張美英，李春玲* ，劉玉田，景雪薇，李秀云，張晉東

(1萊蕪市人民醫(yī)院，山東萊蕪271100;2單縣中心醫(yī)院;3菏澤市傳染病醫(yī)院)

手足口病是由多種腸道病毒引起的常見(jiàn)傳染病，常見(jiàn)病原為腸道病毒71型(EV71)及柯薩奇病毒(Cox)Al6型，好發(fā)于嬰幼兒，病情輕重程度除與感染病毒類(lèi)型有關(guān)外，還與機(jī)體的免疫功能有關(guān)。2009年5～10月，我們檢測(cè)了42例手足口病患兒血清 IL-1β、IL-6、IL-12及 TNF-α 水平，現(xiàn)探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 手足口病患兒42例(觀察組)，男25例，女17例;年齡6個(gè)月～3歲，平均15.6個(gè)月。均符合中華人民共和國(guó)頒布的《手足口病預(yù)防控制指南(2008年版)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中重癥23例，輕癥19例。均于3 d內(nèi)發(fā)病，于急性期入院，予對(duì)癥治療5～7 d后癥狀基本消失，處于恢復(fù)期37例，死亡5例。另取同期我院體檢健康兒童35例為對(duì)照組，男20例，女15例;年齡7個(gè)月～3歲，平均18.4個(gè)月。

1.2 血清細(xì)胞因子檢測(cè) 取患兒不抗凝靜脈血2 ml，2 500 r/min離心10 min，吸取血清 -40℃冰箱凍存。采用ELISA法檢測(cè)血清細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α水平，所有樣本均設(shè)雙孔，在同一試驗(yàn)中完成，取均值，使用美國(guó)BIO-BAD450型酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，行t檢驗(yàn)，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組血清細(xì)胞因子水平見(jiàn)表1。

表1 兩組血清 IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α水平比較(pg/L，±s)

表1 兩組血清 IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α水平比較(pg/L，±s)

注:與對(duì)照組及恢復(fù)期比較，*P ＜0.01;與輕癥比較，△P ＜0.01

組別 n IL-1β IL-6 IL-12 TNF-α 42急性期 42 55.65 ±26.24*23.07 ±4.12*38.41 ±12.85*18.55 ±16.07*重癥 23 36.45 ± 9.42△ 12.56 ±3.10△ 27.20 ±13.71△ 5.64 ±17.55△輕癥 19 63.69 ± 3.26 36.05 ±1.40 47.98 ±11.12 26.43 ± 1.32恢復(fù)期 37 33.54 ± 3.48 11.23 ±1.51 20.78 ±10.79 9.68 ± 4.46對(duì)照組 35 31.45 ± 2.98 10.22 ±0.99 18.55 ± 9.79 7.61 ± 1.觀察組37

3 討論

手足口病是近年來(lái)流行的急性發(fā)熱出疹性傳染病，多數(shù)患兒癥狀輕微，以發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹或皰疹為主要特征，少數(shù)可并發(fā)無(wú)菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、肺水腫和心肌炎等。手足口病的發(fā)病機(jī)制至今未完全清楚，可能與病毒直接侵犯組織細(xì)胞，特別是大量病毒在體內(nèi)復(fù)制造成細(xì)胞破壞有關(guān)［1，2］。

