曹平良，劉小強(qiáng)，唐瓊珍，劉 勇，王小瓊

江西省人民醫(yī)院干部保健門診，江西南昌 330006

冠心病是嚴(yán)重危害人類的健康的疾病之一。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為性別、吸煙、年齡、血壓、肥胖、血脂、糖尿病是其發(fā)病的主要因素。越來越多的實(shí)驗(yàn)亦表明冠心病與一些非傳統(tǒng)因素密切相關(guān)，例如高同型半胱氨酸（HCY）血癥、幽門螺桿菌（Hp）感染等。關(guān)于不同基因型Hp感染與血漿HCY的水平以及與冠心病的傳統(tǒng)因素之間的相互關(guān)系在國外研究尚少。本研究旨在探討不同基因型Hp與冠心病的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 對象

冠心病組：選取2009年11月～2010年11月于我院心血管內(nèi)科住院的冠心病患者60例，包括穩(wěn)定型心絞痛36例（男22例，女14例），不穩(wěn)定型心絞痛17例（男9例，女8例），心肌梗死 7 例（男 5 例，女 2 例），年齡（51.9±5.8）歲，均經(jīng)冠狀動脈造影證實(shí)。非冠心病組（對照組）：選取同期收住我院心血管內(nèi)科的非冠心病患者60例，男33例，女27例，年齡（52.2±6.0）歲，均經(jīng)冠狀動脈造影證實(shí)。納入標(biāo)準(zhǔn)：心肌梗死患者處于穩(wěn)定期（心肌梗死后≥6個月）、不穩(wěn)定型心絞痛處于穩(wěn)定期（經(jīng)治療后病情穩(wěn)定＞1周）、無感染、無腫瘤、無全身免疫性疾病、無甲狀腺異常、無嚴(yán)重貧血、無肝腎功能不全、無嚴(yán)重心臟瓣膜病變、無肥厚性心肌病、無心肌再梗死等疾病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病患者長期血糖未控制在正常范圍之內(nèi)，高血壓病Ⅱ級以上，使用免疫抑制藥物。

1.2 方法

詳細(xì)記錄所有入選患者的年齡、性別、身高、體重、血壓、纖維蛋白原、吸煙史等資料?？崭谷⊙?，EDTA抗凝，以3000 r/min離心10 min，分離血漿，置于-70℃保存?zhèn)錅y。采用ELISA法測定HCY，試劑盒購自法國GM公司。采用免疫散射比濁法測定CRP，以散射比濁法測定血漿纖維蛋白原。用Olympus Au5400型全自動生化儀測定血脂、血糖。

胃鏡下取胃黏膜組織，制備組織切片，采用甲苯胺藍(lán)法檢測Hp。對于Hp陽性者，將石蠟切片烤箱中烘烤過夜，二甲苯脫蠟、無水乙醇脫水5 min，2次，空氣中干燥；經(jīng)硫氰酸鈉、胃蛋白酶的作用，讓樣本DNA完全變性，-20℃梯度乙醇中各脫水1 min；滴加cagA基因型探針混合液于組織上孵育24 h，最后再洗脫、封片、遮光保存，在熒光顯微鏡下觀察。幽門螺桿菌cagA基因型DNA探針試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包完成，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。統(tǒng)計(jì)前首先對數(shù)據(jù)進(jìn)行Levene方差齊性檢驗(yàn)，兩組計(jì)量資料之間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病組與對照組一般情況比較

冠心病組 SBP[（134±8）mm Hg vs（126±9）mm Hg]、DBP[（78±9）vs（73±8）mmHg）]、TC[（4.92±1.13）mmol/L vs（4.54±1.26）mmol/L）]、LDL-C[（3.60±1.18）mmol/L vs（3.45±1.09）mmol/L）]、CRP[（7.68±5.62）mg/L vs（3.57±2.68）mg/L]顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P＜0.05），而在性別、吸煙（35/25、37/23）、年齡、BMI[（22.9±2.9）vs（22.7±3.0）kg/m2]、TG[（1.86±0.58）vs（1.78±0.62）mmol/L]、HDL-C[（1.12±0.34）mmol/L vs （1.13±0.43）mmol/L）]、空腹血糖[（5.32±0.76）mmol/L vs（5.29±0.81）mmol/L）]、Fib[（4.58±0.78）g/L vs （3.82±0.67）g/L]方面與對照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P＞0.05）。

