趙 霞

南京市紅十字醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇南京 210001

我國慢性乙型肝炎患者約占世界的1/3[1]，且HBeAg陰性患者較多，目前對慢性乙型肝炎患者的治療效果監(jiān)測仍以HBeAg和HBV-DNA陰轉(zhuǎn)及臨床肝臟功能改善為主，對HBeAg陰性患者沒有有效監(jiān)測指標(biāo)。近年來研究表明，HBVLP具有反式激活HBV細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的功能，與HBV感染、病毒復(fù)制及預(yù)后均具有密切關(guān)系[2]。本文中筆者對120例慢性乙型肝炎患者血清HBV-LP、HBeAg、HBV-DNA進(jìn)行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2007年1月～2010年12月收治的慢性乙型肝炎患者120例，其中，男78例，女42例；年齡34～67歲，平均（46.1±12.4）歲。所有患者均符合乙型肝炎病毒感染的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，且無其他類型病毒性肝炎合并感染。

1.2 方法

所有患者均于清晨采集空腹靜脈血2～5 ml，分離血清，并置于-20℃冰箱凍存?zhèn)溆谩BV-LP和HBeAg檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行，儀器為瑞士HAMILTON公司全自動酶聯(lián)免疫分析儀，試劑盒為蘇州新波生物技術(shù)公司生產(chǎn)。HBVDNA檢測采用免疫熒光分析法，儀器為美國PE7700型自動熒光PCR分析儀，試劑為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)。所有試劑均在有效期內(nèi)嚴(yán)格按試劑使用說明書使用。比較HBV-DNA、HBV-LP及HBeAg的檢出率，并對HBeAg陰性的患者HBV-LP、HBV-DNA血清學(xué)檢出率進(jìn)行比較，并分析HBV-LP與HBeAg、HBV-DNA的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 慢性乙型肝炎患者三組指標(biāo)的檢測結(jié)果

HBV-LP陽性率為87.50%（105/120），顯著高于HBV-DNA的檢出率[70.00%（84/120）]以及 HBeAg的檢出率[38.33%（46/120）]（均 P<0.01）。見表 1。

表1 HBV-LP、HBV-DNA、HBeAg檢出率比較

2.2 HBeAg陰性患者中HBV-LP與HBV-DNA檢測結(jié)果

74例HBeAg陰性的慢性乙型肝炎患者中，HBV-LP陽性率為 82.43%（61/74），HBV-DNA陽性率為 44.59%（33/74），HBV-LP 陽性率顯著高于 HBV-DNA 陽性率（P<0.01）。見表2。

表2 HBeAg陰性者HPV-LP與HBV-DNA檢出率

2.3 HBV-LP同HBeAg及HBV-DNA表達(dá)的相關(guān)關(guān)系

相關(guān)性檢驗(yàn)顯示HBV-LP與HBV-DNA及HBeAg之間存在正相關(guān)關(guān)系（rs=0.573，P<0.05；rs=0.681，P<0.05）。 見表 3。

表3 HBV-LP與HBeAg及HBV-DNA表達(dá)的相關(guān)關(guān)系（例）

3 討論

近年來，隨著對乙型肝炎發(fā)病機(jī)制、病毒感染、復(fù)制過程中HBV-LP的作用研究，HBV-LP受到專家、學(xué)者們越來越高的重視，越來越多的人逐漸認(rèn)識到HBV-LP的重要臨床意義。HBV-LP是一種由s基因編碼的HBV包膜蛋白[3]，具有復(fù)雜的空間構(gòu)象。Dane顆粒與管狀病毒顆粒（亞病毒顆粒）內(nèi)均存有HBV-LP。HBV核殼體膜可與其內(nèi)側(cè)結(jié)合，而病毒受體又能與其外側(cè)結(jié)合，HBV-LP對HBV顆粒的成熟、包裝有重要作用。HBV患者血清具有感染性與否，與富含HBVLP的亞病毒顆粒及Dane顆粒的多少有密切關(guān)系。目前臨床上廣泛應(yīng)用的HBV持續(xù)抗病毒治療方案僅對cccDNA的再復(fù)制具有一定的抑制作用，而對于已形成的病毒表達(dá)蛋白無抑制能力，故不能清除富含HBV-LP的亞病毒顆粒，其在細(xì)胞內(nèi)的長期累積可造成肝細(xì)胞的液化和凋亡，同時(shí)病毒的繼續(xù)復(fù)制可被亞病毒顆粒反式激活。臨床上即使患者達(dá)到治愈標(biāo)準(zhǔn)，其肝臟組織內(nèi)仍然能檢測出cccHBV-DNA的復(fù)制，說明仍有HBV持續(xù)感染[4]。因此，筆者認(rèn)為，可以通過患者血清HBV-LP的檢測對乙型肝炎病毒外膜的完整性進(jìn)行判斷，從而了解到病毒基因或亞病毒顆粒的存在與否。

