唐源江，武曉燕，曹雯靜

(華僑大學(xué)生物工程與技術(shù)系，福建廈門，361021)

所稱酸茶為采集原植物楊梅葉蚊母樹(Distylium myricoides Hemsl.)嫩葉經(jīng)與鐵觀音茶相同工藝制成的茶成品。楊梅葉蚊母樹隸屬金縷梅科(Hamamelidaceae)蚊母樹屬(Distylium)，國內(nèi)分布于四川、安徽、浙江、福建、江西、廣東、廣西、湖南及貴州東部等地區(qū)［1］，常用作綠化樹木，但由于它具消腫利尿功效，也入藥用于治水腫、小便不利等癥。在福建、浙江部分地區(qū)有采集其葉加工成茶的習(xí)慣，稱其為野茶(主要浙江)，或酸茶、九條茶(福建)。楊梅葉蚊母樹主要含有黃酮、二苯駢呋喃和鞣質(zhì)類，有抑制α-淀粉酶，α-葡萄糖苷酶和抗氧化性等活性［2］。據(jù)初步研究，通過飲用酸茶不僅具有良好的清熱解毒效果，還有較好的降低血脂、膽固醇等功效，因而引起人們的注意。目前，在福建的泉州、莆田等茶產(chǎn)業(yè)比較發(fā)達(dá)的地區(qū)已有成品茶上市。本實(shí)驗(yàn)對(duì)市售酸茶的水分、水浸出物、茶多酚、游離氨基酸、可溶性總糖、葉綠素、總黃酮及 Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Ni等含量進(jìn)行測定，以期為酸茶的進(jìn)一步開發(fā)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

酸茶成品，購自泉州豐山生態(tài)茶園，其加工工藝與安溪鐵觀音相同。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 主要儀器

所用主要儀器包括TAS-990型火焰原子吸收分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，V-1600可見分光光度計(jì)、UV-3200PCS紫外-可見分光光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司)，KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，循環(huán)水式多用真空泵(上海申光儀器儀表有限公司)，New Human900超純水器(韓國Human公司)，可調(diào)試電熱板(北京科偉永鑫實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備廠)，DK-8D電熱恒溫水槽(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DGG-9070A(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)。Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Ni空心陰極燈。

1.2.2 試劑

硝酸、高氯酸、雙氧水(30%)均為優(yōu)級(jí)純;Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Ni標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度均為 1 000 μg/mL(國家有色金屬及電子材料分析測試中心);其余試劑均為國產(chǎn)分析純，實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

微量元素測定所用玻璃器皿均用20%HNO3浸泡12 h，然后用自來水、蒸餾水、超純水依次沖洗，烘干后防塵儲(chǔ)藏備用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 酸茶常量成分測定

水分的測定采用恒重法，見參考文獻(xiàn)［3］。水浸出物質(zhì)量測定采用重量法，參考文獻(xiàn)［4］。茶多酚的測定采用福林酚比色法，參照文獻(xiàn)［5］。游離氨基酸的測定采用茚三酮比色法，可參照文獻(xiàn)［6］?？扇苄钥偺堑臏y定采用蒽酮硫酸比色法，參照文獻(xiàn)［7］。葉綠素的測定采用Arnon公式，具體參考文獻(xiàn)［8］?？傸S酮的測定采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色法，具體參考方法［9］。

1.3.2 微量元素測定方法

1.3.2.1 樣品處理

將被測樣品置于80℃烘箱中4 h，研磨成細(xì)粉，過80目篩，裝入潔凈容器中備用。準(zhǔn)確稱取樣品1.000 0 g于100 mL錐形瓶中，平行取3份，加入10 mL濃HNO3，蓋上表面皿，靜置12 h后加入10 mL濃HNO3和5 mL HClO4，置電熱板上緩慢加熱消化，待大量冒白煙時(shí)取下，冷卻至室溫，溶液若仍顯黃色時(shí)，加入10 mL H2O2，再加熱消化至溶液呈無色透明，近干為止，取下防冷，用1%HNO3溶液沖洗表面皿及錐形瓶內(nèi)壁，針孔過濾器過濾，用1%HNO3定容至50 mL容量瓶待測。

1.3.2.2 儀器工作條件

Fe、Cu、Zn、Mn、Cr和 Ni的測定采用空氣-乙炔火焰原子吸收光度法，各元素測定條件見表1。Fe、Mn根據(jù)線性范圍稀釋4倍后進(jìn)行測定。

表1 儀器工作條件

1.3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及測定方法

將1 000 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液稀釋至100 μg/mL工作液，配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按1.3.2.2儀器工作條件測定空白、標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和樣品溶液。以吸光度A對(duì)濃度c(μg/mL)作一元線性回歸方程，扣除空白值后，求出試樣中各元素的含量。標(biāo)準(zhǔn)系列如下:Fe:0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μg/mL;Cu:0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 μg/mL;Mn:0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μg/mL;Cr:0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 μg/mL;Ni:0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 μg/mL;Zn:0、0.1、0.2、0.3、0.5、0.7、0.9 μg/mL。

1.3.2.4 精密度及回收率實(shí)驗(yàn)

因尚無酸茶標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)問世，故采用標(biāo)準(zhǔn)加入法來評(píng)價(jià)整套處理測定方法的精密度，具體步驟是，在稱取的樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，參照1.2.2.1平行處理樣品3份，在相同的測定條件下進(jìn)行測量，計(jì)算回收率及同一樣品不同元素5次測定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，加標(biāo)回收率/%=［(加標(biāo)樣品測定值－樣品測定值)÷加標(biāo)量］×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 常量成分分析結(jié)果