2.2 冠心病組與對照組Hp感染率及cagA基因型Hp的檢出率比較

冠心病組的Hp感染率顯著高于對照組Hp感染率（55%vs 30%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.67，P＜0.01）。 冠心病組中Hp陽性患者的cagA基因檢出率高于對照組中Hp陽性患者（60.6%vs 27.8%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.01，P＜0.05）。

2.3 Hp感染患者與無Hp感染患者血漿同型半胱氨酸水平比較

Hp 陽性患者血漿 HCY 水平[（17.91±3.08）μmol/L]顯著高于 Hp 陰性患者血漿 HCY 水平[（13.13±4.08）μmol/L]，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；無論冠心病組還是對照組Hp陽性患者血漿HCY水平均顯著高于Hp陰性患者。見表 1。

表1 Hp感染與血漿HCY水平之間的關(guān)系

2.4 不同基因型Hp感染患者的HCY水平比較

Hp陽性患者中cagA基因型患者血漿HCY水平[（21.19±4.69）μmol/L] 高于非 cagA 基因型患者血漿HCY水平[（15.80±2.79）μmol/L]，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。 冠心病組中cagA 基因型患者血漿 HCY 水平[（22.61±4.98）μmol/L]高于非cagA基因型患者血漿 HCY 水平[（17.10±3.41）μmol/L]，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。對照組中cagA基因型患者血漿 HCY 水平[（16.92±3.82）μmol/L]高于非 cagA 基因型患者血漿 HCY 水平[（13.99±1.92）μmol/L]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 2。

表2 不同基因型Hp感染與血漿HCY水平之間的關(guān)系

2.5 不同基因型Hp與冠心病傳統(tǒng)因素的關(guān)系

2.5.1 冠心病組中，cagA基因型患者與非cagA基因型患者的血壓、性別、吸煙與否、年齡、肥胖、血脂、血糖、纖維蛋白原相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；cagA基因型患者與非cagA基因型患者的CRP水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

2.5.2 對照組中，cagA基因型患者與非cagA基因型患者的血壓、性別、吸煙與否、年齡、肥胖、血脂、血糖、纖維蛋白原相比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；cagA基因型患者與非cagA基因型患者的CRP水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表3 冠心病組中不同基因型幽門螺桿菌與冠心病傳統(tǒng)因素之間的關(guān)系（）

表3 冠心病組中不同基因型幽門螺桿菌與冠心病傳統(tǒng)因素之間的關(guān)系（）

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3 討論

3.1 Hp感染在冠心病發(fā)病中的作用

大量研究表明血漿高同型半胱氨酸血癥是冠心病的一個新的獨(dú)立危險因素[1]。目前，許多實(shí)驗(yàn)表明Hp的感染與冠心病的發(fā)生有密切關(guān)系，許多學(xué)者通過臨床和血清流行病學(xué)等方面進(jìn)行了大量研究，雖然存在一些爭議，但絕大多數(shù)學(xué)者肯定了兩者之間的關(guān)系。賈愛堂等[2]通過對抗Hp治療組、對照組隨訪1年后發(fā)現(xiàn)抗Hp治療組心肌缺血事件發(fā)生顯著低于對照組（P＜0.01）。這表明Hp的感染可明顯提高冠心病的發(fā)生率。本研究亦發(fā)現(xiàn)：冠心病組與對照組相比，冠心病組的Hp感染率明顯高于對照組，這一結(jié)果與國外Ponzetto[3]、Patel[4]等報道基本一致。這說明Hp感染是CHD發(fā)病的一個重要危險因素。

表4 對照組中不同基因型幽門螺桿菌與冠心病傳統(tǒng)因素之間的關(guān)系（）

表4 對照組中不同基因型幽門螺桿菌與冠心病傳統(tǒng)因素之間的關(guān)系（）

傳統(tǒng)因素 性別（男/女）吸煙（是/否）BMI（kg/m2）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）血糖（mmol/L）Fib（g/L）CRP（mg/L）cagA基因型非cagA基因型χ2/t值P值3/26/70.272＞0.0513/79/40.062＞0.05年齡（歲）53.6±5.851.4±6.20.374＞0.05 SBP（mm Hg）126±8125±90.217＞0.05 DBP（mm Hg）72±973±70.252＞0.0521.8±3.220.1±3.40.495＞0.054.56±1.224.51±1.130.083＞0.051.72±0.281.81±0.360.501＞0.051.10±0.431.01±0.320.488＞0.053.46±1.04340±1.100.105＞0.055.26±0.944.92±0.441.069＞0.053.14±0.703.01±0.640.377＞0.053.68±1.022.06±1.002.355＜0.05

