李瑞機 嚴達尊 田一娟

200例類風濕關(guān)節(jié)炎患者異型淋巴細胞分析

李瑞機 嚴達尊 田一娟

目的 探討類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者異型淋巴細胞水平的變化。方法 檢測200例RA患者和55例健康人對照組的異型淋巴細胞。結(jié)果 類風濕組和對照組異型淋巴細胞比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），重度類風濕組異型淋巴細胞數(shù)顯著高于對照組（P＜0.05）。結(jié)論 RA患者異型淋巴細胞水平與發(fā)病程度有關(guān)，重度RA時異型淋巴細胞數(shù)升高，輕度RA及健康人異型淋巴細胞數(shù)正常。

類風濕關(guān)節(jié)炎；異型淋巴細胞

類風濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種典型的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，臨床表現(xiàn)為對稱性的外周小關(guān)節(jié)受累，同時伴有多種關(guān)節(jié)外癥狀。RA患者自身免疫功能紊亂。研究顯示，RA患者外周血淋巴細胞中EB病毒的負載量高于健康人，而血清中EB病毒抗體的水平也較健康人為高［1］。EB病毒的負載量與異型淋巴細胞水平有一定的相關(guān)性。平時觀察血片時，RA患者異型淋巴細胞水平常有增高。為了解類RA患者異型淋巴細胞水平變化情況，本文對200例RA患者異型淋巴細胞的檢測結(jié)果進行回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 對象

200例RA患者是在我院風濕科確診的患者，男108例，女92例。對照組為征兵體檢者，男40例，女15例。

1.2 方法

1.2.1 標本和收集 所有檢查者采集靜脈血，然后制成血片。

1.2.2 檢測方法 血片用瑞姬氏染料染色，檢驗科血細胞形態(tài)學負責人檢測異型淋巴細胞。

1.2.3 統(tǒng)計學方法 采用t檢驗及x2檢驗。

2 結(jié)果

RA患者組異型淋巴細胞（4.0±1.0）mmol/L，對照組異型淋巴細胞（1.0±0.5）mmol/L，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（t=1.666，P＞0.05）。重度RA患者異型淋巴細胞水平（6.0±1.0）mmol/L，對照組（1.0±0.5）mmol/L，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（t=1.690，P=0.001）。輕度RA患者異型淋巴細胞水平（3.0±1.0）mmol/L，對照組異型淋巴細胞水平（1.0±0.5）mmol/L，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（t=2.323，P＞0.005）。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，重度類風濕組異型淋巴細胞水平明顯高于對照組（t=2.690，P＜0.05）。輕度類風濕組異型淋巴細胞水平與對照組比較無明顯差異（t=2.323，P＞0.05）。200例RA患者中異型淋巴細胞49例，發(fā)生率為24.5%；高異型淋巴細胞9例，發(fā)生率為4.5%。輕度類風濕組異型淋巴細胞異常29例，發(fā)生率為20.7%；重度類風濕組異型淋巴細胞異常20例，發(fā)生率為33.3%，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（x2=0.048，P＞0.05）。異型淋巴細胞（異淋）也稱不典型淋巴細胞，淋巴細胞經(jīng)抗原(多數(shù)為病毒）或致絲裂原刺激后，DNA大量復制，并相繼合成大量RNA，向幼稚細胞或漿細胞方向轉(zhuǎn)化。這種處于轉(zhuǎn)化過程中，具有一些新的形態(tài)學特點的細胞，稱為異型淋巴細胞。其特點是體積變大、核大，染色質(zhì)變得疏松，甚至會出現(xiàn)模糊的核仁或核分裂現(xiàn)象。胞質(zhì)變化更為顯著，不僅量變多，而且常變成深藍色，有時有泡沫感，形似漿細胞。異型淋巴細胞多見于病毒感染（如EB病毒、肝炎病毒、巨細胞病毒）的外周血中，其中以傳染性單核細胞增多癥、流行性出血熱、病毒性肝炎、流感、帶狀皰疹、流行性腮腺炎、風疹等較多見。

