余國慶，陳曉明

（溫州醫(yī)學(xué)院 檢驗醫(yī)學(xué)院、生命科學(xué)學(xué)院，浙江 溫州 325035)

多糖（polysaccharides）是自然界中含量最豐富的生物聚合物，廣泛分布于植物、動物和微生物中。研究表明，多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗感染、抗病毒、抗氧化衰老、增強內(nèi)皮細(xì)胞增殖及對細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)修復(fù)、促進(jìn)生長發(fā)育、抗輻射、抗凝血、降血糖、降血脂、護(hù)肝等多種功能。近年來，多糖的免疫調(diào)節(jié)作用成為生物化學(xué)和生命科學(xué)研究的熱點。其免疫調(diào)節(jié)作用首先是通過與細(xì)胞表面的受體相結(jié)合而介導(dǎo)免疫反應(yīng)，目前發(fā)現(xiàn)的受體主要包括Toll樣受體（TLR）、甘露糖受體、Dectin-1、Dectin-2、清道夫受體、補體受體3（CR3）和Lactosylceramide受體 （CDw17）。多糖與這些受體結(jié)合后可以激活細(xì)胞內(nèi)信號通路，進(jìn)而活化免疫細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放?，F(xiàn)對多糖免疫受體研究進(jìn)展作一綜述。

1 TLR

1996年，發(fā)現(xiàn)Toll蛋白作為果蠅抗真菌和細(xì)菌感染的模式識別受體，介導(dǎo)天然免疫，能使果蠅分泌多種抗微生物感染的多肽清除病原微生物[1-2]。隨后Toll蛋白發(fā)現(xiàn)于人的細(xì)胞膜上，其胞外區(qū)與果蠅Toll蛋白同源而得名TLR[3]。TLR廣泛表達(dá)在天然免疫系統(tǒng)中，是一類I型跨膜糖蛋白，由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞質(zhì)區(qū)組成。它們通過識別保守的病原體相關(guān)的分子位點（PAMPs），例如細(xì)菌的脂多糖、脂肽，或者是細(xì)菌和病毒的DNA、RNA等，來識別大量的異己抗原。TLR在固有免疫和引導(dǎo)適應(yīng)性免疫中扮演著重要的角色。至今至少有10種人類Toll的同源物和13種鼠類的TLR相繼被鑒定，對相關(guān)的分子結(jié)構(gòu)及其特異性配體，受體與配體之間的識別，以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路均有了不同程度的了解[4-6]。TLR家族通過胞外區(qū)感應(yīng)組織中的危險信號，經(jīng)相應(yīng)接頭蛋白進(jìn)行信號傳導(dǎo)，激活相關(guān)的核內(nèi)基因，從而誘導(dǎo)感染性炎癥和非感染性炎癥。TLR家族包括細(xì)胞表面的TLR（TLR1、TLR2、TLR4/MD-2、TLR5、TLR6和TLR11等）和細(xì)胞內(nèi)TLR（TLR3、TLR7、TLR8和TLR9等）[7]。根據(jù)接頭蛋白的不同可分為MyD88依賴性和非MyD88依賴性途徑，其中TLR1、TLR2、TLR5、TLR6、TLR7、TLR9和TLR11介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑為MyD88依賴性，MyD88依賴性途徑主要激活促炎癥因子的產(chǎn)生，如TNF-α、1L-1β、IL-6等。TLR3介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)途徑為非MyD88依賴性，TLR4則既可為MyD88依賴性亦可為非MyD88依賴性。非MyD88依賴性途徑也就是TRIF依賴途徑，主要產(chǎn)生IFN-1。

