程再興，陳衛(wèi)琳，陳錫鋮，林 丹，陳 紅

福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建福州 350108

楓香脂為金縷梅科植物楓香樹Liquidambar formosana Hance的干燥樹脂，始載于《唐本草》，《中國藥典》自1977年版開始收載。該藥性味辛、苦、平，歸脾、肺、肝經(jīng)，有活血止痛、解毒、生肌、涼血之功效，用于吐血、咯血、衄血、金瘡出血、一切痛疽瘡毒及牙痛等癥，在閩南地區(qū)有用楓香樹皮燉肉食用預(yù)防和治療寒濕痹癥的傳統(tǒng)。研究表明[1-3]，楓香脂可能含有萜類、黃酮類、酚酸類、苯丙素類、揮發(fā)油等化學(xué)成分，有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈和血管、增加血流量、抗心肌缺氧、改善血液流變性、抗凝血、抗血栓形成和血小板聚集等藥理作用。但目前關(guān)于楓香脂“活血化瘀”的主要物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制的研究很少進(jìn)行，為了進(jìn)一步對(duì)楓香脂進(jìn)行精制，提高其臨床利用效果，本次實(shí)驗(yàn)研究其揮發(fā)油和乙酸乙酯提取部位對(duì)正常小鼠血管活性因子的影響，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

1.1 藥物與試劑

楓香脂（購自福建莆田，經(jīng)由福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院鑒定教研室主任楊成梓副教授鑒定為金縷梅科植物楓香樹Liquidambar formosana Hance的干燥樹脂）、吐溫-80（上海聯(lián)試化工試劑有限公司，批號(hào)：20091027）、乙酸乙酯（上海久億化學(xué)試劑有限公司，分析純）、小鼠前列環(huán)素（PGI2）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠血栓素A2（TXA2）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠組織型纖維溶酶激活物（t-PA）酶聯(lián)免疫分析試劑盒、小鼠內(nèi)皮素1（ET-1）酶聯(lián)免疫分析試劑盒（均購自上海勁馬生物科技有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22 g，清潔級(jí)，購于上海斯萊克，飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

Model 680 型酶標(biāo)儀（Bio-Rad）、PYX-DHS-40X50-BS-Ⅱ恒溫水浴培養(yǎng)箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）、TDL-50B離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）等。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

將70只昆明小鼠隨機(jī)分為7組：空白組、揮發(fā)油大劑量組、揮發(fā)油中劑量組、揮發(fā)油小劑量組、乙酸乙酯部位大劑量組、乙酸乙酯部位中劑量組、乙酸乙酯部位小劑量組，每組各10只，分別灌服5%吐溫-80液，楓香脂揮發(fā)油（用5%吐溫-80配制）4.00、2.00、1.00 ml/kg，楓香脂乙酸乙酯提取部位 （用5%吐溫-80 配制）0.40、0.20、0.10 g/kg，灌胃體積為 0.2 ml/10 g，每日灌胃1次。于灌胃第10天，給藥2 h后眼球取血，分離血漿，按照試劑盒說明采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定TXA2、PGI2、t-PA和ET-1等。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 11.5 for windows統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。組間比較用單因素方差分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

眼球取血，1%肝素抗凝，3000 r/min離心，分離血漿，按照試劑盒說明采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定TXA2、PGI2、t-PA和ET-1的含量。結(jié)果顯示，給予楓香脂揮發(fā)油和乙酸乙酯部位后，小鼠血漿ET的含量均降低，但與空白組相比，只有揮發(fā)油大劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血漿TXA2的含量也均降低，與空白組相比，揮發(fā)油大、中劑量組有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），揮發(fā)油小劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血漿 PGI2含量均升高，與空白組相比，揮發(fā)油大、中劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血漿t-PA含量均降低，與空白組相比，乙酸乙酯部位組大、中、小劑量組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血漿ET-1的含量均降低，但與空白組相比，只有揮發(fā)油大劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見表 1。

3 討論

血管活性因子對(duì)血管張力、凝血、纖溶的作用分為正性和負(fù)性、促進(jìn)和拮抗兩方面。在生理情況下，由于神經(jīng)、體液和局部的正負(fù)反饋機(jī)制的內(nèi)在調(diào)節(jié)，維持著兩者的平衡。其中TXA2和PGI2均是花生四烯酸的主要代謝產(chǎn)物，TXA2主要功能為促進(jìn)血管收縮和血小板聚集，PGI2主要功能為抗血小板聚集，舒張血管，尤其可使微血管舒張、局部血流量增加。PGI2和TXA2的平衡是維持正常血小板功能、血管張力以及保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷的重要環(huán)節(jié)，血漿TXA2/PGI2比例失調(diào)在微血管病變中起重要作用[4-5]。纖溶酶原激活系統(tǒng)是體內(nèi)防止血栓形成的重要機(jī)制，其中心環(huán)節(jié)是PA系統(tǒng)將纖溶酶原轉(zhuǎn)化成纖溶酶從而發(fā)揮纖溶作用。t-PA是人體血液中存在的兩種纖溶酶原活化劑之一，對(duì)纖維蛋白有很強(qiáng)的親和力，能在纖維蛋白上激活纖溶酶原。t-PA抗原濃度升高常常意味著其活性下降，也可造成一種血栓前高凝狀態(tài)[6-7]。ET-1具有強(qiáng)大的收縮血管作用，可調(diào)節(jié)局部血管的緊張度，參與血壓的調(diào)節(jié)；促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖，調(diào)節(jié)心臟的內(nèi)分泌和代謝功能[8-9]?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，血瘀證病理改變與血管活性因子密切相關(guān)，血管內(nèi)皮細(xì)胞合成多種血管活性物質(zhì)，從小分子氣體的一氧化氮（NO）到肽類大分子ET-1與緩激肽，對(duì)血管的舒縮功能與血液的流動(dòng)性有不可替代的調(diào)節(jié)作用，對(duì)維持正常血液循環(huán)有重要的生理意義。