3.2 不同基因型HP感染與HCY水平的關(guān)系

Franceschi等[5]發(fā)現(xiàn)，多克隆cagA抗體與人正常臍靜脈組織和動脈硬化組織中的平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，在動脈硬化形成過程中，內(nèi)皮細(xì)胞功能受損，平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞大量增殖，導(dǎo)致了動脈粥樣硬化的發(fā)展。本研究亦發(fā)現(xiàn)冠心病組中cagA基因型Hp患者的檢出率高于對照組，cagA基因型患者血漿HCY水平顯著高于非cagA基因型患者血漿HCY水平。Pasceri等[6]通過對社會背景相似冠心病患者和相同年齡、性別的對照中，攜帶cagA抗原的、毒力更強(qiáng)的Hp感染發(fā)生率進(jìn)行評估，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，冠心病患者幽門螺桿菌的IgG抗體顯著高于對照組。由此可見,在Hp感染中，以cagA基因型Hp感染與冠心病密切相關(guān)，這說明cagA基因型Hp感染是冠心病發(fā)病的一個重要危險因素。

3.3 不同基因型幽門螺桿菌與CRP的關(guān)系

血清CRP含量不但是預(yù)測未來心血管危險因素的炎癥標(biāo)志物，也是心血管疾病的直接致病因素[7]。左晶[8]和董立[9]等的研究結(jié)果表明Hp感染和CRP水平及冠心病危險事件發(fā)生率相關(guān)，對冠心病的病變程度有預(yù)測價值。本研究表明：不同基因型Hp組，冠心病傳統(tǒng)因素之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是cagA基因型Hp感染患者血漿CRP水平顯著高于非cagA基因型Hp感染患者，與吳鈺燕等[10]的研究結(jié)果一致。總之，cagA基因型Hp感染與CRP水平和冠心病發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。

3.4 cagA基因型Hp感染致冠心病發(fā)生的機(jī)制

cagA基因型Hp感染致冠心病發(fā)生的機(jī)制尚不明確，可能是通過：①cagA+Hp感染誘導(dǎo)抗原模擬現(xiàn)象；②cagA+Hp感染與自身免疫反應(yīng)；③cagA+Hp感染與全身性或動脈局部炎癥反應(yīng)[11]。本研究認(rèn)為可能是cagA基因型Hp感染后通過增高血漿HCY水平、增加血漿中CRP的濃度這一中間環(huán)節(jié)致動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展

本實(shí)驗(yàn)中由于樣本容量有限，并未給予Hp感染對照治療組，但是否冠心病伴Hp感染者一律給予抗Hp感染尚需進(jìn)一步研究。

[1]Kullo U,Banantyne CM.Conditional risk factors for atherosclerosis[J].Mayo Clin Proe,2005,80(2):219-230.

[2]賈愛堂,周雪蓮,李振海,等.抗幽門螺桿菌治療對急性冠狀動脈綜合征患者血清同型半胱氨酸及高敏C-反應(yīng)蛋白的影響[J].河北醫(yī)藥,2009,31(18):2450-2451.

[3]Ponzetto A,Sndrone N,Pellicano JR,et al.Helicobacter pylori infection with arterial obstruction[J].Gastroenterology,1998,114(1):260.

[4]Patel P,Mendall MA,Carrington D,et al.Association of helicobacter pylori and chlamydia pneumonia infections with contain heart disease and car-diovascular risk factors[J].BMJ,1995,311(7007):711-714.

[5]Franceschi F,Sepulveda AR,Gasbarrini A,et al.Cross-reactivity of anti-CagA antibodies with vascular wall antigens[J].Circulation,2002,106:430-434.

[6]Pasceri V,Cammarota G,Patti G,et al.Associaton of virulent Helicobacter pylori strains with is chemic heart disease[J].Circulation,1998,97:1675-1679.

[7]Mayr M,Kiechl S,Willeit J,et al.Infections,immunity and atherosclerosis[J].Circulation,2000,102:833-839.

[8]左晶,馬春野.抗幽門螺桿菌治療對冠心病患者血脂及炎癥因子的影響[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2010,17(34):4-5.

[9]董立,劉成玉.超敏C反應(yīng)蛋白和幽門螺桿菌感染與冠心病的關(guān)系[J].青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2007,43(2):110-114.

[10]吳鈺燕,黃冰生,程穎,等.Cag(+)幽門螺桿菌感染對急性冠脈綜合征患者冠狀動脈病變的影響[J].嶺南心血管病雜志,2010,16(4):304-307.

[11]許先進(jìn),金立軍.幽門螺桿菌與冠心病的相關(guān)研究[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(2):244-248.