TLR4是第一個在哺乳動物上發(fā)現(xiàn)的TLR，位于染色體9q32-33，編碼839個氨基酸，其中有22個N端的LRRs，分子量為90 kDa，TLR4表達(dá)于許多的免疫和非免疫細(xì)胞，其在細(xì)胞表面與MD-2牢固結(jié)合[8]，活化TLR4將誘導(dǎo)產(chǎn)生一系列的炎癥遞質(zhì)包括細(xì)胞因子、趨化因子等從而產(chǎn)生強有力的炎癥反應(yīng)。多糖可以通過TLR2和TLR4受體介導(dǎo)再與CD14一起將胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)至胞內(nèi)，使NF-κB迅速從胞漿移位到胞核，調(diào)節(jié)相應(yīng)靶基因的表達(dá)，活化轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放，從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[9-12]。Yoon等[13]報道了從桔梗的根中提取的多糖能促進(jìn)RAW264.7細(xì)胞iNOS mRNA的表達(dá)，增加NO的產(chǎn)生；同時能刺激C3H/HeN小鼠腹腔巨噬細(xì)胞分泌NO，但對C3H/HeJ小鼠腹腔巨噬細(xì)胞無明顯作用；用TLR4抗體預(yù)先與巨噬細(xì)胞作用，能抑制桔梗根多糖刺激細(xì)胞產(chǎn)生NO；桔梗根多糖能引起IκB降解，使NF-κB迅速從胞漿移位到胞核，促進(jìn)DNA與NF-κB結(jié)合。這些結(jié)果表明桔梗根多糖通過TLR4/NF-κB通路途徑引起巨噬細(xì)胞iNOS mRNA的表達(dá)量增加和產(chǎn)生NO。紫云英根多糖能與正常小鼠B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面結(jié)合并將其激活，且不能被兔抗鼠免疫球蛋白抑制，紫云英根多糖不能誘導(dǎo)C3H/HeJ小鼠的脾B細(xì)胞增殖，這些結(jié)果顯示紫云英根多糖通過膜免疫球蛋白TLR4受體激活B細(xì)胞。同時，紫云英根多糖也不能激活C3H/HeJ小鼠巨噬細(xì)胞產(chǎn)生免疫活性，且用TLR4單克隆抗體能部分抑制紫云英根多糖與巨噬細(xì)胞的結(jié)合[14]。TLR功能性表達(dá)于懷孕早期蛻膜，配體刺激后，TLR4、TLR9介導(dǎo)蛻膜分泌TNF-α、IL-6增強，提示TLR參與母胎界面免疫微環(huán)境的調(diào)節(jié)。而黃芪多糖可以通過改變蛻膜TLR介導(dǎo)的免疫功能影響免疫微環(huán)境[15]。靈芝多糖中分離的組分Reishi-F3可以通過TLR2/TLR4 受體活化小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞，上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子Blimp-1表達(dá)量，而增加IgM的表達(dá)，且與絲裂原激活的蛋白激酶（MAPK）、JNK以及NF-κB的活化有關(guān)[16]。許文等[17]研究發(fā)現(xiàn)豬苓多糖（polyporus polysaccharide，PPS）能促進(jìn)樹突狀細(xì)胞的成熟，增強樹突狀細(xì)胞活化T淋巴細(xì)胞的能力，并通過TLR4促進(jìn)體外培養(yǎng)的小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞表型與功能成熟。同時他們報道PPS對C3H/HeN小鼠的脾細(xì)胞增殖、腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-1β和TNF-α的作用明顯強于C3H/HeJ小鼠，流式細(xì)胞儀及激光共聚焦顯微鏡分析結(jié)果表明，F(xiàn)lu-PPS與小鼠腹腔巨噬細(xì)胞結(jié)合的熒光強度顯著高于Flu-葡聚糖，200 mg/L抗TLR4單抗可明顯阻斷Flu-PPS與巨噬細(xì)胞的結(jié)合，PPS可能通過TLR4活化小鼠腹腔巨噬細(xì)胞[18]。

TLR2位于染色體4p31-32，其序列編碼784個氨基酸，其中有19個N端LLRs，分子量為84 kDa。TLR2能介導(dǎo)細(xì)菌多糖及植物多糖發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，如Graveline等[19]報道了豬鏈球菌的莢膜多糖經(jīng)過TLR2介導(dǎo)激活巨噬細(xì)胞發(fā)生免疫作用。Lee等[20]報道創(chuàng)傷弧菌表面莢膜多糖作用于人腸上皮細(xì)胞（INT-407）細(xì)胞通過TLR2/NF-κB途徑產(chǎn)生IL-8，wbpP基因突變的創(chuàng)傷弧菌表面莢膜多糖表達(dá)下降，此突變細(xì)菌作用于INT-407細(xì)胞導(dǎo)致IL-8、TLR2 mRNA表達(dá)量及NF-κB活性較正常菌下降，同時用TLR2抗體能明顯減少創(chuàng)傷弧菌莢膜多糖作用于INT-407產(chǎn)生IL-8及抑制NF-κB的激活。Lu等[21]發(fā)現(xiàn)云芝多糖通過TLR2激活CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞而發(fā)揮抑制腫瘤生長的作用。

