齊曉飛，張 伏，張 璐，趙曉冬

婦炎舒丸是由甘草、赤勺、忍冬藤、大血藤、丹參等十一味藥組成的復(fù)方制劑，具有清熱涼血、活血止痛等功效。用于婦女盆腔炎癥等引起的帶下量多、腹痛等癥狀［1］。其中赤勺的主要有效成分為芍藥苷。婦炎舒膠囊劑收載于《國家標(biāo)準(zhǔn)》外科婦科分冊GWF-303，而婦炎舒丸為企業(yè)申報的改劑型的5類新藥。為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證療效，本文參考有關(guān)芍藥苷的含量測定方法［2-3］，建立了婦炎舒丸中芍藥苷的含量測定方法。

1 實驗材料

高效液相色譜儀(島津LC-10AD型高效液相色譜儀，威瑪色譜工作站);芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110736-200628);婦炎舒丸(沈陽綠洲制藥有限公司，批號:060701、060702、060703);乙腈為色譜純;水為純化水;其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:Hypersol C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動相:乙腈-水(20∶80);流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:230 nm;理論板數(shù)按梔子苷峰計算不低于3 000。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，置量瓶中，加稀乙醇制成每1 mL含80 μg的溶液，作為對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品20丸，研細，取1.25 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20 mL，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250 W，頻率30 kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，離心(3 500 r/min)，上清液濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

2.4 陰性對照溶液的制備 取除赤勺以外的全部成分，按處方工藝制成溶液，再按供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液。由圖1可見婦炎舒丸的其他組分對芍藥苷的測定無干擾。

圖1 婦炎舒丸HPLC色譜圖

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取9.88 mg的芍藥苷對照品，置25 mL量瓶中，加稀乙醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0 mL 分置10 mL 量瓶中，加稀乙醇溶液稀釋至刻度。取20 μL注入液相色譜儀中，以對照品進樣量(μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得線性回歸方程:Y=66 380 X-49 491(n=7)，r=0.999 9。結(jié)果表明，芍藥苷在 0.395 2～4.742 4 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 方法學(xué)考察

2.6.1 精密度試驗 取同一供試品溶液(批號:060701)，按含量測定項下操作，重復(fù)進樣6次，芍藥苷峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.44%。

2.6.2 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液(批號:060701)，分別于配置后 0、2、4、8、12、24 h，依法測定。結(jié)果表明，供試品溶液在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定，測定結(jié)果均無顯著變化。

2.6.3 重復(fù)性試驗 精密稱取婦炎舒丸同一批號(批號:060701)樣品6份，按上述方法進行測定，考察方法的重現(xiàn)性，RSD=0.77%，表明該法重現(xiàn)性良好。

2.6.4 回收率試驗 精密稱取已知含量的樣品(批號:060701)1.759 0、1.460 1、1.491 6、1.564 3、1.5213、1.338 5 g共 6份，分別置具塞錐行瓶中，加入芍藥苷對照品溶液(濃度為0.421 2 mg/mL)5 mL，再加入稀乙醇溶液45 mL，按樣品含量測定項下方法操作，測定結(jié)果平均回收率為95.6%，RSD為0.14%。見表1。

表1 回收率測定結(jié)果(mg)

2.7 樣品測定結(jié)果 按照“2.2”、“2.3”項的處理方法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀。測定3批樣品，測定結(jié)果見表2。

表2 樣品測定結(jié)果(mg/丸)

3 討論

3.1 檢測波長的選擇 取芍藥苷對照品及供試品溶液，按上述色譜條件，在SPD-M20A二極管陣列檢測器上(200～400 nm)對芍藥苷峰進行紫外掃描，結(jié)果兩者均在230 nm波長處有最大吸收。

3.2 超聲時間的選擇 稱取本品3份，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，依照“2.3”項樣品溶液的制備方法分別超聲處理20、30、40 min。結(jié)果表明，超聲處理20 min以上，提取液中芍藥苷含量無明顯變化，因此，采用與藥典［4］相同的條件制備供試品溶液。

3.3 空白試驗 按處方藥味的比例，自配不含赤勺的藥群，按其工藝制成空白制劑，在上述色譜條件下測定，結(jié)果空白溶液在與芍藥苷對照品相同保留時間處未出現(xiàn)色譜峰，故認為無干擾，證明本法準(zhǔn)確可靠，方法可行。

［1］ 國家標(biāo)準(zhǔn):外科婦科分冊［S］.GWF-303.

［2］ 陳宗良，吳雪宏，陶玉鋒.HPLC法測定胃舒寧顆粒中芍藥苷的含量［J］.中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2007，8(2):75.

［3］ 楊麗.HPLC法測定千金止帶丸中芍藥苷的含量［J］.中國藥事，2007，21(6):422.

［4］ 中國藥典［S］.一部.2005:173.