徐禮通

解放軍第一六一醫(yī)院（湖北武漢430010）

肝性腦病（HE）又稱肝昏迷，是指肝臟功能嚴重障礙引起的以代謝紊亂為基礎的中樞神經系統(tǒng)功能失調綜合征，是慢性肝病及嚴重肝病患者常見的并發(fā)癥和死亡原因，病死率高達60%～80%［1］。筆者臨床運用生大黃泡服或者保留灌腸能顯著提高慢性重型肝炎患者的存活率，并能預防HE的發(fā)生。本研究觀察生大黃對實驗性大鼠HE模型的影響，為臨床運用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物清潔級雄性wistar大鼠70只，體質量 （200±20）g，購自湖北省醫(yī)學科學院動物實驗中心。

1.2 藥物及試劑生大黃煎劑由解放軍第一六一醫(yī)院藥劑科煎制，制成含質量濃度為1g/mL大黃水煎液，置于冰箱4℃保存?zhèn)溆?；乳果糖口服溶液，?guī)格：5.0g/10mL。由丹東康復制藥有限公司生產，批號：091202。四氯化碳（CCl4，分析純），由老河口市石油化工總廠生產，批號：080805。用液體石蠟配制成20%的CCl4石蠟溶液；天門冬酸氨基轉移酶（AST）、谷氨酸氨基轉移酶（ALT）、血氨（BA）、內毒素（LPS）檢測試劑盒均購自南京建成生物工程公司。

1.3 造模與給藥70只大鼠采用數(shù)字表法隨機分為正常組10只，模型組、生大黃組和乳果糖組各20只。HE大鼠模型參照文獻［2］方法。除正常組外，采用CCl4誘導，結扎、切除2/3肝臟，建立大鼠HE模型。實驗開始每日1次給大鼠灌胃20%CCl4，石蠟溶液5mL/kg，連續(xù)2d。手術前大鼠禁食12h，在戊巴比妥鈉麻醉下背位固定于手術板上，無菌操作，沿腹正中線上腹部小切口開腹，暴露肝臟，依次在肝蒂部結扎左前葉及中葉，將此兩葉切除；然后再將暴露的肝右葉結扎，但不切除。正常組灌胃等體積的生理鹽水，并行假手術（剖腹但不切肝）。于實驗第5日（術后禁食24h）開始，生大黃組和乳果糖組分別予生大黃水煎液5g/100g、乳果糖0.5g/100g灌胃，連續(xù)灌胃3d。實驗第8日全部大鼠在乙醚麻醉下心臟采血，取肝組織標本。

1.4 標本采集與檢測腦電圖檢測：采血前，各組大鼠均在乙醚麻醉下俯臥，安置額枕骨間電極，用八道生理記錄儀描記腦電圖，時間常數(shù)0.3s，高頻濾波100Hz。血清生化指標：取血5mL，離心取血清，嚴格按照試劑盒操作說明檢測血清AST、ALT、BA、LPS水平。肝臟病理檢查 ：取大鼠肝左葉部分肝組織用10%中性甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋、切片，常規(guī)HE染色，光鏡下觀察肝組織病理變化。

1.5 統(tǒng)計學處理采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s）表示，組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 各組大鼠死亡率比較正常組大鼠無死亡，模型組死亡率為60%（12/20），生大黃組死亡率為 35%（7/20），乳果糖死亡率為40%（8/20）；生大黃組和乳果糖組與模型組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；但生大黃組與乳果糖組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.2 各組大鼠腦電圖變化正常組大鼠腦電圖以α波為主，無明顯異常；模型組大鼠腦電頻率變慢，5～7次/s，以寬大的δ波為主，電壓高達160～280μV；與模型組比較，生大黃組和乳果糖組大鼠腦電的電壓、頻率均有大幅度的恢復，接近于正常組波型。

2.3 各組大鼠血清AST、ALT、BA、LPS水平比較見表1。與正常組比較，模型組大鼠血清AST、ALT、BA、LPS水平顯著升高（P均 ＜0.01）；生大黃組大鼠血清 AST、ALT、BA、LPS水平與模型組比較顯著降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；生大黃組大鼠血清BA、LPS水平與乳果糖組比較，差異有統(tǒng)計學意義 （P＜0.05）。

表1 各組大鼠血清 AST、ALT、BA、LPS水平比較 （±s）

表1 各組大鼠血清 AST、ALT、BA、LPS水平比較 （±s）

與正常組比較，△P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05；與乳果糖組比較，▲P＜0.05。

