(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院兒科研究所，湖北宜昌 443000)

維生素A(VitA)對(duì)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育、組織細(xì)胞增殖與分化均具有廣泛調(diào)控作用，其缺乏將導(dǎo)致免疫器官萎縮，體液免疫及細(xì)胞免疫功能下降，增加患病和死亡的危險(xiǎn)［1，2］。1995年“全國(guó)提高兒童生命質(zhì)量會(huì)議”推薦將VitA水平≤1.05 μmol/L診斷為亞臨床狀態(tài)VitA缺乏(SVAD)。有研究顯示，反復(fù)感染兒童中 37.9%存在 SVAD，健康兒童僅占10.6%［3］。2007年1月 ～2010年6月，我們檢測(cè)了65例反復(fù)呼吸道感染患兒VitA水平，并對(duì)患兒補(bǔ)充VitA治療，觀察VitA與免疫指標(biāo)變化并進(jìn)行了相關(guān)性分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 65例反復(fù)呼吸道感染患兒(感染組)，男36例，女29例;年齡6個(gè)月～1歲27例，1～2歲24例，2～3歲14例。均符合2006年《兒科手冊(cè)》(5版)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，其中反復(fù)發(fā)作支氣管肺炎30例，間質(zhì)性肺炎12例，喘憋性支氣管炎7例，喉、氣管、支氣管炎11例，化膿性扁桃體炎5例。SVAD患兒42例，男22例，女20例;年齡6個(gè)月～1歲24例，1～2歲18例，反復(fù)支氣管肺炎26例，喘憋性支氣管炎6例，間質(zhì)性肺炎10例。另收集同期體檢的無(wú)急、慢性疾病的健康兒童20例為對(duì)照組，年齡6個(gè)月～1歲8例，1～2歲7例，2～3歲5例。兩組均排除患有貧血、結(jié)核及原發(fā)或繼發(fā)性免疫缺陷病等，且4周內(nèi)未用過(guò)VitA制劑、丙種球蛋白、激素等，其一般資料具有可比性。

1.2 治療方法及相關(guān)指標(biāo)檢測(cè) 感染組予常規(guī)抗感染治療，對(duì)其中21例SVAD患兒加用VitA 2.5萬(wàn)U/d，2 d后減量為4 000 U/d口服，連用2周;4周后抽取兩組清晨空腹靜脈血4 ml，檢測(cè)以下指標(biāo):①血清VitA水平。取不抗凝血1 ml，以2 000 r/min離心10 min，取上清液，采用微量熒光法用熒光分光光度計(jì)在激發(fā)光波長(zhǎng)330 nm，發(fā)射光波長(zhǎng)480 nm下測(cè)其光強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算VitA水平。②免疫指標(biāo)。a.免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及補(bǔ)體 C3水平。取1 ml血樣于37℃水浮法孵育30 min，室溫3 000 r/min離心10 min，采用Hitachi 7600型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)免疫球蛋白以及補(bǔ)體C3水平，質(zhì)量控制參考物質(zhì)(Lot:200205)由衛(wèi)生部上海生物制品研究所提供。b.淋巴細(xì)胞免疫表型。取2 ml血樣注入含有EDTA-K2抗凝劑帶蓋試管中，充分混勻，將待檢血樣用淋巴細(xì)胞分離液制備成淋巴細(xì)胞懸液，采用美國(guó)DKD公司生產(chǎn)的CD3、CD4、CD8單抗試劑標(biāo)記淋巴細(xì)胞，由專人應(yīng)用美國(guó)Beckman Coulter公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行定量分析;檢測(cè)淋巴細(xì)胞免疫表型。③治療效果。比較臨床癥狀體征(退熱、咳嗽及肺部X線吸收)減輕時(shí)間。④相關(guān)性分析。對(duì)各項(xiàng)免疫指標(biāo)與VitA水平行Pearson相關(guān)性分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用±s表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

感染組和對(duì)照組血清VitA水平及免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1;感染組42例SVAD患兒治療后血清VitA水平及免疫指標(biāo)水平見(jiàn)表2，加用VitA與不加用者退熱、咳嗽及肺部X線吸收時(shí)間分別為4、5.5、6.5 d 和 6.25、10.80、10.5 d，χ2=6.40，P ＜0.05;相關(guān)分析結(jié)果示血清 VitA與 IgA 、呈顯著正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為0.482、0.306、0.395、0.445，P ＜0.05或 0.01)，與 CD+3CD+8呈顯著負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為 －0.304，P ＜0.05)，與IgG、IgM和C3無(wú)明顯相關(guān)性。

表1 感染組與對(duì)照組血清VitA水平及各項(xiàng)免疫指標(biāo)比較( ±s)

表1 感染組與對(duì)照組血清VitA水平及各項(xiàng)免疫指標(biāo)比較( ±s)

檢測(cè)指標(biāo) 感染組(n=65) 對(duì)照組(n=20) t值 P值VitA(μmol/L)0.95 ±0.38 1.17 ±0.33 2.56 ＜0.05 IgG(g/L) 7.72 ±1.12 8.91 ±2.14 2.51 ＜0.05 IgA(g/L) 0.77 ±0.26 0.99 ±0.46 2.18 ＜0.05 IgM(g/L) 2.38 ±0.98 2.35 ±0.85 0.09 ＞0.05 C3(g/L) 1.02 ±0.21 1.34 ±0.33 3.59 ＜0.01 CD+3(%) 65.30 ±2.34 68.15 ±3.29 3.82 ＜0.01 CD+3CD+4(%) 36.32 ±2.19 37.66 ±2.59 2.05 ＜0.05 CD+3CD+8(%) 28.07 ±2.28 26.62 ±3.03 1.29 ＞0.05 CD+4/CD+8(%)1.36 ±0.25 1.44 ±0.21 2.12 ＜0.05

