錢(qián)金栿，左紹遠(yuǎn)，張學(xué)清，楊云川

（大理學(xué)院，云南大理 671003）

糖脂康中試產(chǎn)品中藻藍(lán)素、葉綠素、類(lèi)胡蘿卜素含量測(cè)定

錢(qián)金栿，左紹遠(yuǎn)，張學(xué)清，楊云川

（大理學(xué)院，云南大理 671003）

目的：為建立企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)糖脂康中試產(chǎn)品中藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素含量分別進(jìn)行檢測(cè)分析。方法：按DB53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)中附錄B、附錄C、附錄D規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：糖脂康中試產(chǎn)品中藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素含量分別為2 865.34mg/100 g、443.75mg/100 g、184.06mg/100 g。結(jié)論：藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素含量是糖脂康產(chǎn)品的質(zhì)量控制指標(biāo)之一，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可為制定該產(chǎn)品的企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

糖脂康中試產(chǎn)品；藻藍(lán)素；葉綠素；總類(lèi)胡蘿卜素；含量測(cè)定

糖脂康產(chǎn)品是我院研究開(kāi)發(fā)的新型純天然功能性保健食品，已獲國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利〔1〕。按照國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局與國(guó)家食品藥品監(jiān)督局的相關(guān)規(guī)定，藻藍(lán)素（藻藍(lán)蛋白）、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素的含量是該類(lèi)產(chǎn)品的質(zhì)量控制指標(biāo)之一。為此，本實(shí)驗(yàn)按云南省技術(shù)監(jiān)督局DB 53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法〔2〕，對(duì)糖脂康中試產(chǎn)品中藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素含量進(jìn)行測(cè)定，以便為制訂該產(chǎn)品的企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 主要試劑 pH=6.0磷酸鹽緩沖液（0.01mol/L KH2PO487.7 mL與0.01 mol/L K2HPO412.3 mL混合）。丙酮-水溶液（85∶15，V/V），40%KOH甲醇溶液（20 g KOH溶于少量水中，用甲醇定容于50mL）。混合試劑：正己烷、丙酮、乙醇、甲苯體積比為10∶7∶6∶7。所用試劑均為AR。

1.2 主要儀器 722E分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限責(zé)任公司），TDL-4A離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠），恒溫水浴箱等。

1.3 測(cè)試樣品 糖脂康中試產(chǎn)品。規(guī)格：0.3 g×50片。由大理學(xué)院力諾科技服務(wù)股份有限公司提供。批號(hào)：20081206。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 藻藍(lán)素含量測(cè)定 按DB 53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)中附錄B規(guī)定的方法〔2〕進(jìn)行。取糖脂康中試產(chǎn)品50片，用研缽研細(xì)后，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2 g（精確至0.000 1 g）置50mL容量瓶中，用pH=6.0磷酸鹽緩沖液定容，充分振蕩5 min，于35℃恒溫浸泡16 h后，取上清液測(cè)定，共做平行樣3份。以緩沖液作空白，用1 cm玻璃比色皿在560、620、650 nm等處分別測(cè)定吸光度。按參考文獻(xiàn)〔2〕公式計(jì)算藻藍(lán)素含量，取3次平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為樣品藻藍(lán)素含量，標(biāo)示量為mg/100 g。

2.2 葉綠素含量測(cè)定 按DB53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)中附錄C規(guī)定的方法〔2〕進(jìn)行。取糖脂康中試產(chǎn)品50片，用研缽研細(xì)后，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.03 g（精確至0.000 1 g）樣品于50 mL比色管中，加50 mL丙酮-水溶液（85∶15，V/V），用超聲波超聲5 min，于36℃恒溫浸泡16 h后，傾出提取液于250mL分液漏斗中，用25mL乙醚加入比色管中輕輕搖蕩后，傾入同一分液漏斗中，并加入50mL乙醚萃取，在萃取液中加入100mL水，輕輕搖蕩、靜置，棄去下層溶液，重復(fù)洗滌兩次，萃取溶液經(jīng)過(guò)10 g無(wú)水硫酸鈉萃取，并收集于100 mL容量瓶中，用乙醚定容。以乙醚作空白，用具塞的1 cm玻璃比色皿在666.0、642.5 nm處分別測(cè)定吸光度。按參考文獻(xiàn)〔2〕公式計(jì)算葉綠素含量，取3次平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值，標(biāo)示量為mg/100 g。

校正系數(shù)：X1=9.93，A1－0.78A2；式中：x1—葉綠素含量/（mg/L）；m—樣品的質(zhì)量/g；A1—666.0nm處的吸光度；A2—642.5nm處的吸光度。