2 Lactosylceramide受體

CDw17是中性粒細(xì)胞上一個主要的神經(jīng)鞘糖脂膜成分，已被確定為β-葡聚糖的受體，但其介導(dǎo)β-葡聚糖的反應(yīng)機制不是很明確[22]。Wakshull等[23]報道CDw17的特異性單克隆抗體，能夠抑制PGG-葡聚糖激活NF-κB-like因子而進(jìn)行核轉(zhuǎn)移，表明CDw17是PGG-葡聚糖的受體。β-葡聚糖通過細(xì)胞表面的神經(jīng)鞘糖脂CDw17介導(dǎo)人嗜中性粒細(xì)胞活化而增強中性粒細(xì)胞的抗菌功能。Sato等[24]報道了含有中性鞘糖脂Lactosylceramide的脂質(zhì)體能完全抑制可溶性念珠菌β-D-葡聚糖（CSBG）引起的中性粒細(xì)胞趨化遷移。此外，結(jié)合實驗顯示CSBG能結(jié)合末端帶有半乳糖殘基的鞘糖脂類（如Lactosylceramide）。而且Scr激酶抑制劑蛋白磷酸酶1，磷脂酰肌醇（PI-3K）抑制劑渥曼青霉素和Gαi/o百日咳毒素均能抑制CSBG引起的中性粒細(xì)胞趨化遷移。這些結(jié)果表明CSBG結(jié)合CDw17誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞遷移是通過Src家族激酶/PI-3K/異源三聚體G-蛋白信號傳導(dǎo)路徑。Li等[25]報道了光滑假絲酵母能誘導(dǎo)上皮細(xì)胞表達(dá)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）。TLR4抗體阻斷TLR4不影響GM-CSF的產(chǎn)生，但CDw17抗體阻斷CDw17能顯著抑制NF-κB的激活和GM-CSF的合成。

3 CR3

CR3（又稱Mac-1、αMβ2整合蛋白、CD11b/CD18）是白細(xì)胞黏附受體組的重要成員，存在于巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞和中性粒細(xì)胞表面，它通過促使效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞之間的接觸增強吞噬作用，因而在免疫調(diào)節(jié)中具有重要作用。CR3是由兩條肽鏈所構(gòu)成的膜糖蛋白，它的配體為iC3b。CR3最早在白細(xì)胞膜上被發(fā)現(xiàn)，所以又稱之為白細(xì)胞整合素。CR3是中性粒細(xì)胞、單核/吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞激活的標(biāo)記，同時在激活的CD8+T細(xì)胞亞群及樹突狀細(xì)胞膜上也有表達(dá)。Yan等[26]報道小鼠巨噬細(xì)胞的CR3受體有兩個特異結(jié)合區(qū)域：一個可以與葡聚糖結(jié)合，一個可以與iC3b 結(jié)合，CR3受體與葡聚糖結(jié)合后可促進(jìn)巨噬細(xì)胞對iC3b調(diào)理的靶細(xì)胞吞噬作用。Vetvicka等[27]報道可溶性β-葡聚糖多糖綁定到吞噬細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞CR3，不斷引發(fā)受體針對iC3b的腫瘤組織的細(xì)胞毒性作用并使正常組織缺乏iC3b。Baranyay[28]發(fā)現(xiàn)補體受體參與碳水化合物的C3受體配體綁定，多糖與其受體的結(jié)合具有特異性。Cywes等[29]研究發(fā)現(xiàn)非調(diào)理素是依賴C3受體與莢膜多糖結(jié)合從而識別并結(jié)合結(jié)核分支桿菌。Muller等[30]發(fā)現(xiàn)裂褶菌多糖可以與巨噬細(xì)胞系U937表面受體結(jié)合，而甘露聚糖、右旋糖酐和大麥葡聚糖不能與之結(jié)合，并且裂褶菌多糖的三螺旋結(jié)構(gòu)對這種結(jié)合是必須的。

4 C型凝集素受體

C型凝集素受體是模式識別受體中一類重要的家族，具有一個或多個C型凝集素樣結(jié)構(gòu)域（C-type lectinlike domains，CTLDs），也即位于C型凝集素受體上，含有序列同源的碳水化合物識別域（carbohydrate recognition domain， CRD）[31]。根據(jù)該識別域是否依賴Ca2+可將其分為經(jīng)典和非經(jīng)典兩大類。而按其受體的結(jié)構(gòu)可分為I型和II型，I型受體含有多個CRDs的跨膜多肽，包括甘露糖受體（MR， CD206）、磷脂酶A2受體、DEC-205（CD205）和Endo180（CD280）等。相比之下II型受體是由單一CRD的跨膜多肽組成，這組受體包括樹突細(xì)胞表面的特異性細(xì)胞間黏附因子3結(jié)合非整合素分子（dendriticcell-specific ICAM-3-grabbing nonintegrin、DC-SIGN、CD209）、胰島蛋白（CD207）、巨噬細(xì)胞半乳糖型凝集素（MGL、CD301）、膠原凝集素、樹突細(xì)胞相關(guān)凝集素1和2（dectin-1和dectin-2）等[32]。目前研究與多糖相互作用的C型凝集素受體主要是甘露糖受體以及dectin-1和dectin-2。

