王之梅 萬 鵬 黃崇剛 張家繼

1重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院（重慶400700）2重慶市中藥研究院（重慶400065）3重慶市中醫(yī)院（重慶400021）

止嗽退熱合劑主要組成藥為金銀花、連翹和桔梗等，具有廣譜抗菌、抗病毒和解熱止咳作用，對(duì)感染性發(fā)熱的退熱明顯。根據(jù)中醫(yī)學(xué)辨證施治的理論，為充分發(fā)揮藥效成分的作用，利用現(xiàn)代加工方法開發(fā)制備的止咳退熱合劑具有較強(qiáng)的疏散風(fēng)熱、宣肺祛痰止咳作用，適用于風(fēng)溫發(fā)熱表證。本文對(duì)其安全性和止嗽、退熱藥理作用進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 藥物 止嗽退熱合劑（棕黃色液體，生藥含量為5.64g/mL，由北碚區(qū)中醫(yī)院提供，批號(hào)：100412）臨用前用蒸餾水配制后使用。陽性對(duì)照藥：復(fù)方磷酸可待因溶液（香港澳美制藥，批號(hào)：1003301），阿司匹林腸溶片（石家莊康力藥業(yè)有限公司，批號(hào)：090713），臨用前用蒸餾水配成混懸液使用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠，雄性，SPF級(jí)，重慶市中藥研究院動(dòng)物室提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）20070006；昆明種小鼠，雄性，SPF級(jí)，重慶市中藥研究院動(dòng)物室提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）20070006。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在重慶市中藥研究院藥理研究室3級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.3 儀器及試劑 多功能誘咳引喘儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站，型號(hào)：YLS-8A。電子體溫計(jì)，杭州華安醫(yī)療保健用品有限公司，型號(hào)：DT-OIA。氨水，重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20090608；角叉菜膠，Sigma，批號(hào)：116K0105

1.4 氨水誘發(fā)小鼠咳嗽試驗(yàn)[1]將小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只小鼠，即止咳退熱合劑高劑量組（26g/kg）、中劑量組（13g/kg）、低劑量組（6.5g/kg）、磷酸可待因組（6.7mL/kg）和對(duì)照 組（0.5%CMC-Na），給藥體積 10mL/kg。各組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7d。末次給藥后1h將小鼠置于多功能誘咳引喘儀內(nèi)，以28%濃氨水通過誘咳引喘儀進(jìn)行噴霧，觀察小鼠的咳嗽反應(yīng)（以腹肌收縮、張大嘴為咳嗽），記錄從放入小鼠到發(fā)生咳嗽的時(shí)間（即潛伏期）和3min內(nèi)小鼠咳嗽次數(shù)。

1.5 角叉菜膠致大鼠發(fā)熱試驗(yàn)[1]實(shí)驗(yàn)前用體溫表測(cè)大鼠肛溫2次，連續(xù)3d，選取溫度波動(dòng)不超過0.3℃的動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)。將大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只，即止咳退熱合劑高劑量組（26g/kg）、中劑量組（13g/kg）、低劑量組（6.5g/kg）、阿司匹林組（0.025g/kg）、對(duì)照組（0.5%CMC-Na），給藥容積10mL/kg。按上述分組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)5d。末次給藥后5h于大鼠后腳兩爪囊跖皮下各注射1%角叉菜膠混懸液0.1mL/足致熱，注射后分別于0.5、l、1.5h各測(cè)定大鼠肛溫1次。

1.6 止嗽退熱合劑最大給藥量毒性試驗(yàn)[2]根據(jù)預(yù)試結(jié)果，給予6只小鼠（雌雄各半）一次性最大質(zhì)量濃度（5.64g/mL），最大給藥體積（0.4mL/10g，相當(dāng)于成人臨床每日用藥量的347.08倍）的止嗽退熱合劑灌服，無動(dòng)物死亡，不能測(cè)出小鼠LD50，故進(jìn)行最大給藥量測(cè)定。參照文獻(xiàn)[3]要求，采用藥物組與對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照比較。適應(yīng)性飼養(yǎng)后，30只健康小鼠均用于試驗(yàn)。按體質(zhì)量分為止嗽退熱合劑組（20只）、對(duì)照組（10只）。飼養(yǎng)于普通級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，分盒飼養(yǎng)，采取耳標(biāo)進(jìn)行標(biāo)記。小鼠禁食不禁水12h，按最大質(zhì)量濃度（5.64g/mL），最大給藥體積（0.4mL/10g）每日兩次灌服，間隔4h，對(duì)照組給予蒸餾水。記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況，連續(xù)觀察14d。同時(shí)記錄給藥后第1、2、3、7、14日的體質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)小鼠進(jìn)行解剖觀察。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)均以（±s）表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 止嗽退熱合劑對(duì)濃氨水致小鼠咳嗽的影響 見表1。止嗽退熱合劑各劑量組能明顯延長濃氨水所致小鼠咳嗽的潛伏期和減少小鼠咳嗽次數(shù)。