LPS（EU/mL）0.08±0.04 0.92±0.12△0.48±0.06△*▲0.66±0.08△*組 別 n AST（U/L）ALT（U/L）60.45±14.04 1320.86±285.84△生大黃組 13 620.68±156.34△*866.52±132.66△*乳果糖組 12 756.52±168.75△*1051.48±156.24△*正常組 10 41.22±10.56模型組 8 1056.80±235.65△BA（mg/L）1.04±0.45 4.52±1.86△2.15±1.02△*▲3.22±1.25△*

2.4 各組大鼠肝組織病理學觀察正常組肝小葉結構完整，肝板排列整齊，肝細胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列，肝細胞無變性、壞死，匯管區(qū)無炎性細胞浸潤；模型組肝組織呈彌漫性壞死，肝小葉結構破壞，肝細胞溶解，匯管區(qū)及壞死區(qū)可見炎性細胞浸潤；生大黃組和乳果糖組肝小葉結構尚完整，肝板排列欠整齊，肝細胞呈不同程度的腫脹，少部分呈氣球樣變，肝小葉內可見點片狀壞死，匯管區(qū)有炎性細胞浸潤。

3 討 論

目前HE發(fā)病機制尚不十分清楚，多數(shù)認為是多種因素作用的結果，氨中毒學說仍占主導地位。BA來源分體內代謝產氨和腸道內產氨，入血后在肝臟中經鳥氨酸循環(huán)合成尿素，由尿排出。肝臟損害時，不能將進入肝臟的氨都轉變?yōu)槟蛩?，使BA升高［3］，氨進入腦細胞后干擾腦細胞的能量代謝，使NA+-K+-ATP酶活性減低，ATP缺乏，能量供應不足，以致不能維持中樞神經系統(tǒng)地興奮活動，從而引起昏迷。能否降低BA濃度在臨床上是衡量藥物療效和評估患者預后的一個重要指標。LPS是腸道革蘭陰性菌分解代謝的產物，主要在肝臟代謝排泄，肝臟受損時，不能及時代謝排泄LPS，使其在血液中儲積，進一部損害肝臟。本實驗中，所有大鼠血清BA和LPS水平均高于正常組，在經過乳果糖和生大黃的治療后，血清BA和LPS水平下降，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義，生大黃療效優(yōu)于乳果糖。

乳果糖是一種人工合成雙糖，能改變腸內環(huán)境，減少氨的吸收，從而降低BA，還可以增加排便，有利于內毒素的排泄，減少LPS及其他毒性物質，臨床上用于各種肝病的治療，尤其是HE［4］。本實驗以乳果糖作為陽性對照藥物，其有較好的可比性。藥理學證實，生大黃有瀉下作用，通過排便，使腸道有毒廢物盡快排出體外；抑制腸道有毒菌過度生長，調節(jié)正常菌群，減少細菌對腸道尿素分解，產氨減少，防止肝性腦病復發(fā)［5］；促進干擾素產生，促進細胞免疫，清除肝細胞炎癥，改善肝組織的微循環(huán)和供氧作用也有利于肝細胞的生長［6］。臨床治療中發(fā)現(xiàn)大黃有減輕患者腹脹作用，而乳果糖不僅不能減輕腹脹，而且還可以引起腹脹［7］。本研究結果顯示，生大黃可改善大腦誘發(fā)電位異常和肝功能，降低血清BA和LPS水平，對大鼠HE有治療作用，與其瀉下作用，縮短腸道對BA、LPS等有害物質的吸收，促進其排泄有關，同時證實生大黃可以起到預防及減輕HE的作用。

［1］劉赫，梁妍，劉雁勇，等.地黃蘇合香合劑對輕微肝性腦病模型大鼠治療的實驗研究［J］.中國康復理論與實踐，2010，16（10）：904-906.

［2］熊益群，周大橋，李航森，等.實驗性大鼠肝性腦病動物模型的研究［J］.中國實驗動物學雜志，2002，12（6）：340-342.

［3］徐如祥，肖華.現(xiàn)代臨床昏迷學［M］.北京：軍事醫(yī)學科學出版社，2003:311-327.

［4］李瑞軍，楊昭徐.乳果糖對臨床及亞臨床肝性腦病預防作用的實驗研究［J］.胃腸病學，2000，5（4）：214-215.

［5］陳靜，葉柏.大黃灌腸治療肝性腦病30例［J］.南京中醫(yī)藥大學學報，2004，20（3）：180-181.

［6］胡林華，崔錦章，吳繁，等.生大黃的實驗研究及治療肝性昏迷的臨床觀察［J］.江蘇醫(yī)藥，1994，20（6）：304.

［7］王菊玲.大黃煎劑與乳果糖治療肝性腦病療效比較［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2004，13（17）：2302-2303.