江 溱

廣西古方藥業(yè)有限公司，廣西 南寧 530221

咳特靈糖漿其處方為小葉榕干浸膏，馬來(lái)酸氯苯那敏兩味藥組成的復(fù)方制劑。功能為鎮(zhèn)咳，祛痰，平喘，消炎，用于咳喘及慢性支氣管炎。而馬來(lái)酸氯苯那敏為第一代抗組胺藥，可明顯改善鼻塞、流涕等感冒引發(fā)的過(guò)敏癥狀，稍有過(guò)量極易引發(fā)頭暈、嗜睡等嚴(yán)重不良反應(yīng)。為了更好的控制該制劑的質(zhì)量，保證藥品使用安全、有效，本文采用HPLC法測(cè)定了馬來(lái)酸氯苯那敏的含量及含量均勻度。

1 儀器與試藥

LC－10AP型高效液相色譜儀 (日本島津公司);SPD－10Avp紫外－可見(jiàn)檢測(cè)器;LC－10ATVP7725(i)型手動(dòng)進(jìn)樣器;威瑪龍色譜數(shù)據(jù)工作站;Aglient 8456紫外可見(jiàn)分光光度計(jì);kh－250db型超聲處理器 (昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)。

馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品 (購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，供含量測(cè)定用，批號(hào):100047－200305);咳特靈糖漿(購(gòu)自A廠，共3批);乙腈為色譜純;其余試劑為分析純，水為超純水。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱為Kromasil柱C18(4.6×250mm，5μm);流動(dòng)相為乙腈 －水 －磷酸 －三乙胺 (11∶89:0.35:0.35)，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為264nm，進(jìn)樣量為10μl;柱溫為室溫;理論塔板數(shù)按馬來(lái)酸氯苯那敏計(jì)算應(yīng)不低于2500。在上述色譜條件下，供試品中馬來(lái)酸氯苯那敏能完全分離，對(duì)照品與陰性對(duì)照品溶液中沒(méi)有峰重疊，色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取105℃干燥至恒重的馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品適量，加流動(dòng)相稀釋成每1ml中含馬來(lái)酸氯苯那敏40μg的對(duì)照品溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備 精密量取本品10ml，置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相30ml，超聲 (250W，50kHz)處理30分鐘，放冷，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，以上述色譜條件測(cè)定，根據(jù)馬來(lái)酸氯苯那敏峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算供試品中馬來(lái)酸氯苯那敏含量。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱定馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品約10.0mg，置100ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成100.0μg/ml對(duì)照品溶液，備用。分別精密吸取上述對(duì)照品溶液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml，分別置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，進(jìn)樣測(cè)定。以對(duì)照品進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)(X)，峰面積積分值為縱坐標(biāo) (Y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為:Y=5973.6X－3462.8，相關(guān)系數(shù)r=0.9992。結(jié)果表明:馬來(lái)酸氯苯那敏進(jìn)樣濃度在20.0～70.0μg/ml范圍內(nèi)，進(jìn)樣濃度與馬來(lái)酸氯苯那敏峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 分別精密吸取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液 (40.0μg/ml)和供試品溶液 (批號(hào)20091201)各10μl，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣5次，依次測(cè)定峰面積值，記錄色譜圖，測(cè)定馬來(lái)酸氯苯那敏峰面積，其 RSD為0.78%，表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液 (批號(hào)20091201)，每隔4小時(shí)分別進(jìn)樣10μl，測(cè)定峰面積值，其峰面積RSD為1.11%，表明供試品溶液在20小時(shí)內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)供試品 (批號(hào)20091201)共5份，每份10ml，精密量取，按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法進(jìn)行提取，測(cè)定，結(jié)果測(cè)得平均值 (相當(dāng)于標(biāo)示量)=98.0%，RSD%=0.27，表明重復(fù)性良好。

2.9 陰性對(duì)照試驗(yàn) 按處方比例制成缺馬來(lái)酸氯苯那敏的陰性樣品，按上述供試品制備方法制成缺馬來(lái)酸氯苯那敏陰性溶液。然后上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果在馬來(lái)酸氯苯那敏出峰位置無(wú)其它干擾峰，表明處方中其它成分對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。

2.10 加樣回收率試驗(yàn) 加樣回收試驗(yàn):取已測(cè)知含量的供試品 (批號(hào)20091201，含量:0.2058mg/ml)5份，每份約5.0ml，精密稱定，置50ml容量瓶中，精密加入400μg/ml馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品溶液 (精密稱取馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品10.0mg，置于25ml量瓶中，加流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度，即得)2.5ml，再加入流動(dòng)相30ml，按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法進(jìn)行提取并按上述色譜條件依法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)

2.11 樣品中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量測(cè)定 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液3批，按上述色譜條件測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.12 樣品中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量均勻度測(cè)定:取樣品3批，按供試品溶液制備方法提取，以上述色譜條件依法測(cè)定馬來(lái)酸氯苯那敏含量均勻度，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品含量及含量均勻度測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 流動(dòng)相的選擇 流動(dòng)相組成及配比選擇:參考文獻(xiàn)［1］［2］，曾試用甲醇－水溶液和乙腈－0.4%磷酸溶液的不同配比，摸索液相色譜的最佳測(cè)定條件，試驗(yàn)結(jié)果表明，選用乙腈－水－磷酸－三乙胺 (11∶89:0.35:0.35)，馬來(lái)酸氯苯那敏出峰時(shí)間適宜，與其它共存成分分離度大于1.5，達(dá)到基線分離，峰型和分離度較好。

3.2 波長(zhǎng)的選擇 文獻(xiàn)［3］采用219nm作為檢測(cè)波長(zhǎng);文獻(xiàn)［4］(HPLC法測(cè)定維C銀翹膠囊中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量)采用262nm作為檢測(cè)波長(zhǎng);依據(jù)《中國(guó)藥典》2005年版二部，馬來(lái)酸氯苯那敏片項(xiàng)下知本品在264nm出有最大吸收波長(zhǎng);故選擇264nm作為本品的檢驗(yàn)波長(zhǎng)。

［1］郭丙炎，王嵐，等.酸性染料比色法測(cè)定復(fù)方巖白菜素片中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2000，20(12):725－726.

［2］郭炎榮，蒙太平.復(fù)方巖白菜秦片中兩種主要成分的含量測(cè)定［J］.中國(guó)藥業(yè)，2002，11(8):38.

［3］馮向東，高光偉，黃海辛.HPLC法測(cè)定感寧膠囊中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量及含量均勻度［J］.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2009，10(1):59－61.

［4］羅遠(yuǎn)秀.HPLC法測(cè)定維C銀翹膠囊中馬來(lái)酸氯苯那敏的含量［J］.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，12(2):60－62.