表1 各組小鼠咳嗽潛伏期、咳嗽次數(shù)比較 （±s）

表1 各組小鼠咳嗽潛伏期、咳嗽次數(shù)比較 （±s）

與對(duì)照組比較，*P＜0.05,**P＜0.01。 下同。

組 別 n 潛伏期（s）咳嗽次數(shù)（次）對(duì)照組 10 35.90±5.59** 38.10±7.09**止嗽退熱合劑高劑量組 10 41.50±6.49** 30.80±7.22**止嗽退熱合劑中劑量組 10 45.20±5.51** 24.10±7.03**止嗽退熱合劑低劑量組 10 46.00±6.41** 23.30±7.41**磷酸可待因組 10 50.40±5.91** 19.10±4.46**

2.2 止嗽退熱合劑對(duì)角叉菜膠致發(fā)熱大鼠肛溫的影響 見表2。嗽退熱合劑中、低劑量組在1、1.5h時(shí)間段能明顯抑制角叉菜膠所致的大鼠肛溫升高。

表2 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)肛溫比較 （℃，±s）

表2 各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)肛溫比較 （℃，±s）

組 別 n 0.5h 1h 1.5h對(duì)照組 8 37.96±0.37**37.75±0.40 38.07±0.36**止嗽退熱合劑高劑量組 8 37.80±0.37**止嗽退熱合劑中劑量組 8 37.55±0.45*38.04±0.30**37.560.31**止嗽退熱合劑低劑量組 8 37.36±0.39**37.75±0.41 37.43±0.54 37.58±0.58 37.38±0.56**阿司匹林組 8 37.28±0.33 37.30±0.28**37.27±0.32**

2.3 止嗽退熱合劑最大給藥量毒性試驗(yàn)對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響 小鼠給予止嗽退熱合劑后5min后，動(dòng)物開始出現(xiàn)倦臥、自發(fā)活動(dòng)減少等現(xiàn)象，持續(xù)時(shí)間10～15min不等，15min后基本恢復(fù)正常。止咳退熱合劑組連續(xù)觀察14d無動(dòng)物死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)小鼠進(jìn)行解剖，肉眼觀察臟器無明顯改變；對(duì)小鼠的體質(zhì)量等無明顯影響。提示止嗽退熱合劑對(duì)小鼠毒性較低。見表3。

表3 各組小鼠體質(zhì)量比較 （g，±s）

表3 各組小鼠體質(zhì)量比較 （g，±s）

組 別 n 給藥時(shí)體質(zhì)量給藥后體質(zhì)量增長值第1天 第2天 第3天止嗽退熱合劑組 20 19.97±1.19 3.86±0.69 4.93±0.51 7.65±1.04對(duì)照組 10 20.15±0.96 4.67±0.80 5.26±1.69 7.69±1.60第7天12.78±3.09 12.16±2.35第15天18.32±4.34 17.28±4.63

3 討 論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，止咳退熱合劑對(duì)發(fā)熱、咳嗽有明顯抑制作用，對(duì)動(dòng)物臟器和機(jī)體代謝均無明顯不良影響，毒性實(shí)驗(yàn)中的給藥量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過實(shí)際成人正常用量。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人雖有種屬區(qū)別，可以推斷在臨床上限于常用量是沒有毒性的，可供臨床用藥參數(shù)。止咳退熱合劑主藥金銀花、連翹，具有抗菌譜廣及明顯的抗炎、抗過敏與增強(qiáng)免疫功能等作用[4]，適用于感染性疾病的防治用藥，但其較強(qiáng)的解熱止咳作用原理尚待進(jìn)一步研究，止嗽退熱合劑雖然毒性小、用藥安全性大，但也不宜濫用。

[1]陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：625.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范[S].2003：1.

[3]《中藥、天然藥物急性毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》課題研究組.中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].2005：1.

[4]王浴生.中藥藥理與應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1983：515，703.