李曉鸞 孟文霞 張小平 王燕 劉艷梅 孫長春

結(jié)膜激發(fā)試驗(CPT)是一種在人為嚴(yán)格控制下用少量可疑致敏物激發(fā)臨床癥狀，以觀察試驗物與變應(yīng)病相關(guān)性的方法，易于操作及觀察。變態(tài)反應(yīng)科近年來開展了大樣本屋塵螨變應(yīng)原結(jié)膜激發(fā)試驗，進(jìn)行了詳細(xì)的觀察，分析屋塵螨變應(yīng)原結(jié)膜激發(fā)試驗(CPT)的主要影響因素，為臨床工作中客觀評估屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果提供依據(jù)。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇2008年1月至2009年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院變態(tài)反應(yīng)科就診的符合變應(yīng)性鼻炎、結(jié)膜炎和(或)支氣管哮喘診斷的患者357例，其中男174例，女183例;年齡4～72歲，平均年齡(38±16)歲;所有患者均有病史以及皮膚點刺試驗提示可疑對屋塵螨過敏。

1．2 方法

1．2．1 試驗前期準(zhǔn)備:試驗避開患者急性發(fā)作期及飲酒后;試驗前未進(jìn)行免疫治療;試驗前2周未做過結(jié)膜激發(fā)試驗;試驗前停用眼部局部用藥2周以上，停用全身用抗組胺藥物1周及糖皮質(zhì)激素類藥物2周以上;遇有急性上呼吸道感染、變應(yīng)性結(jié)膜炎以外的眼部疾患、佩戴角膜接觸鏡者待愈后2周進(jìn)行結(jié)膜激發(fā)試驗。

1．2．2 屋塵螨變應(yīng)原 CPT:專業(yè)檢查室，室溫約20℃，患者進(jìn)入室內(nèi)休息10 min，取端坐位，檢查并記錄雙眼基礎(chǔ)情況，確定無急性結(jié)膜疾病，雙眼結(jié)膜狀況無明顯差異后進(jìn)行激發(fā)試驗。以微量移液管取10 μl陰性對照液(由ALK公司提供除無屋塵螨變應(yīng)原蛋白外所含成分與變應(yīng)原試劑相同)于患者一眼中，隨即另以微量移液管取10 μl變應(yīng)原試劑(為ALK公司提供屋塵螨變應(yīng)原試劑30 HEP/2 ml)于另一眼下結(jié)膜囊中?；颊唛]目頭后仰30 s，于激發(fā)后5、10、15 min參照北京協(xié)和醫(yī)院評估標(biāo)準(zhǔn)觀察并記錄。對照側(cè)出現(xiàn)明顯速發(fā)相反應(yīng)或有遲發(fā)相反應(yīng)者另作記錄，不列入統(tǒng)計范圍。

1．2．3 屋塵螨變應(yīng)原特異性免疫球蛋白E(d1-sIgE)檢測:采用Pharmacia公司Uni CAP系統(tǒng)-100型進(jìn)行熒光酶聯(lián)免疫法測定(所有試劑均為南京美瑞公司提供)，在Uni CAP系統(tǒng)-100型中自動完成。

1．3 觀察及評價項目 所有入選者均進(jìn)行屋塵螨變應(yīng)原CPT，采用北京協(xié)和醫(yī)院眼結(jié)膜激發(fā)試驗評估標(biāo)準(zhǔn)分別記錄為－、+、++、+++、++++，以++及以上為陽性。結(jié)膜激發(fā)試驗操作由我科醫(yī)師專人進(jìn)行，結(jié)果觀察記錄由我科另一醫(yī)師(第3方)進(jìn)行雙盲評判。

1．4 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 13．0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，相關(guān)性采用pearson相關(guān)分析，P ＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

357例患者，均有可疑屋塵螨過敏病史。屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果陽性率為20．7%(74/357)，結(jié)合專業(yè)知識選擇性別、年齡、累及器官、病程、受試季節(jié)等可能影響屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果的因素，賦值采用pearson相關(guān)分析法進(jìn)行分析，見表1、2。

表1 屋塵螨變應(yīng)原結(jié)膜激發(fā)試驗可疑影響因素的定義及賦值

3 討論

變態(tài)反應(yīng)性疾病已成為新世紀(jì)的流行病，發(fā)病率超過20%，且發(fā)病率呈逐年增高趨勢，變態(tài)反應(yīng)科學(xué)越來越受到重視。變態(tài)反應(yīng)性疾病雖可以表現(xiàn)在不同器官發(fā)病，究其病因就是變態(tài)反應(yīng)在局部的表現(xiàn)，正確的病因診斷是有效治療的前提。激發(fā)試驗是一種在人為嚴(yán)格控制下用少量可疑致敏物激發(fā)臨床癥狀，以觀察試驗物與變應(yīng)病相關(guān)性的方法。結(jié)膜激發(fā)試驗?zāi)苣M自然發(fā)病狀態(tài)，為診斷相關(guān)疾病提供了多時相、多角度觀察機(jī)會，其敏感性、特異性及有效性已得到許多學(xué)者的共識［1－5］，但是目前國內(nèi)缺乏規(guī)范化、客觀化的操作以及評估的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。

表2 各可疑影響因素與屋塵螨變應(yīng)原CPT的pearson相關(guān)分析

CPT的本質(zhì)就是模擬結(jié)膜接觸變應(yīng)原的自然狀態(tài)，人為制造出由一定量變應(yīng)原引起的變應(yīng)性結(jié)膜炎的急性發(fā)作，是IgE介導(dǎo)的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)。IgE主要由呼吸道、消化道和扁桃體部位的黏膜下漿細(xì)胞產(chǎn)生。IgE最明顯的特性是親細(xì)胞性，能牢固而持久地吸附在細(xì)胞表面，局部的肥大細(xì)胞和血液中的嗜堿細(xì)胞是IgE的靶細(xì)胞。人結(jié)膜上皮含有豐富的血管和許多特殊的炎癥和免疫細(xì)胞，正常情況下結(jié)膜固有層每平方毫米含5 000～20 000個肥大細(xì)胞［5］，其中瞼結(jié)膜高于球結(jié)膜。從本研究結(jié)果推斷，由于IgE具有親細(xì)胞性，結(jié)膜局部肥大細(xì)胞結(jié)合的特異性IgE與血清中游離特異性IgE存在相對平衡，就是說結(jié)膜局部肥大細(xì)胞結(jié)合的特異性IgE密度取決于血清特異性IgE水平，患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節(jié)的差異在影響血清中游離特異性IgE水平的同時也影響結(jié)膜局部肥大細(xì)胞結(jié)合的特異性IgE密度。以此解釋屋塵螨變應(yīng)原CPT的結(jié)果與血清特異性IgE水平明顯相關(guān)(P＜0．05)，以及本研究統(tǒng)計結(jié)果顯示患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節(jié)均與屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果無相關(guān)(P＞0．05)，其中受累器官一項與我們先前資料的結(jié)果相符［6］，由此推斷，結(jié)膜上皮肥大細(xì)胞上結(jié)合特異性IgE的情況只受血清特異性IgE水平的影響，不受性別、年齡、受累器官、病程、受試季節(jié)的差異的影響，判定屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果時不需考慮這些因素的存在。

綜上所述，我們認(rèn)為屋塵螨變應(yīng)原CPT不受患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節(jié)的影響，判定屋塵螨變應(yīng)原CPT結(jié)果時不需考慮這些因素的存在。

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