4.1 甘露糖受體 甘露糖受體屬于多凝集素受體，是一種相對分子質(zhì)量為180 000的Ι型跨膜糖蛋白，表達(dá)于大部分組織巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞，可識別存在于細(xì)胞表面或病原體細(xì)胞壁上的多種糖分子，主要通過參與受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用和吞噬作用，維護(hù)機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，并將非特異性免疫與特異性免疫聯(lián)系起來，組成機體的一種免疫防御系統(tǒng)。甘露糖受體屬于Ca2+依賴凝集素家族，通過CRDs與糖結(jié)合[33]。甘露糖受體自身有八個CRDs位于一條多肽鏈上，其中CRD4和5對糖的結(jié)合極為重要，并且結(jié)合和攝取多價的配體至少需要一個臨近膜的CRD。

Zamze等[34]研究了離體巨噬細(xì)胞的甘露糖受體與不同細(xì)菌多糖的結(jié)合，表明該受體能與肺炎鏈球菌的莢膜多糖和脂多糖結(jié)合而不能和肺炎克雷伯桿菌的莢膜多糖結(jié)合。這種結(jié)合需要Ca2+的參與，并能被D-甘露糖抑制。甘露糖受體的融合蛋白含有4-7CRD，整個可溶性甘露糖受體表面所有跨膜區(qū)都特異性地和細(xì)菌多糖結(jié)合，表明這4-7個結(jié)構(gòu)域足夠識別這些多糖結(jié)構(gòu)。奇怪的是多糖結(jié)構(gòu)域和甘露糖受體結(jié)合沒有直接的相關(guān)性，表明多糖的結(jié)構(gòu)在受體的識別中起到很大作用。Liu等[35]報道，大黃多糖口服或腹腔注射均能具有明顯治療結(jié)腸炎作用。大黃多糖可明顯地升高結(jié)腸炎大鼠腹腔巨噬細(xì)胞甘露糖受體的活性和吞噬能力，能顯著抑制甘露糖受體與甘露糖的結(jié)合及巨噬細(xì)胞吞噬甘露糖的能力。大黃多糖能顯著升高健康大鼠巨噬細(xì)胞IFN-γ的分泌，甘露糖不影響細(xì)胞因子的分泌，但可以顯著抑制大黃多糖引起的IFN-γ分泌水平，表明大黃多糖治療結(jié)腸炎的免疫調(diào)節(jié)可能由甘露糖受體介導(dǎo)。郭振軍等[36]的進(jìn)一步研究表明大黃多糖引起巨噬細(xì)胞分泌TNF-α作用是通過甘露糖受體介導(dǎo)，而當(dāng)歸多糖的作用也與甘露糖受體有關(guān)。許多中藥多糖富含甘露糖或葡萄糖組分，且以反復(fù)串聯(lián)的結(jié)構(gòu)存在，與甘露糖受體具有比抗體更高的結(jié)合特性[37]，如殼寡糖可通過與巨噬細(xì)胞表面的甘露糖受體結(jié)合，產(chǎn)生白介素 -1β和 TNF-α[38]。

4.2 Dectin-1 2001年Gordon等[39]使用富含β-葡聚糖的酵母聚糖篩選巨噬細(xì)胞系的cDNA文庫后得到一種新的葡聚糖受體即Dectin-1。Dectin-1是一種模式識別受體，在抗真菌天然免疫中發(fā)揮著重要作用。 Dectin-1是吞噬細(xì)胞表面對β-葡聚糖特異性的受體，樹突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞（如肺泡巨噬細(xì)胞和炎性巨噬細(xì)胞）、中性粒細(xì)胞均能廣泛表達(dá)β-葡聚糖受體[40]。β-葡聚糖是由β-（1，3）、β-（1，4）和/或β-（1，6）糖苷鍵連接的葡萄糖多聚體，廣泛存在于燕麥、大麥、海藻、毛霉菌、孢子絲菌、釀酒酵母真菌等。其在真菌中是真菌細(xì)胞壁產(chǎn)生的葡萄糖聚合物，如釀酒酵母和白色念珠菌的細(xì)胞壁產(chǎn)生的酵母多糖， Dectin-1先結(jié)合在針對β-葡聚糖介導(dǎo)的活性氧，激活NF-κB后產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子。 酵母聚糖主要由β-葡聚糖、甘露聚糖、甘露糖蛋白和甲殼素組成，通過Dectin-1與TLR2協(xié)同介導(dǎo)發(fā)生免疫反應(yīng)[41]。

