昌志紅,鄧小玉 (仙桃市彭場(chǎng)衛(wèi)生院,湖北仙桃43301 8)

前列通片由黃柏等10味中藥組成,是我院仿制制劑之一。其制法規(guī)定:黃柏與其它6味藥用水提取兩次。而黃柏與其它藥味煎煮可能導(dǎo)致鹽酸小檗堿在提取物中的含量顯著降低[1]。為了盡量降低前列通片制備過(guò)程中藥物之間相互作用對(duì)成品有效成分的影響,我們進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

LD-6A高效液相色譜儀;SPD-10B檢測(cè)器;LC-2002色譜工作站;TDL-40B型臺(tái)式離心機(jī),721紫外分光光度計(jì)。

1.2 藥品

廣東王不留、黃芪、車前子、關(guān)黃柏、兩頭尖 、蒲公英、澤蘭經(jīng)本市藥品檢驗(yàn)所鑒定為藥典收載品種,鹽酸小檗堿 (713-9961)、蘆丁 (0085-9705)延胡索乙素 (0087-9630)對(duì)照品購(gòu)自湖北省藥品檢驗(yàn)所。

2 方法與結(jié)果

2.1 工藝設(shè)計(jì)

黃柏單獨(dú)用水煎提,土茯苓、丹參、川楝子、苦參、赤芍、三棱、當(dāng)歸、香附、芡實(shí)等9味藥合并用水煎煮提取。

2.2 黃柏的提取

2.2.1 提取條件選擇 選用L9(34)正交設(shè)計(jì)表,以鹽酸小檗堿的含量為指標(biāo),考察加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)對(duì)提取工藝的影響。因素水平見(jiàn)表1,正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。由表2、表3可知:黃柏提取過(guò)程中A、C因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著影響,B因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較小,故優(yōu)化提取方案選擇A3B2C3。即提取水量為凈藥材的10倍,水提3次,每次2h。

表1 黃柏提取方法因素水平

表2 黃柏提取方法正交試驗(yàn)

2.2.2 含量測(cè)定 取黃柏9份,每份100g,按表2所示方案提取,將以上各樣品提取液過(guò)濾,并濃縮至50ml,按藥典方法測(cè)定鹽酸小檗堿含量[2]。

2.3 黃芪等6味中藥提取方案試驗(yàn)

2.3.1 提取條件 選用L9(34)正交設(shè)計(jì)表,以總黃酮的含量為指標(biāo),考察 A、B、C因素對(duì)提取工藝的影響。因素水平表見(jiàn)表4,試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5,分析結(jié)果見(jiàn)表6。由表5、表6可知:黃芪等6味藥水提過(guò)程中提取次數(shù)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有顯著影響,A和C因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響較小,優(yōu)化提取方案選應(yīng)A2B2C3。即提取條件為:提取水量為凈藥材量的8倍,水提3次,每次2h。

表3 黃柏提取方法方差分析

表4 黃芪等提取方法因素水平

表5 黃芪等取方法正交試驗(yàn)

2.3.2 含量測(cè)定 取王不留40g、黃芪46g、車前子26g、兩頭尖34g、蒲公英33g、澤蘭33g按正交設(shè)計(jì)條件用水提取,過(guò)濾,濃縮至500ml備用。

1)樣品溶液制備。精密量取各試驗(yàn)號(hào)的水提液25ml除去水份,以30%乙醇溶解,移至10ml容量瓶中,再加30%乙醇至5ml,各加入10%NaNO20.3ml溶液,混合均勻,取2ml加入10%Al(NO2)30.3ml搖勻,放15min,加入4%NaOH溶液,混合均勻,然后用30%乙醇稀釋至規(guī)定量。

表6 黃芪等提取方法方差分析

2)準(zhǔn)曲線繪制。按文獻(xiàn)方法測(cè)定蘆丁含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線[3],得回歸方程A=0.0126C+0.0057,r=0.9996。線性范圍 10.0～80.0μ g/ml。

3)含量測(cè)定。精密吸取50μ l以上樣品溶液,移至10ml容量瓶中,加30%乙醇溶液稀釋至規(guī)定量,混勻,依法測(cè)定,計(jì)算即得。

3 結(jié) 論

實(shí)驗(yàn)表明,前列通片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的水提取工藝應(yīng)改為:黃柏加水量為原藥材量的10倍,以水提取3次,每次2h。其余藥材水提用水量為凈藥材量的10倍,水提3次,每次2h。提取方法變更后可明顯提高前列通片中有效成份的含量,方法較為簡(jiǎn)單。

[1]郭東艷,陳娟.黃柏中鹽酸小檗堿在不同復(fù)方中的提取率 [J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(6):1054-1055.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典 (一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:94,214.

[3]喻雄華,王天明,曾愛(ài)兵.婦炎康片提取工藝的研究 [J].湖南中醫(yī)雜志,2010,26(2):115.