EV71感染易致重癥病例，病情進(jìn)展快，臨床表現(xiàn)為腦炎、腦脊髓炎和神經(jīng)源性肺水腫，病死率較高。EV71感染機(jī)體后，首先刺激易感細(xì)胞和吞噬細(xì)胞等非特異性免疫細(xì)胞產(chǎn)生INF-α/β、TNF-α和IL-12等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子對(duì)控制病毒的復(fù)制與感染具有重要作用。EV71感染2～3 d后，NK細(xì)胞即可通過(guò)趨化作用聚集至感染部位，在上述細(xì)胞因子的作用下NK細(xì)胞被活化，分泌INF-γ和TNF-α等細(xì)胞因子，通過(guò)干擾EV71復(fù)制和進(jìn)一步活化吞噬細(xì)胞等非特異性免疫效應(yīng)細(xì)胞，擴(kuò)大和增強(qiáng)機(jī)體的抗感染免疫能力。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α對(duì)多種類(lèi)型的病毒復(fù)制均有抑制作用。病毒感染時(shí)宿主發(fā)生特異性和非特異性免疫反應(yīng)，而 IL-1β、IL-6、IL-12 及 TNF-α 是感染早期非特異性及隨后發(fā)生的抗原特異性免疫間的功能性橋梁。有研究顯示，EV71特異性細(xì)胞免疫水平與臨床轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)。本研究顯示，觀察組發(fā)病急性期IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α均明顯高于恢復(fù)期及對(duì)照組，而恢復(fù)期以上細(xì)胞因子水平雖高于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明 IL-1β、IL-6、IL-12及 TNF-α的免疫保護(hù)作用發(fā)生在感染早期，急性期各細(xì)胞因子水平升高可能有助于機(jī)體早期啟動(dòng)特異性和非特異性免疫，從而最大限度地調(diào)動(dòng)各類(lèi)免疫細(xì)胞參與EV71或Cox A16等腸道病毒的免疫，加速疾病自限恢復(fù)。一般情況下IL-1β、IL-6、IL-12及TNF-α促進(jìn)細(xì)胞免疫，但在特定CK環(huán)境中，這些細(xì)胞因子可促進(jìn)抗體生成和類(lèi)別轉(zhuǎn)換?；謴?fù)期各細(xì)胞因子水平仍高于對(duì)照組，可能與體液免疫有關(guān)，此與EV71感染患兒發(fā)病1周后血清特異性抗體IgM增加相一致［3］。手足口病重癥病例各細(xì)胞因子水平明顯低于輕癥病例，原因可能為:①感染早期EV71誘導(dǎo)TNF-α前炎癥細(xì)胞因子過(guò)度產(chǎn)生，產(chǎn)生全身炎癥反應(yīng)綜合征，隨炎癥反應(yīng)進(jìn)展可致IL-10等抗炎細(xì)胞因子持續(xù)大量產(chǎn)生以拮抗過(guò)度產(chǎn)生的前炎癥細(xì)胞因子，同時(shí)前炎癥細(xì)胞因子合成減少或消耗降解而降低［4～7］;②EV71感染可通過(guò)凋亡導(dǎo)致 T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等減少，抑制機(jī)體免疫反應(yīng);③IL-6等細(xì)胞因子的微環(huán)境改變產(chǎn)生異常的適應(yīng)性免疫反應(yīng)［8］。

總之，手足口病為一組腸道病毒感染，可引起一系列的免疫反應(yīng)，以達(dá)到清除病毒的目的，急性期各細(xì)胞因子水平升高有助于機(jī)體早期啟動(dòng)特異性和非特異性免疫，適時(shí)給予免疫調(diào)節(jié)治療可能有助于降低重癥病例的發(fā)生率和病死率。

［1］Schmidt NJ.An appavently new enterovirus isolated from patiants with disease of the central nervous system［J］.J Infect Dis，1974，129(3):304-309.

［2］Gilbert GL.Outbreaks of enterovirus71 in Victoria Australia with a high incidence of neurologic involvement［J］.Pediatr Infect Dis J，1988，7(3):484-488.

［3］劉亞敏，王春妍，宋立文，等.手足口病患兒體液免疫檢測(cè)分析［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，8(8):73-74.

［4］Wang SM，LeiHY，Yu CK，etal.Acute chemokine response in the blood and cerebrospinal fluid of children with enterovirus71-associated brainstem encephalitis［J］.J Infect Dis，2008，198(7):1002-1006.

［5］Lekkou A，Karakantza M，Mouzaki A，et al.Cytokine production and monocyte HLA-DR expression as predictors of outcome for patiants with community-acquired severe infections［J］.Clin Diagn Lab Immunol，2004，11(1):161-167.

［6］Wan S，Xia C，Morel L.IL-6 produced by dendritic cell from Lupus-proonemice inhibitsT cell regulatory functions［J］.J Immunol，2007，178(1):271-279.

［7］Wang SM，Lei HY，Huang MC，et al.Modulatong of cytokine production by intravenous immunoglobnlin in patients with enterovirus 71-associated brainstem encephalitis［J］.J Clin Virol，2006，37(1):47-52.

［8］付丹，李成榮，何顏霞，等.腸道病毒71型感染患兒免疫功能探討［J］.中華兒科雜志，2009，47(11):829-834.