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        新疆維吾爾醫(yī)藥材黃花柳葉中總黃酮含量的測定

        2011-08-28 02:26:10古麗克孜阿日甫李暮春古力娜孜熱西提
        中國民族民間醫(yī)藥 2011年18期
        關(guān)鍵詞:黃酮新疆

        古麗克孜·阿日甫 李暮春 古力娜孜·熱西提

        新疆維吾爾自治區(qū)分析測試研究院,新疆 烏魯木齊 830011

        黃花柳 (Salix caprea L)為楊柳科柳屬植物 Salicaceae salix L。主要分布于我國新疆。長期以來在新疆維吾爾醫(yī)學(xué)中就作為藥物使用,主要用于治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病,高血壓,抗菌、抗病毒、解熱、消炎、止痛、消腫、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、黃疸性肝炎等[1]。有關(guān)柳屬植物的化學(xué)成分研究,國內(nèi)外已有些報道,但就新疆黃花柳葉藥材而言,其總黃酮含量的研究尚未見報道。為了初步了解新疆維吾爾醫(yī)藥材黃花柳葉的藥效與總黃酮含量的關(guān)系,本研究參照乙醇回流提取法,對采自新疆和田地區(qū)的藥用黃花柳葉中總黃酮的最佳提取條件進行了研究,在最佳提取條件下,對黃花柳葉總黃酮含量進行了測定。其黃花柳葉中總黃酮含量為4.17%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.41%,最佳提取條件適合該藥材的提取。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        黃花柳葉采自新疆和田維吾爾醫(yī)醫(yī)院的栽培基地,由和田維吾爾醫(yī)院主任醫(yī)師巴克阿力木鑒定,采后自然陰干,粉粹使用。

        1.2 儀器設(shè)備

        HP-8452A型紫外可見見光光度計 (美國惠譜),電子天平 (北京賽多利天平有限公司),微型植物試樣粉碎機(河北省黃華市新興電器長),電熱恒溫水浴鍋 (京泰克儀器有限公司)。

        1.3 試劑

        蘆丁 (中國藥品物制品檢定所),乙醇,亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,均為分析純。

        2 實驗方法

        2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

        準(zhǔn)確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)試劑20.7 mg用50%的乙醇溶解,并完全移入100mL容量瓶中,用50%的乙醇稀釋至刻度,得到濃度為0.207 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        2.2 最大吸收波長的選擇

        取上述蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液2.5 mL于25ml具塞試管中,用50%的乙醇至10 mL,加入5%NaNO20.6mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)30.6mL,搖勻,放置6min后加入4%的 NaOH 4mL,搖勻,再用50%的乙醇定容至刻度,均勻,放置15min。以相應(yīng)的溶液為空白,照分光光度法在430~700nm波長范圍內(nèi)掃描吸收度。由曲線可知,波長在503nm處為最大吸收。

        2.3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

        分別取上述蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3,3.5mL于25mL具塞試管中,用50%的乙醇至10mL,加入5%NaNO20.6mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)30.6mL,搖勻,放置6min后加入4%的NaOH 4mL,搖勻,再用50%的乙醇定容至刻度,均勻,放置15min。以相應(yīng)的溶液為空白,照分光光度法在503 nm處測定吸光度。以蘆丁濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線良好線性關(guān)系 (r=0.9974)。見圖1。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 乙醇濃度對提取的影響

        精確稱取5份 (4.00g)柳樹葉,分別加入體積分?jǐn)?shù)為50%,60%,70%,80%,90%乙醇各為120mL,在60℃水浴中回流3小時,趁熱過濾,冷卻后,轉(zhuǎn)移到250mL的容量瓶中稀釋至刻度,取各1mL至25mL具塞試管補充10mL各自的溶劑后分別加入5%NaNO20.6mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)30.6mL搖勻,放置6min后加入4%的NaOH 4mL,搖勻,再用各自的溶劑定容至刻度,均勻,放置15min后在503 nm波長處分別測定吸光度。吸光度 (A) 為 0.1014,0.0080,0.0322,0.0114,0.0035。從實驗中可以看出:50%乙醇的吸光值最大,所以乙醇濃度確定在50%。

        3.2 回流時間對提取的影響

        精確稱取5份 (4.00g)柳樹葉,加50%120mL的乙醇,在60℃水浴中回流1,1.5,2.0,2.5,3小時,趁熱過濾,冷卻后,按照3.1的方法分別測定吸光度。吸光度(A) 為:0.1101,0.1037,0.0838,0.0804,0.0771。實驗結(jié)果表明:當(dāng)回流時間為1 h時,提取效果最好。而當(dāng)時間繼續(xù)延長時,總黃酮含量反而降低,這可能是回流時間太長,有部分乙醇被揮發(fā)而導(dǎo)致沸點逐漸增大,從而破壞某些黃酮類化合物。

        3.3 回流溫度對提取的影響

        精確稱取5份 (4.00g)柳樹葉,加50%乙醇120ml分別在20℃,30℃,50℃,70℃,80℃水浴中回流1小時趁熱過濾,冷卻及在室溫下放1個小時過濾后,按照3.1的方法進行測定,吸光度 (A)為:0.0477,0.0871,0.1221,0.1757,0.1674。結(jié)果可見,70℃的黃酮提取率高。

        3.4 料液比對提取的影響

        精確稱取4份 (4.00g)柳樹葉,加50%乙醇80 mL,120mL,160mL,200mL,料液比分別為1:20,1:30,1:40,1:50在70℃水浴中回流1小時,趁熱過濾,冷卻后,按照3.1的方法進行測定,吸光度 (A)為:0.1025,0.1345,0.1105,0.0969。結(jié)果表明,料液比在1∶30時的值最大值,因此選擇料液比1∶30為考慮對象。

        3.5 黃花柳葉中總黃酮的測定結(jié)果

        精確稱取5份 (4.00g)柳樹葉,加50%乙醇120mL料液比分別為1:30在70℃水浴中回流1小時,趁熱過濾,冷卻后,按照3.1的方法進行測定,結(jié)果見表1。

        表1 黃花柳葉中總黃酮的測定結(jié)果 (n=5)

        4 結(jié)論

        試驗結(jié)果表明:影響黃酮類物質(zhì)提取量的因素主次順序為:提取溫度>乙醇濃度>回流時間>料液比。確定了黃花柳葉中總黃酮的最佳條件為:乙醇濃度為50%,回流時間為1小時,料液比1:30,回流溫度為70℃。在最佳條件下的總黃酮得率4.17%。結(jié)果表明:新疆黃花柳葉中總黃酮的含量較高,達到4.17%,這說明黃花柳葉之所以有抗心臟病,高血壓,抗菌消炎、解熱、止痛、消腫、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、黃疸性肝炎等作用與其中所含的黃酮類化合物具有密切關(guān)系。下一步將進一步考察黃花柳葉藥材的藥理活性,為開發(fā)新疆黃花柳葉的藥用價值提供科學(xué)依據(jù)。

        [1]古麗克孜·阿日甫,李慕春,楊飛.新疆維吾爾醫(yī)藥藥材黃花柳葉中鞣質(zhì)含量的測定[J].中國民族民間醫(yī)藥,2009,10(18):39-40.

        [2]孫慧麗,艾來提·蘇里坦,買吾蘭·買提努爾等.黃花柳花中總黃酮含量的研究[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,45(1):84-87.

        [3]古麗克孜·阿日甫,阿依古麗·塔西.新疆維吾爾藥材黃花柳中無機元素的測定[J].藥物分析雜志,2008,28(11):1880-1882.

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