張京楠

（山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院藥劑科，山東 沂水 276400 ）

紅花水提工藝影響因素研究

張京楠

（山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院藥劑科，山東 沂水 276400 ）

目的 對紅花水提工藝的影響因素進(jìn)行研究。方法 采用高效液相色譜法，以羥基紅花黃色素A為評價指標(biāo)，采用正交實驗設(shè)計考察紅花水提工藝中的影響因素。結(jié)果 提取時間和提取次數(shù)對紅花水提具有顯著影響。結(jié)論 選定的紅花水提工藝為：室溫浸提3次；第1、2次加15倍水提取4h，第三次加10倍水浸提2h。

羥基紅花黃色素A；水提工藝；正交設(shè)計

紅花為菊科植物紅花（Carthamuts tinctorius L．）的管狀花，為主要活血化瘀的中藥之一，常用于血脈閉塞、跌打損傷、瘡瘍腫痛等癥。目前世界上共有13種紅花，我國僅有一種。紅花的化學(xué)成分主要為黃酮和脂肪油兩大類，其中水溶性的查耳酮類化合物紅花黃色素（safflor yellow，SY）為紅花的主要有效成分[1-2]，它具有擴張冠狀動脈，抗氧化，保護心肌，降血壓，免疫抑制和腦保護等多種藥理功效。

為優(yōu)化紅花提取工藝，筆者首先參照文獻(xiàn)[3-5]方法進(jìn)行預(yù)試驗，比較水煎煮、室溫浸提、超聲三種提取工藝對紅花中主要成分羥基紅花黃色素A提取的影響，方法如下：取紅花5g，加15倍水，煎煮120min；取紅花5g，加15倍水，室溫浸提120min；取紅花5g，加15倍水，超聲提取30min。將上述提得的3份提取液，分別轉(zhuǎn)移至500mL量瓶中，加水至刻度，再吸取5mL至25mL量瓶中，加25%甲醇至刻度，0.45μm微孔濾膜濾過，HPLC進(jìn)樣10μL檢測，結(jié)果測定每100g紅花中提得羥基紅花黃色素A量分別為1.011g，1.314g，2.09g。根據(jù)結(jié)果，最優(yōu)的提取方式為超聲提取，其次為室溫浸提?？紤]到工業(yè)生產(chǎn)中的可實現(xiàn)性，我們選擇室溫浸提的方式進(jìn)行影響因素考察。

1 儀器、試劑與藥材

1.1 儀器

Agilent1100高效液相色譜系統(tǒng)，美國安捷倫公司；AT201型電子分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；Q-100型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司。

1.2 試劑與試藥

羥基紅花黃色素A，中國藥品生物制品檢定所；甲醇、乙腈為色譜純；水為自制雙蒸水；紅花取自本院中藥庫，經(jīng)臨沂市藥檢所鑒定為菊科植物紅花的干燥花。

試驗方法與結(jié)果

2.1 紅花室溫浸提工藝正交設(shè)計：

采用室溫水浸提法，以羥基紅花黃色素A提得量為指標(biāo)，考察影響水提工藝的因素（即加水量、浸泡時間、提取次數(shù)），進(jìn)行正交設(shè)計，如表1。將5g紅花的提取液轉(zhuǎn)移至500mL量瓶中，加水至刻度，再吸取5mL至25mL量瓶中，加25%甲醇至刻度，0.45μm微孔濾膜濾過，HPLC進(jìn)樣10μL檢測，測定羥基紅花黃色素A提得量作為指標(biāo)。

表1 室溫浸提因素水平正交設(shè)計

2.2 羥基紅花黃色素A含量測定的方法

依《中國藥典》2005版一部紅花項下含量測定方法[6]，采取如下色譜條件檢測：Agilent Zorbax C-18（150 mm×4.6 mm，5 μm） 加預(yù)柱；以甲醇-乙腈-0.7%磷酸 （26∶2∶72）為流動相；檢測波長403nm；流速1mL/min；柱溫為室溫；進(jìn)樣量10μL；理論塔板數(shù)以羥基紅花黃色素A計不低于3000。

2.3 紅花室溫浸提工藝正交實驗結(jié)果與方差分析

根據(jù)表2，提取時間（B因素）和提取次數(shù)（C因素）對紅花提取有顯著影響。綜合考慮節(jié)能、高產(chǎn)、高效的因素，我們最終選定紅花室溫水浸提的工藝為：室溫浸提3次；第1、2次加15倍水提取4h，第三次加10倍水浸提2h。

2.4 紅花室溫浸提工藝驗證

對選定室溫浸提工藝進(jìn)行三次平行試驗加以驗證（表3）。試驗結(jié)果表明，按照選定工藝100g紅花藥材中羥基紅花黃色素A提得量平均在1.5%左右，與正交試驗結(jié)果吻合，證明該工藝具有可行性。

表2 室溫浸提正交實驗設(shè)計與方差分析

4 討 論

紅花為菊科植物紅花（Carthamuts tinctorius L．）的管狀花，紅花中主要成分羥基紅花黃色素A，水煎煮、室溫浸提、超聲為三種提取羥基紅花黃色素A工藝。由于羥基紅花黃色素A不穩(wěn)定，其水溶液中的保留率隨溫度升高和時間延長而下降[7]，所以在紅花提取時應(yīng)盡量避免長時間浸泡和高溫處理[8]。本研究綜合考慮節(jié)能、高產(chǎn)、高效的因素，我們選定的紅花室溫水浸提的工藝為：室溫浸提3次；第1、2次加15倍水提取4h，第3次加10倍水浸提2h。通過紅花水提工藝驗證試驗結(jié)果該工藝具有可行性，可為紅花水提工藝的優(yōu)化提供參考。

表3 紅花水提工藝驗證試驗結(jié)果

[1] 施峰,劉焱文.紅花的化學(xué)成分及藥理研究進(jìn)展[J].時珍國醫(yī)國藥,2006,17(9):1666-1667.

[2] 楊志福,梅其炳,蔣永培,等.紅花有效成分及藥理作用[J].西北藥學(xué)雜志,2001,16(3):13l-l33.

[3] 王義潮, 李多偉, 孫詩清,等.從紅花中提取紅花黃色素最佳工藝條件的研究[J].中國新醫(yī)藥,2004,2(2):27-28.

[4] 陳燕忠,張紀(jì)興,呂竹芬.紅花中紅花黃素A的分離工藝研究[J].中藥材,2004,27(9):644-647.

[5] 楊志福.不同提取方法對紅花黃素含量的影響[J].西北藥學(xué)雜志,2000,15(6):255.

[6] 中華人民共和國藥典委員會.中國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.

[7] 金鳴,臧寶霞,李金榮,等.羥基紅花黃色素A熱穩(wěn)定性的初步研究[J].中國中藥雜志,2003,28(12):1197-1198.

[8] 周平蘭,夏新華.紅花黃色素提取工藝的研究[J].湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2004,24(1):11-12.

R282.7

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1671-8194（2012）16-0080-02

10.15912/j.cnki.gocm.2012.16.029