Dectin-1是二型跨膜蛋白，分子量大約28000 Da，特征與其他免疫受體一致，可轉(zhuǎn)導(dǎo)感染與C型凝集素樣CRD處由秸稈連接的跨膜區(qū)域，然后細(xì)胞漿里包含一個基于酪氨酸酶激活基序的免疫受體（ITAM）。Dectin-1可以識別含有β-（1，3）和β-（1，6）糖苷鍵的葡聚糖，并誘使其自身信號通路[40-41]，在與配體結(jié)合后，Dectin-1是由非受體酪氨酸激酶Src磷酸化，Syk被激活并誘導(dǎo)CARD9-Bcl10-Malt1復(fù)合體活化，該復(fù)合體介導(dǎo)NF-κB激活和炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生，形成介導(dǎo)吞噬作用和介導(dǎo)NADPH氧化酶產(chǎn)生活性氧類的胞內(nèi)信號，產(chǎn)生殺菌作用。最新數(shù)據(jù)表明，TLR介導(dǎo)NF-κB的信號，轉(zhuǎn)導(dǎo)并產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子，這些反應(yīng)可被Dectin-1增強。同樣，TLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)還可以增強Dectin-1激發(fā)的活性氧類產(chǎn)生。Dectin-1和TLR2/TLR6 通路相結(jié)合并加強每個受體引起的反應(yīng)[41-44]。

Masuda等[45]從舞耳當(dāng)中提取的多糖MZ-Fraction（klasma-MZ）是一種β-葡聚糖，分子量很小，大約在20000，由β-（1，3）和β-（1，6）糖苷鍵結(jié)合而成。能在體外誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞J774A1的抗原遞呈和產(chǎn)生TNF-α和IL-12，并在體內(nèi)表現(xiàn)出抗腫瘤活性。酵母多糖可以和Dectin-1結(jié)合，可以被真菌、植物、細(xì)菌來源的β-葡聚糖抑制，而其他聚合物如纖維素和甘露聚糖沒有抑制效果[46]，同時研究發(fā)現(xiàn)β-葡聚糖抗腫瘤、抗感染活性還依賴于多糖自身的理化性能。人們還需要進(jìn)一步的研究，以明晰Dectin-1和β-葡聚糖的特異性，從而闡明β-葡聚糖免疫調(diào)節(jié)機制。

4.3 Dectin-2 Dectin-2最初是從小鼠朗格漢斯細(xì)胞樣細(xì)胞系XS52中發(fā)現(xiàn)，被認(rèn)為為朗格漢斯細(xì)胞特有的C型凝集素，隨后從樹突狀細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞中檢測到有表達(dá)[47-48]。Dectin-2分子含有一個EPN序列（Glu-Pro-Asn）和一個鈣離子依賴性CRD，能夠識別甘露糖結(jié)構(gòu)的碳水化合物，其特異性配體是高甘露糖結(jié)構(gòu)[49]。Dectin-2在細(xì)胞漿缺乏一個已知信號區(qū)域，因為Dectin-2在它的跨膜區(qū)缺乏精氨酸，而精氨酸對于含有免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）信號分子如Fc受體c（FcRc）鏈或者是DNAX激活蛋白12（DAP12）的膜組織十分重要，目前該信號傳導(dǎo)機制尚不清。研究表明Dectin-2與FcRc鏈的結(jié)合是通過Dectin-2胞漿區(qū)域的精氨酸殘基[49]。當(dāng)甘露糖刺激FcRc鏈基因缺陷小鼠時，不能產(chǎn)生細(xì)胞因子，表明Dectin-2的生物學(xué)功能需要FcRc鏈的存在[50]。