酸茶中水分、水浸出物、茶多酚、游離氨基酸、可溶性總糖、葉綠素、總黃酮的測定結(jié)果見表2。

表2 酸茶中常量成分含量

茶葉的含水量影響著內(nèi)部各種生化反應(yīng)的進(jìn)程，尤其對(duì)生茶的陳化過程影響更為明顯，同時(shí)，含水量也是影響茶葉貯運(yùn)的重要因素，含水量過低茶葉易碎，過高又會(huì)霉變。因采用和鐵觀音相同的加工工藝，故以鐵觀音的含水量為參照，而國家標(biāo)準(zhǔn)中要求安溪鐵觀音的水分含量≤7.5%［10］，測定結(jié)果顯示酸茶的水分含量為7.16%，符合國家標(biāo)準(zhǔn)。國家行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求閩烘綠茶的水浸出物含量≥36.0%［11］，酸茶的水浸出物含量是49.13%，符合要求。茶葉中水浸出物是茶湯的主要呈味物質(zhì)，水浸出物含量的高低反映了茶葉中可溶物質(zhì)的多少，標(biāo)志著茶湯的厚薄、滋味的濃強(qiáng)程度。酸茶茶多酚、可溶性總糖含量相對(duì)較多，經(jīng)測定分別為26.29%和19.90%，茶多酚是一種理想的食品天然抗氧化刺，具有抗癌治病、防衰老、防輻射、消除人體自由基等多種生理功效。糖類主要影響的是茶的甜醇味，糖類越多則甜醇味越濃，反之則越淡。酸茶的氨基酸和總黃酮含量較少，分別為0.88%和7.16%。氨基酸在茶葉加工中參與茶葉香氣的形成，對(duì)茶湯的滋味、色澤等有明顯影響，酸茶中葉綠素含量為0.054%，其中Chla含量為0.43 mg/g，Chlb含量為0.11 mg/g。

2.2 微量元素測定結(jié)果

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別對(duì)不同濃度的金屬離子標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液在儀器最佳工作條件下測定吸光度值，以確定標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度范圍。進(jìn)一步試驗(yàn)表明，在選定的濃度范圍內(nèi)，各元素濃度與吸光度均呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表3。

表3 回歸方程及相關(guān)系數(shù)

2.2.2 樣品測定結(jié)果

按照上述實(shí)驗(yàn)方法測定酸茶中微量元素的含量，每個(gè)樣品測3次，取平均值，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(表4)。所有測定結(jié)果均通過試劑空白校正，其中Ni未檢出。

表4 酸茶中微量元素檢測結(jié)果(X±SD，n=6)

2.2.3 精密度、回收率測定結(jié)果

加標(biāo)回收測定結(jié)果表明，F(xiàn)e、Cu、Zn、Mn、Cr和 Ni 6種元素的回收率都在98.70% ～101.82%之間，顯示出火焰原子吸收法對(duì)酸茶中6種元素測定時(shí)的良好穩(wěn)定性。各元素測定精密度在0.04%～2.35%之間，顯示出了火焰原子吸收法對(duì)酸茶6種金屬元素測定時(shí)的良好穩(wěn)定性，具體結(jié)果見表5。

3 討論與結(jié)論

(1)以泉州豐山生態(tài)茶園的楊梅葉蚊母樹茶成品，即酸茶為研究對(duì)象，盡管原植物不屬于山茶科，但閩浙部分地區(qū)按照傳統(tǒng)茶加工工藝，將其制茶市售，而且文獻(xiàn)［12］多有記載其對(duì)治療某些疾病效果顯著。茶的理化成分主要有水分、水浸出物、咖啡堿、氨基酸、茶氨酸、糖類、葉綠素等等，茶的品質(zhì)、滋味是這些理化成分的多寡、組成比例、化學(xué)轉(zhuǎn)化等的綜合反映［13］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酸茶的水分、水浸出物含量均符合產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，總黃酮和氨基酸含量較低，但茶多酚和可溶性總糖含量比較高，茶多酚有良好的抗氧化性能，其抗氧化性比VE的抗氧化效價(jià)高10～20倍［14］，因此，僅從這方面而言，酸茶應(yīng)具有良好的保健性能，而水溶性糖含量越高，茶葉滋味更醇和，酸茶在滋味方面具有獨(dú)特的風(fēng)味。

(2)人體內(nèi)不僅需要像 Na、K、Ca、Mg等一些常量金屬元素，而且還需要一些像Fe、Zn、Mn、Cu等微量元素，微量元素與人體健康關(guān)系極大，人的生長、發(fā)育、生殖和壽命都受其影響。醫(yī)學(xué)研究已發(fā)現(xiàn)，缺少必需微量元素情況下，人體的各種系統(tǒng)就不能正常發(fā)揮作用。值得注意的是這些微量元素通常情況下必須直接或間接由土壤供給，而食物(包括茶等飲品)是間接供給的主要途徑。本試驗(yàn)采用原子吸收分光光度法測定酸茶中 Fe、Cu、Zn、Mn、Cr和 Ni的含量，結(jié)果顯示，酸茶中含有豐富的人體必需的微量元素Fe、Cu、Zn、Mn 和 Cr，尤其 Mn 的含量較高，達(dá)到547.5 μg/g，作為飲品能為人們較好的補(bǔ)充這些人體必需的微量元素提供新的選擇。此外，用火焰原子吸收法測定酸茶中微量元素，具有方法簡便易行、測定速度快，準(zhǔn)確度、精密度高等特點(diǎn)，是研究酸茶微量元素含量的有效方法。

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