表1 楓香脂揮發(fā)油和乙酸乙酯部位對(duì)小鼠血栓素A2、前列腺素I2、組織型纖維溶酶激活物和內(nèi)皮素1的影響（，μg/L）

表1 楓香脂揮發(fā)油和乙酸乙酯部位對(duì)小鼠血栓素A2、前列腺素I2、組織型纖維溶酶激活物和內(nèi)皮素1的影響（，μg/L）

注：與空白組比較，*P＜0.05，△P＜0.01

組別 動(dòng)物數(shù)（只） 劑量（/kg）空白組揮發(fā)油大劑量組揮發(fā)油中劑量組揮發(fā)油小劑量組乙酸乙酯部位大劑量組乙酸乙酯部位中劑量組乙酸乙酯部位小劑量組101010101010100 ml 4.00 ml 2.00 ml 1.00 ml 0.40 g 0.20 g 0.10 g TXA2 268.870±42.257224.258±35.479△232.484±29.138△244.645±36.687*232.677±15.614249.065±22.852256.065±25.066 PGI2 107.850±12.264117.900±6.676*116.167±6.284*115.383±8.155114.833±8.228115.667±12.846113.500±7.733 t-PA 1968.400±229.8731957.800±347.0591939.800±273.5181867.800±186.0831647.200±141.717*1748.000±198.017*1550.800±152.062*ET-1716.147±52.137665.321±32.012*674.680±36.809677.120±40.842671.468±49.522685.872±49.771684.036±87.065

本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，楓香脂揮發(fā)油和乙酸乙酯部位可以通過調(diào)節(jié)血管活性因子在體內(nèi)的分泌，即減少縮血管物質(zhì)ET-1、TXA2的分泌，促進(jìn)擴(kuò)血管成分PGI2的分泌，調(diào)節(jié)兩者之間的比例，還能夠降低t-PA的濃度，促進(jìn)其活性升高，從而達(dá)到改善小鼠血流狀態(tài)的作用等。因此，楓香脂“活血化瘀”功效與楓香脂揮發(fā)油和乙酸乙酯部位對(duì)血管活性因子的調(diào)節(jié)作用有關(guān)，具體機(jī)制可能與改善血管內(nèi)皮功能有一定聯(lián)系，但有待進(jìn)一步深入研究。本次研究將為進(jìn)一步研究楓香脂在心血管疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等方面的藥理作用及其活性物質(zhì)奠定基礎(chǔ)。

[1]劉馳,徐全富,何其敏,等.楓香樹脂化學(xué)成分[J].有機(jī)化學(xué)研究簡(jiǎn)報(bào),1991,11(5):508.

[2]李蓓,邵以德,郭濟(jì)賢,等.楓香脂和蘇合香的心血管藥理學(xué)研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2000,11(5):72.

[3]李蓓,郭濟(jì)賢.楓香樹屬二種香樹脂類生藥——蘇臺(tái)香與楓香脂的研究概況[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),1995,7(3):53.

[4]吳會(huì)生,郭培培,尚游,等.氟比洛芬酯預(yù)處理對(duì)大鼠全腦缺血/再灌注時(shí)腦組織TXA2/PGI2的影響[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2009,25(9):1176.

[5]舒秋霞,石元?jiǎng)?聶磊,等.大豆皂甙對(duì)大鼠血脂代謝及血漿TXA2和PGI2的影響[J].華南國防醫(yī)學(xué)雜志,2009,23(5):9-12.

[6]黃獻(xiàn)平,袁肇凱,毛以林,等.冠心病血瘀證凝血功能指標(biāo)的檢測(cè)分析[J].中華醫(yī)學(xué)與健康,2005,12(5):1.

[7]李格,史載祥,賈海忠,等.大蒜素對(duì)不同中醫(yī)證型不穩(wěn)定性心絞痛的作用及與血脂和GMP-140的關(guān)系[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,l8(4):208.

[8]李國輝,李定詳.冠心病血瘀證四亞型與血管內(nèi)皮素(ET),一氧化氮(NO)的相關(guān)性的探討[J].中華臨床醫(yī)學(xué)研究雜志,2007,13(13):1451.

[9]陳利國,馬民,屈援,等.糖尿病血瘀證研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥雜志,2005,20(2):114.