本研究結(jié)果中顯示，HBV-LP與HBV-DNA及HBeAg之間均存在顯著相關(guān)性，其陽性檢出率與二者的陽性檢出率同樣顯著相關(guān)，但在總體對比上，HBV-LP陽性檢出率顯著高于HBV-DNA與HBeAg的陽性檢出率，在HBeAg陰性組患者中，HBV-LP陽性檢出率顯著高于HBV-DNA，同時(shí)在HBeAg與HBV-DNA均為陰性的患者組中，HBV-LP仍有67.64%的陽性檢出率。分析出現(xiàn)上述結(jié)果的原因可能為：①血清HBeAg的陰性結(jié)果不能說明不存在病毒的復(fù)制[5-6]，可能與長期抗病毒治療導(dǎo)致病毒基因變異造成抗原合成障礙有關(guān)；②血清HBV-DNA陰性同樣不是一定表明患者體內(nèi)的HBV完全清除，可能是因?yàn)镠BV-DNA檢測敏感度有限或水平較低，有研究稱，血清HBV-DNA水平較低時(shí)，肝臟內(nèi)仍舊可以存在一定量的HBV-DNA；③HBV-LP易在細(xì)胞內(nèi)滯留等多種原因均可造成上述結(jié)果的出現(xiàn)。HBV患者血清HBV-LP濃度的檢測，可彌補(bǔ)HBV-DNA檢測在HBV患者抗病毒治療終點(diǎn)判斷及療效評估中的不足。當(dāng)HBV患者血清HBeAg陰性時(shí)，通過HBV-LP檢測可了解體內(nèi)病毒的復(fù)制、疾病進(jìn)展情況以及抗病毒療效與預(yù)后[7-9]，有效減少更嚴(yán)重的肝硬化及肝癌的發(fā)生。如果HBV患者血清HBV-LP陽性而HBV-DNA陰性時(shí)，進(jìn)行HBV-LP檢測可避免不必要的停藥反跳，具有更好的臨床指導(dǎo)意義。

綜上所述，筆者認(rèn)為對乙型肝炎患者特別是血清HBeAg陰性的乙型肝炎患者，檢測血清HBV-LP可作為監(jiān)測患者體內(nèi)病毒復(fù)制、疾病進(jìn)展及抗病毒治療效果的敏感指標(biāo)，對提高血清學(xué)手段診斷HBV的水平有積極意義。

[1]梁曉峰,陳園生,王曉軍,等.中國3歲以上人群乙型肝炎血清流行病學(xué)研究[J].中華流行病學(xué)雜志,2005,26(9):655-658.

[2]樂愛平,鞠北華,王文,等.乙型肝炎病毒大蛋白檢測在乙型肝炎診治中的臨床意義[J].世界華人消化雜志,2006,14(16):1578-1581.

[3]游選旺,黃健,唐畢華.乙型肝炎病毒大蛋白臨床檢測意義初探[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2009,27(3):275-276.

[4]侯玲,徐晚?xiàng)?乙型肝炎(HBV)感染臨床治愈后的長期預(yù)后[J].日本醫(yī)學(xué)介紹,2004,25(11):510.

[5]刁奇志,王貴學(xué).HBVDNA與Pre-S1抗原均陽性患者HBeAg陰性的原因探討[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2006,24(5):346-347.

[6]陳應(yīng)華,肖燕,李佳,等.HBsAg陰性血清模式與 HBV DNA的關(guān)系及臨床意義[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,33(4):344-345.

[7]吳瀟,張偉民.乙型肝炎患者乙肝病毒大蛋白檢測與HBV DNA的關(guān)系[J].浙江檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007,5(3):11-13.

[8]趙碎娟,孫根妹,鄭明波.HBeAg陰性慢性乙型肝炎患者抗病毒治療中血清表面抗原大蛋白水平與乙型肝炎病毒核酸之間的關(guān)系[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2010,20(4):818-820.

[9]梅曉莉.慢性乙型病毒性肝炎的治療研究進(jìn)展[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,8(2):131-133.