2.3 總類(lèi)胡蘿卜素測(cè)定 按DB 53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)中附錄C規(guī)定的方法〔2〕進(jìn)行。取糖脂康中試產(chǎn)品50片，用研缽研細(xì)后，稱(chēng)取0.15~0.2 g（精確至0.000 1 g）于50 m L的比色管中，加35mL混合溶劑和1mL 40%KOH溶液，35℃恒溫浸泡過(guò)夜后，將浸泡提取液倒入250mL的分液漏斗中；在浸泡過(guò)的樣品中加入25mL蒸餾水，輕輕搖蕩、靜置，合并以上提取液，加入乙醚50 mL萃取，并于萃取液中加入100 mL蒸餾水，輕輕搖蕩、靜置，棄去下層溶液，充分洗滌至少2次，萃取液經(jīng)過(guò)10 g的無(wú)水硫酸鈉，收集于100 mL容量瓶中，用乙醚定容至刻度線。以乙醚作空白，用具塞的1 cm玻璃比色皿在458 nm處測(cè)定吸光度。按參考文獻(xiàn)〔2〕公式計(jì)算總類(lèi)胡蘿卜素含量，取3次平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值，標(biāo)示量為mg/100 g。

式中：A—453nm處的吸光度；V—定容萃取液的體積（100mL）；m—樣品質(zhì)量/g；E—類(lèi)胡蘿卜素的吸光系數(shù)（2500）。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，按云南省技術(shù)監(jiān)督局DB 53/186-2007標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行檢測(cè)，糖脂康中試產(chǎn)品中藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素含量分別為2865.34 mg/100 g、443.75 mg/100 g、184.06 mg/100 g。

表1 糖脂康中藻藍(lán)素、葉綠素、總類(lèi)胡蘿卜素測(cè)定結(jié)果/（mg/100 g）

4 討論

糖脂康為新型功能性保健產(chǎn)品，按照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化法規(guī)定，企業(yè)產(chǎn)品無(wú)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，必須制定企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)〔3-4〕。因此，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可為政府質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督部門(mén)及產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)制訂該產(chǎn)品的生產(chǎn)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

保健食品的安全性及其功效與產(chǎn)品的企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)密切相關(guān)。在制定企業(yè)生產(chǎn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能與功效特點(diǎn)，盡可能選擇相對(duì)較多的穩(wěn)定成分作為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)所用檢測(cè)方法應(yīng)按照國(guó)家或地方質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督部門(mén)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)化方法，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可重復(fù)性與實(shí)用性。目前，在功能性食品行業(yè)，由于新產(chǎn)品研究開(kāi)發(fā)進(jìn)展較快，而國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的頒布和修改受各種因素的限制，使其常常滯后于行業(yè)的發(fā)展速度，而具有針對(duì)性的企業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)因其有與產(chǎn)品同時(shí)誕生的快速反應(yīng)特性，作為國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充，發(fā)揮著不可缺少的積極作用。

〔1〕錢(qián)金栿，左紹遠(yuǎn).螺旋藻營(yíng)養(yǎng)片劑〔P〕.中國(guó)專(zhuān)利：ZL96107910·X，2000，9（2）.

〔2〕DB 53/186-2007，云南省地方標(biāo)準(zhǔn)〔S〕.

〔3〕國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法〔M〕.北京：中國(guó)法制出版社，1989：1-4.

〔4〕GB/T 1.1—2000，標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則〔S〕.

（責(zé)任編輯 蔣 康）

Content Determ ination of Phycocyanin，Chlorophyll and Carotenoidt in Tang Zhikang Pilot Test Product

QIAN Jinfu,ZUO Shaoyuan,ZHANG Xueqing,YANG Yunchuan
（DaliUniversity,Dali,Yunnan 671003,China)

Objective:In order to establish the enterprise standard of product.The content of phycocyanin,chlorophyll and carotenoid in Tang Zhikang tabletswere determined.Methods:Following the Appendix B,C and D of the Standard DB 53/186-2007 to test.ResultsThe contents of phycocyanin，chlorophyll and carotenoid in Tang Zhikang tabletswere 2 865.34 mg/100g,443.75mg/100g and 184.06 mg/100g respectively.Conclusion:The content of phycocyanin，chlorophyll and carotenoid in spirulina compound tablets is one of the indexes of the product.Therefore,this experimentwill be applied inmaking the standard of quality control for the product.

Tang Zhikang pilot test product；phycocyanin;chlorophyll;carotenoid；content determination

R285.5

A

1672-2345（2011）02-0016-02

云南省科技廳高新科技計(jì)劃項(xiàng)目（GX10-2004）

2010-12-13

錢(qián)金栿，教授，主要從事藥物化學(xué)與生物資源應(yīng)用開(kāi)發(fā)研究.