Dectin-2能夠識別α-甘露聚糖，并通過與免疫受體酪氨酸抑制基序包含的FC受體γ鏈結(jié)合完成細(xì)胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)。結(jié)合以后免疫受體酪氨酸活化基序（ITAM）結(jié)合脾激酶酪氨酸激酶激活胱天蛋白酶募集域蛋白9（CARD9），使NF-κB轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核當(dāng)中，最終激活TNF-α和白介素-1在內(nèi)的多種細(xì)胞因子的表達(dá)，介導(dǎo)機體的免疫應(yīng)答[51]。使用多糖點陣檢測發(fā)現(xiàn)，Dectin-2能和許多種物種包括真菌當(dāng)中含有高甘露糖的結(jié)構(gòu)結(jié)合[49，52]。最近有研究用白色念珠菌細(xì)胞壁甘露聚糖刺激Dectin-2基因缺陷小鼠的骨髓來源細(xì)胞完全不能產(chǎn)生細(xì)胞因子表明Dectin-2是甘露聚糖的功能性受體[50]。從A型白色念珠菌中提取甘露聚糖由α-1，6-鏈多聚甘露糖連接到精氨酸殘基與α-1，2-鏈寡甘露糖基側(cè)鏈[51，53]。然而，缺乏β-甘露聚糖的細(xì)胞壁甘露聚糖與自然的假絲酵母甘露糖刺激小鼠骨髓來源細(xì)胞釋放細(xì)胞因子效果相同，但不能引起Dectin-2缺乏的樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，這些表明β-甘露聚糖不參與Dectin-2與假絲酵母菌甘露聚糖的識別[50]。Dectin-1和Dectin-2對真菌感染的免疫調(diào)節(jié)途徑見圖1。

圖1 Dectin-1和Dectin-2對真菌感染的免疫調(diào)節(jié)[51]

5 清道夫受體

清道夫受體是表達(dá)于巨噬細(xì)胞表面的一類模式識別受體，能識別細(xì)菌和真菌細(xì)胞壁多糖和脂質(zhì)，介導(dǎo)吞噬作用。分為多種類型，主要為SRA和SRB，還包括SRC等。SRA為三聚體纏繞的糖蛋白跨膜分子，各帶有5個不同的結(jié)構(gòu)域。其中膠原樣結(jié)構(gòu)域可結(jié)合修飾過的脂蛋白，并由富含賴氨酸的分子束組成攜帶正電荷的結(jié)合槽，接納帶負(fù)電荷的配體，包括多聚核糖核苷酸（如PolyG和poly1）、多糖（如LPS和脂磷壁酸）和陰離子磷脂（如縮醛磷脂酰絲氨酸），以及氧化型和乙?；牡兔芏戎鞍祝╫xLDI、acLDL）等。SRB中的一個主要成員為CD36，分子質(zhì)量為88 kDa，表達(dá)于血小板、單核/巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞。其配體為血小板反應(yīng)蛋白、膠原蛋白、磷脂及氧化型低密度脂蛋白。

Shnyra等[54]報道脂多糖在體外結(jié)合肝枯否細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞是通過清道夫受體途徑。清道夫受體可結(jié)合多種配體，在巨噬細(xì)胞清除病原體、宿主防御以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中發(fā)揮重要作用[55]。Nakamura等[56]研究發(fā)現(xiàn)，褐藻聚糖能通過清道夫受體使野生型小鼠腹腔巨噬細(xì)胞激活并釋放NO，且NO的釋放量與褐藻聚糖呈劑量依賴關(guān)系。褐藻聚糖作用于清道夫受體基因敲除（SR-/-）的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞時并不能誘導(dǎo)細(xì)胞分泌NO，表明褐藻聚糖通過清道夫受體途徑激活巨噬細(xì)胞。p38 MAPK和NF-κB抑制劑能夠抑制褐藻聚糖刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生iNOS，從而減少細(xì)胞上清中NO的量。實驗結(jié)果表明褐藻聚糖能夠通過與清道夫受體相結(jié)合而進(jìn)一步激活細(xì)胞內(nèi)p38 MAPK和NF-κB兩條信號通路，促進(jìn)巨噬細(xì)胞釋放NO。

6 結(jié)語

多糖的免疫作用機制的調(diào)節(jié)受體已發(fā)現(xiàn)以上幾種，但是目前仍然停留在表面階段，有待于進(jìn)一步深入研究。由于多糖結(jié)構(gòu)的多樣性和復(fù)雜性，可以想象，多糖受體也是多樣的，今后還將會有更多的多糖受體被揭示。多糖的作用機制將會更加明了，為開發(fā)多糖藥物以及多糖藥物應(yīng)用于臨床治療提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。

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