李曉琳

（天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院檢驗科，天津300070）

據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)計，到2025年，糖尿?。―M）患者將達(dá)到3億，其中2型糖尿病約占全部患者的85%~90%，它對患者的主要威脅之一就是腎臟損害，能阻止糖尿病和高血壓腎功能早期損害的方法是早診斷、早治療[1-2]。較多研究發(fā)現(xiàn)血清胱抑素C（serum cystain C，SCys-C）和尿微量白蛋白（UMA）是反映腎功能損害的敏感指標(biāo)[3]。早期腎功能損害評價的直接指標(biāo)是腎小球濾過率（GFR），而GFR的評估有賴于反映腎功能損害敏感的標(biāo)志物。臨床常檢測血清肌酐（SCr）、尿微量白蛋白（UMA）、β2-微球蛋白（β2-MG）等來評估GFR，但它們都有一定的局限性，且不同程度地受一些腎內(nèi)腎外因素的影響[4]。血清胱抑素C是近來發(fā)現(xiàn)的一個能較好反映腎小球濾過率的指標(biāo)，較SCr、CCr等有更高的敏感性[5]，且不受年齡、性別影響，在小兒、老年、中老年中均適用。本文檢測胱抑素C在2型糖尿病腎病(DN)患者血清中的動態(tài)變化，分析其對糖尿病腎病患者的早期診斷價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 對照組（NC組） 天津市公安醫(yī)院健康體檢者30人（男11人，女19人），年齡50~73歲（55.8±9.6），均經(jīng)口服糖耐量試驗（OGTT）及體格檢查后排除糖尿病、血脂異常、高血壓、心腦肝腎等疾病。

1.1.2 研究組（T2DM組） 天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院2010年收治的符合WHO1999年的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)：即空腹血糖≥7.0 mmo1/L或餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L的糖尿病患者，共88例（男39例，女49例），年齡 38~81歲（60.1±9.3）。根據(jù) 24 h UMA定量將2型糖尿病患者分為3組：（1）單純DM組（SDM 組）：UMA＜30 mg/24 h，共 31例（男 10例，女21例），年齡（60.4±7.2）歲；（2）早期 DN 組（EDN組）：UMA 30～300 mg/24 h，共 30例（男 15例，女15例），年齡（57.8±8.0）歲，排除其它因素和心衰、尿路感染、梗阻等；(3)臨床期DN組（CDN組）：UMA＞300 mg/24 h，共 27例（男 14例，女 13例），年齡（63.7±11.7）歲，排除其它因素和心衰、尿路感染、梗阻等。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本處理 每位研究對象空腹10 h后清晨抽靜脈血分離血清，于－20℃冰箱保存待測，留取晨起7:00至次日7:00內(nèi)24 h尿，并集于一容器中，加入防腐劑，待檢并同時記錄身高、體重和尿量。

1.2.2 測定方法 血清Cys-C的檢測采用乳膠顆粒增強散射免疫比濁法，血清β2-MG和24 h尿UMA的檢測采用免疫比濁法，試劑均由北京九強生物技術(shù)公司提供，均以HITACHI日立7070全自動生化分析儀測定；SCr、尿肌酐（UCr）的檢測采用酶法，使用羅氏公司試劑，由羅氏Modular P全自動生化分析儀測定；HbA1c的檢測采用高效液相色譜法，用HLC-723 G7全自動糖化血紅蛋白分析儀測定。所有檢測項目的質(zhì)量控制均符合衛(wèi)生部、天津市以及室內(nèi)質(zhì)控要求。根據(jù)所有對象的SCr、UCr、24 h尿量、身高、體重計算內(nèi)生肌酐清除率（CCr）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述。用SPSS 11.0軟件進行多組間均數(shù)比較的方差分析、4組均數(shù)兩兩比較的q檢驗和Pearson相關(guān)分析。認(rèn)為P＜0.05時有統(tǒng)計學(xué)差異，P＜0.01時差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 一般情況比較 NC組、SDM組、EDN組和CDN組4組間比較，性別、年齡無顯著性差異；糖尿病各組空腹血糖、糖化血紅蛋白均較對照組顯著升高（P<0.01）（表 1）。

2.2 Cys-C 與 UMA、CCr、β2-MG、SCr的檢測結(jié)果比較 NC組、SDM組、EDN組和CDN組4組間觀察指標(biāo)比較結(jié)果見表2。

表1 對照組與糖尿病各組患者一般情況的比較Tab 1 Comparison of general characteristics between control group and diabetic group patients

表2 對照組與糖尿病各組患者觀察指標(biāo)的比較Tab 2 Comparison of parameters between control group and diabetic group patients

NC組、SDM組、EDN組和CDN組4組間觀察指標(biāo)進行均數(shù)兩兩比較的q檢驗見表3。

2.3 Pearson相關(guān)分析 糖尿病患者血清Cys-C與SCr、β2-MG、UMA 呈正相關(guān)（P<0.01），相關(guān)系數(shù)分別為 0.837、0.581和 0.627；與 CCr呈負(fù)相關(guān)（P<0.01），相關(guān)系數(shù)為-0.539（P<0.01）。以血清Cys-C檢測量為橫坐標(biāo)，分別以SCr、β2-MG、UMA和CCr檢測含量為縱坐標(biāo)做散點圖進行比較，結(jié)果見圖1。