天津中醫(yī)學院應(yīng)森林等觀察了30例RA患者的骨髓及外周血細胞的形態(tài)學改變，結(jié)果發(fā)現(xiàn)RA患者的骨髓增生活躍或明顯活躍，紅系統(tǒng)以中晚幼紅增生為主：粒系統(tǒng)以中晚幼粒增多為主，核漿發(fā)育不同步：巨核系統(tǒng)以幼稚巨核細胞增生為主：三系血細胞漿和胞核有大小不一的空泡形成等退行病變：非造血細胞增多：外周血可見有擬紅、粒細胞、有異形紅、白血細胞及血小板，紅細胞呈一線狀。骨髓內(nèi)各階段幼稚紅細胞有部分在釋入血循環(huán)之前已在骨髓內(nèi)破壞，而骨髓血細胞呈代償性增生活躍。武漢華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院楊楊等[2]探討幼年類風濕關(guān)節(jié)炎(JRA)活動期血清對樹突狀細胞(Dc)細胞周期、凋亡及脾淋巴細胞增殖的影響，以便進一步探討Dc在JRA發(fā)病機制中的作用。分離來源于正常小鼠的骨髓細胞，體外用細胞因子(IL-4，GM-CSF)誘導、分化為Dc，脂多糖(LPs)刺激獲取成熟Dc：常規(guī)法獲取同種異體脾淋巴細胞。光鏡觀察(BC)形態(tài)改變、流式細胞術(shù)對其進行鑒定。利用流式細胞儀分析JRA活動期血清輔助Dc成熟過程對Dc細胞周期、凋亡產(chǎn)生的影響MTT法檢測其對淋巴細胞增殖的影響。結(jié)果顯示：JRA活動期血清能促進Dc和淋巴細胞增殖，同時可能抑制Dc凋亡。RA是一種系統(tǒng)性自身免疫性疾病，患者長期免疫功能紊亂，產(chǎn)生自身抗體，引起身體指標的變化，包括淋巴細胞出現(xiàn)異型性。調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）是維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，直接制約自身免疫病的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸，并參與調(diào)控移植、腫瘤和過敏等重大疾病。T細胞（Treg）主要分成兩類：一是自然調(diào)節(jié)性T細胞，以CD4+、CD25+Treg為代表，轉(zhuǎn)錄因子Foxp3陽性是該類細胞的特征性標記。二是適應(yīng)性調(diào)節(jié)T細胞，由病原體和抗原激發(fā)，其代表為CD4+1型調(diào)節(jié)性T細胞（Tr1）、CD4+Th3和CD8+Treg。調(diào)節(jié)性T細胞數(shù)量減少或者功能異常直接引發(fā)自身免疫病。細胞表面三聚體Fas分子一旦和配體FasL結(jié)合，通過死亡信號轉(zhuǎn)導，可引起細胞一系列特征性變化，包括DNA片段化、染色質(zhì)濃縮、胞膜泡化、細胞皺縮和調(diào)亡。EBV、CVB、CMV、AdV和MP感染均可引起外周血異淋升高，其中以EBV最為明顯；一旦外周血中出現(xiàn)大量異淋，則提示機體內(nèi)存在免疫功能紊亂[2]。對于不斷受到自身抗原刺激的淋巴細胞克隆，反饋調(diào)節(jié)無效意味著細胞增殖失控，成為一群日益增多的病理性自身反應(yīng)性淋巴細胞。此群病理性淋巴細胞即為異型淋巴細胞。EB病毒是一種分布非常廣泛的皰疹病毒，其宿主局限于人類和某些靈長類的B淋巴細胞以及鼻咽細胞，在鼻咽部復制以后，病毒便傳染到B淋巴細胞，并使之誘導分泌免疫球蛋白。被EB病毒轉(zhuǎn)變的B淋巴細胞，是一種多面反應(yīng)的靶細胞。體液免疫反應(yīng)（異嗜性抗體的產(chǎn)生）是EB病毒感染后的原發(fā)反應(yīng)。細胞免疫反應(yīng)部分是由于CD8標記的T淋巴細胞被誘導激活，是由于原發(fā)性EB病毒感染而引起的非典型性淋巴細胞增多。因此，細胞介導的免疫反應(yīng)在防止原發(fā)感染時被EB病毒轉(zhuǎn)變的B淋巴細胞繼續(xù)增殖，以及扭轉(zhuǎn)EB病毒的多株B細胞激活反應(yīng)中發(fā)揮了重要的作用。在大多數(shù)患者中可見輕度的白細胞增多，通常伴有形態(tài)學上處于不同時期的反應(yīng)性淋巴細胞相對或絕對數(shù)的顯著增多。

［1］ 陳順樂，鄒和建.風濕內(nèi)科學[M].6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009，113-114.

［2］ 楊楊，王宏偉，許華，等.成熟DCs固有膽堿能系統(tǒng)及其調(diào)控[J].中國病理生理雜志，2007，23（3）：428-434.

10.3969/j.issn.1009-4393.2011.19.035

528415 陳星海醫(yī)院檢驗科 （李瑞機 嚴達尊 田一娟）