林黎娟，金 政，王 研，張曉燕，蔡英蘭*

(1遼東學(xué)院醫(yī)學(xué)院影像系，遼寧丹東 118002;2延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院;3沈陽(yáng)市第五人民醫(yī)院)

肺癌的發(fā)病率較高，但目前對(duì)肺癌發(fā)生、發(fā)展的相關(guān)基因認(rèn)識(shí)仍有限［1］。有研究表明，DEK蛋白與人類多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系［2］，但目前國(guó)內(nèi)有關(guān)肺癌組織中DEK蛋白的相關(guān)報(bào)道鮮見(jiàn)。2006年9月～2008年12月，我們采用免疫組化SP法檢測(cè)了48份非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)組織中DEK蛋白表達(dá)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 行手術(shù)切除的NSCLC標(biāo)本48份，患者男37例，女11例;年齡23～76歲，平均47.3歲。術(shù)后病理證實(shí)為肺腺癌36例，鱗癌12例，其中高分化12例，中等分化33例，低分化3例;腫塊≤3 cm者23例，＞3 cm者25例;伴有淋巴結(jié)或/和胸膜、支氣管軟骨侵犯29例，所有患者術(shù)前均未經(jīng)化療，無(wú)遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移。另選擇48份癌旁良性組織作對(duì)照。

1.2 DEK蛋白表達(dá)檢測(cè)及結(jié)果判定 采用免疫組化SP法。常規(guī)石蠟病理切片4 μm，脫蠟、水化，檸檬酸鹽抗原修復(fù)液中修復(fù)，PBS漂洗，置入30 ml/L H2O210 min，正常血清37℃孵育15 min，加入一抗(抗DEK單克隆抗體，1∶50稀釋;空白對(duì)照中以PBS代替一抗)4℃冰箱孵育過(guò)夜，加入二抗(生物素標(biāo)記抗IgG抗體及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗IgG抗體)37℃孵育60 min，DAB顯色，蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，中性樹(shù)膠封片。參考Mathew等［3］的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定，DEK陽(yáng)性著色于細(xì)胞核。無(wú)著色為－;著色細(xì)胞數(shù)＜50%或染色較淺為+;著色細(xì)胞數(shù)＞50%且染色較深為++;+和++均為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，率的比較行χ2檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

DEK蛋白在癌組織及癌旁組織的陽(yáng)性表達(dá)率分別為 84.4%(35/48)、6.7%(3/48)，P=0.000。DEK蛋白表達(dá)與NSCLC臨床病理學(xué)特征的關(guān)系見(jiàn)表1。

表1 DEK蛋白表達(dá)與NSCLC臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

DEK蛋白是一種原癌蛋白，1992年其被首次從急性髓系白血病(AML)的一種亞型中以DEK-CAN融合蛋白形式分離出來(lái)［4］。在很多人類的侵襲性腫瘤如視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌、膀胱癌、宮頸癌、惡性膠質(zhì)瘤、黑色素瘤以及成年人急性白血病中，DEK蛋白均出現(xiàn)過(guò)表達(dá)［2］。目前關(guān)于DEK蛋白與肺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系報(bào)道少見(jiàn)。

本研究結(jié)果顯示，DEK蛋白在NSCLC組織中陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁組織，說(shuō)明DEK蛋白與NSCLC的發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系，但DEK蛋白的具體作用機(jī)制仍不明了。有研究表明，DEK蛋白與染色質(zhì)重構(gòu)及基因轉(zhuǎn)錄有關(guān)，對(duì)細(xì)胞凋亡具有重要作用［4］;此外，DEK蛋白是一種核磷酸化蛋白，DEK蛋白磷酸化是DEK蛋白的一種重要的翻譯后修飾，DEK蛋白的磷酸化水平與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡時(shí)DEK蛋白的磷酸化水平降低［5］。有學(xué)者用攜帶DEK基因的腺病毒侵染HeLa細(xì)胞，侵染Ad-DEK組細(xì)胞凋亡的比例僅為對(duì)照組細(xì)胞的50%，提示DEK蛋白可能通過(guò)抑制細(xì)胞凋亡刺激HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)［6］;Carro 等［7］通過(guò) DEK 與 Ki-67 表達(dá)相關(guān)性得出，DEK過(guò)表達(dá)與腫瘤細(xì)胞增殖率密切相關(guān)，國(guó)內(nèi)學(xué)者亦證實(shí)DEK蛋白與宮頸癌細(xì)胞增殖密切相關(guān)［8］。故我們推測(cè)在NSCLC發(fā)生、發(fā)展中可能存在DEK蛋白的磷酸化修飾過(guò)程，從而抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖。另外本研究發(fā)現(xiàn)，DEK蛋白在NSCLC中的表達(dá)與腫瘤體積、組織分化程度有密切關(guān)系。因此我們認(rèn)為DEK蛋白可能對(duì)NSCLC預(yù)后判斷有一定參考價(jià)值，但本研究樣本量較少、無(wú)臨床分期，且病理類型只有腺癌和鱗癌，DEK蛋白與NSCLC進(jìn)展的關(guān)系有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究。

［1］譚明旗，張秀娟，周卓，等.Survivin、COX-2蛋白在肺腺癌中的表達(dá)及意義［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2007，17(23):2924-2927.

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