表3 對照組與糖尿病各組間觀察指標(biāo)均數(shù)兩兩比較Tab 3 Pairwise comparison of clinical characteristics between control group and diabetic group patients

圖1 血清Cys-C與SCr、β2-MG、UMA、CCr相關(guān)關(guān)系比較的散點圖Fig 1 Scatter plot of correlation of serum Cys-C and SCr,β2-MG,UMA,CCr

3 討論

Cys-C是一種分子質(zhì)量為1.33 ku的小分子量的堿性蛋白質(zhì)，能在大多數(shù)的有核細(xì)胞內(nèi)以恒定速度轉(zhuǎn)錄和翻譯，屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑第二大超家族,機體所有有核細(xì)胞都能穩(wěn)定分泌，產(chǎn)生速率恒定。由于其分子量大于肌酐，且?guī)д姾?，所以更易反?yīng)腎小球濾過膜通透性的早期變化，血中的胱抑素C可完全被腎小球濾過，在近曲小管被重吸收并被完全分解代謝，腎臟是清除循環(huán)胱抑素C的唯一器官，所以血清濃度主要由個體的GFR來決定，被認(rèn)為是反映GFR比較理想的內(nèi)源性標(biāo)志物，是反映腎功能損傷較理想的指標(biāo)[6]。同時Cys-C生成濃度穩(wěn)定，各組織生成率不受年齡、性別、腫瘤、肌肉量及蛋白攝入量等的影響[7]。傳統(tǒng)評價腎功能的方法有菊粉清除實驗、CCr實驗等，菊粉清除實驗作為評價GFR的參考方法，但人體對菊粉有發(fā)熱等副反應(yīng)，不適合在臨床上應(yīng)用和推廣，而CCr實驗常作為臨床上評價腎功能的常規(guī)方法，但內(nèi)生肌酐清除率的檢測需要病人留取24 h尿液及血液，分別檢測其尿肌酐和血肌酐，然后體重及身高等參數(shù)計算內(nèi)生肌酐清除率，且對少尿或無尿患者的應(yīng)用受到一定限制，從留取標(biāo)本到測定費時、繁瑣。同時還受性別、食物結(jié)構(gòu)等因素影響，應(yīng)用起來很不方便。本研究應(yīng)用PENIA法檢測血清Cys-C，既無需接觸同位素又可避免肌酐清除率檢測過程的繁瑣及不易正確留取標(biāo)本而影響結(jié)果的可靠性，故方法簡便、結(jié)果更為準(zhǔn)確。

本研究選取常見的檢測腎小球濾過功能的多項指標(biāo)，以UMA分組，與正常組做對照，顯示糖尿病患者當(dāng)UMA還未達(dá)到30 mg/24 h時，血清Cys－C的升高已經(jīng)有統(tǒng)計學(xué)意義（P＝0.01），而血清β2-MG、SCr和CCr仍正常，無顯著差異。結(jié)果顯示，在評估腎小球濾過功能時，血清Cys－C的敏感性高于UMA、血清 β2-MG、SCr和 CCr，與文獻報道相一致[8]。

本實驗對血清 Cys－C 與 SCr、β2-MG、CCr、UMA進行了相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清Cys－C與SCr、β2-MG、CCr、UMA均具有很強的相關(guān)性，以血清Cys－C與β2-MG相關(guān)性最為密切，呈現(xiàn)顯著正相關(guān)，由此說明血清Cys－C對2型糖尿病腎病早期有較高的診斷價值，能可靠地反映早期腎功能損害，在糖尿病腎病的早期診斷中具有指導(dǎo)意義。

綜上所述，Cys-C較其他指標(biāo)具有更高的敏感性和特異性，是目前較為理想的反映GFR的內(nèi)源性標(biāo)志物[9]。

［1］潘靜，魏明競.尿液微量白蛋白的研究近況[J].臨床檢驗雜志，2003，21(5)：315

［2］萬長春.孟澤.糖尿病腎病早期診斷的實驗室研究進展[J].臨床檢驗雜志，1998，16(3)：186

［3］吳忠毅,楊慶祥，沈來龍.尿液轉(zhuǎn)鐵蛋白用于糖尿病腎病的早期診斷[J].臨床檢驗雜志，1994，12(3)：118

［4］李海霞，張春麗，徐國賓,等.健康人群血清半胱氨酸蛋白酶抑制劑C與肌酐分布及其評價慢性腎臟病患者腎小球濾過功能的比較研究[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(11):9704

［5］曾愛平，周仁芳，王焰兵.血清胱抑素C濃度判斷腎小球濾過功能的應(yīng)用評價[J].臨床檢驗雜志，2002,20(3):159

［6］Villa P,Jimenez M,Soriano MC,et a1.Serum cystatin C concentration as a marker of acute renal dysfunction in critically ill patients[J].Crit Care,2005,9(2)：139

［7］Filler G，Bokenkamp A,Hofmann W,et a1.Cys C as a marker of GFR-history,indications,and future research[J].Clin Biochem,2005,38(1)：1

［8］祁金友.糖尿病患者血清中胱抑素C含量測定的臨床意義[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（1）：35

［9］林禮興，雷煥英，林麗婷.血清胱抑素C測定對評價腎小球濾過功能的重要價值[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，5（7）：1010n