011,10:105-107.

        [12]王錦紅,吳朦俊.長(zhǎng)壽長(zhǎng)樂(lè)口服液中3味藥材的薄層鑒別研究[J].藥物鑒定,2010,19(10):37.

        [13]耿旦,馬雯芳,甄漢深,等.RP-HPLC測(cè)定桑椹中蘆丁的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(14):63-65.

        [14]趙康,蘇政榮,楊碧文,等.桑椹中白藜蘆醇及白藜蘆醇苷測(cè)定方法的建立及含量比較[J].食品科學(xué),2010,31(14):241-244.

        [15]游元元,萬(wàn)德光,楊文宇,等.桑椹藥材HPLC圖譜研究[J].食品科學(xué),2010,31(2):141-144.

        [16]耿旦,馬雯芳,丘琴,等.廣西產(chǎn)桑椹HPLC指紋圖譜研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(22):54-56.

        [17]李升鋒,張友勝,池建偉,等.不同品種桑椹糖酸組分分析[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2011,(7):108-111.

        [18]陳娟,闞建全,楊蓉生.不同品種桑椹香氣成分的GC-M分析[J].食品科學(xué),2010,31(18):239-243.

        [19]張莉,王華.桑椹汽酒揮發(fā)性成分的氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].蠶業(yè)科學(xué),2010,36(1):152-156.

        [20]劉峻池,徐立,伍春.四倍體果桑新品種嘉陵30號(hào)桑椹中的氨基酸組成及其含量[J].蠶業(yè)科學(xué),2011,37(1):112-115.

        [21]梁多.火焰原子吸收光譜法測(cè)定桑椹微量元素[J].農(nóng)產(chǎn)品加工·學(xué)刊,2011(8):102-103.

        [22]盧吉良,李正,王預(yù)霞.女貞桑椹飲治療婦女更年期綜合癥臨床研究[J].臨床研究,2011,30(8):336-337.

        [23]趙華,劉麗波.桑椹三仙膠治療慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜30例療效觀察[J].中醫(yī)藥信息,2011,28(5):67-68.

        [24]李清平,石成蘭,王興玲,等.梅花針與首烏桑椹生發(fā)湯合治斑禿42例[J].江蘇中醫(yī)藥,2011,43(10):69.

        [25]中國(guó)藥典.一部[S].2010.281.

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