表2 42例SVAD患兒治療后血清VitA及免疫指標(biāo)水平比較( ±s)

表2 42例SVAD患兒治療后血清VitA及免疫指標(biāo)水平比較( ±s)

檢測(cè)指標(biāo) 加用VitA(n=21)未加用VitA(n=21)t值 P值VitA(μmol/L)1.28 ±0.23 1.09 ±0.29 2.48 ＜0.05 IgG(g/L) 8.69 ±1.47 7.58 ±1.26 2.70 ＜0.05 IgA(g/L) 1.08 ±0.53 0.89 ±0.32 2.06 ＜0.05 IgM(g/L) 2.78 ±1.06 2.46 ±0.90 2.46 ＜0.05 C3(g/L) 1.55 ±0.82 1.18 ±0.35 2.78 ＜0.01 CD+3(%) 67.05 ±3.90 64.90 ±3.71 2.48 ＜0.05 CD+3CD+4(%) 38.40 ±1.97 36.84 ±1.96 2.18 ＜0.05 CD+3CD+8(%) 26.82 ±1.96 27.04 ±2.68 1.21 ＞0.05 CD+4/CD+8(%)1.50 ±0.76 1.39 ±0.32 2.30 ＜0.05

3 討論

VitA是一種脂溶性維生素，其活性型包括視黃醇、視黃醛和維甲酸。VitA對(duì)T細(xì)胞、B細(xì)胞的影響均以維甲酸受體(RAR)為媒介而發(fā)揮作用［5］。VitA受體包括RAR和維甲酸X受體(RXR)，分別有α、β、γ三種亞型，是配體依賴型轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。Wei等［6］報(bào)道，VitA的6個(gè)受體亞型廣泛分布于幼兒淋巴結(jié)的生發(fā)中心和邊緣層，受體基因的mRNA表達(dá)水平隨兒童的發(fā)育而增加。研究表明，VitA不僅參與體液免疫和細(xì)胞免疫過(guò)程，而且還具有抗炎作用［7］。VitA促進(jìn)抗感染免疫功能的作用尤其對(duì)免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟的兒童時(shí)期表現(xiàn)更為明顯。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在嬰兒接種麻疹疫苗時(shí)補(bǔ)充VitA可促進(jìn)抗麻疹病毒特異性抗體的產(chǎn)生［8］。

VitA缺乏是WHO公認(rèn)的四大營(yíng)養(yǎng)缺乏病之一。據(jù)WHO估計(jì)，全球5歲以下兒童血清視黃醛＜0.7 μmol/L 約為33.3%，處于 VitA 缺乏風(fēng)險(xiǎn)中。我國(guó)2000年全國(guó)VitA抽樣調(diào)查中發(fā)現(xiàn)6個(gè)月以內(nèi)兒童SVAD患病率平均為33.4%，農(nóng)村地區(qū)高達(dá)39.4%［7］。原因?yàn)?個(gè)月內(nèi)兒童主要為母乳喂養(yǎng)，可能與VitA水平低下導(dǎo)致免疫功能下降有關(guān)。SVAD在典型癥狀出現(xiàn)之前就已對(duì)人體免疫功能造成損害，機(jī)體防御病原微生物的屏障功能降低，使感染性疾病易感性上升，患病率和病死率顯著升高［9］。兒童血清VitA水平隨急性呼吸道感染發(fā)病率增加而下降，肺炎急性感染時(shí)VitA水平顯著降低，SVAD兒童血清IgG、IgM均已明顯下降。本研究結(jié)果顯示，感染組處于SVAD 42例，VitA水平及各項(xiàng)免疫指標(biāo)除CD+3CD+8、IgM外均明顯低于對(duì)照組。補(bǔ)充VitA者除外，其余各項(xiàng)免疫指標(biāo)均較未補(bǔ)充者明顯上升，且臨床癥狀減輕時(shí)間明顯縮短。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，體液免疫除IgA與VitA水平相關(guān)性較大外，余均無(wú)明顯相關(guān)，細(xì)胞免疫除表現(xiàn)負(fù)相關(guān)外，余均與VitA水平明顯正相關(guān)?？梢?jiàn)VitA營(yíng)養(yǎng)無(wú)論對(duì)血清或黏膜表面抗體產(chǎn)生，還是對(duì)細(xì)胞免疫活性均有至關(guān)重要的維持和促進(jìn)作用［2］。Tao等［10］在體外培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，全反氏維甲酸可促進(jìn)幼兒B細(xì)胞的活化、分化和成熟，這極可能是VitA增強(qiáng)幼兒體液免疫功能的一個(gè)重要機(jī)制，RAR-a在這種調(diào)控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

綜上所述，VitA缺乏可能是導(dǎo)致兒童反復(fù)呼吸道感染的重要原因之一，補(bǔ)充VitA有助于提高免疫功能，加速患兒康復(fù)。

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