王 琳 任美書 王鴻博 張 蘊(yùn)

幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）感染是引起慢性活動(dòng)性胃炎、消化性潰瘍及消化道腫瘤等在內(nèi)的一系列胃腸道疾病的重要病因[1]。Hp感染引起胃黏膜中環(huán)氧化酶（COX）-2蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)，而COX-2被認(rèn)為是一種炎癥酶，在炎癥組織中高表達(dá)[2]。本研究旨在檢測根除Hp前后胃竇黏膜中COX-2表達(dá)水平的變化，探討COX-2的表達(dá)與炎癥程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選 取2007年7月—2009年3月于我院經(jīng)胃鏡和病理診斷為慢性胃炎的患者15例，男10例，女5例，年齡55~75歲，平均（65.0±6.5）歲?；颊呖焖倌蛩孛冈囼?yàn)和14C尿素呼氣試驗(yàn)均陽性；均未服用過非甾體類抗炎藥及糖皮質(zhì)激素；均同意接受此項(xiàng)研究并簽署知情同意書。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 在 根除Hp前、后應(yīng)用Olympus GIF-H 260電子胃鏡取胃竇黏膜3塊，置入液氮中于-80℃冰箱保存。根除Hp治療方案為奧美拉唑（阿斯利康公司）20 mg+克拉霉素（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司）500 mg+甲硝唑（常州四藥制藥有限公司）400 mg治療，2次/d，療程1周。COX-2檢測使用親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物技術(shù)（ABC法），COX-2多克隆抗體ABC試劑購自北京中山生物有限公司。用已知陽性大腸癌切片作為陽性對照。由同一位病理醫(yī)生對結(jié)果進(jìn)行判斷。

1.3 評判標(biāo)準(zhǔn) 細(xì) 胞核呈藍(lán)色者為陰性，細(xì)胞漿內(nèi)或核膜上呈棕黃色者為陽性，陽性率為陽性細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)的比例，以隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野為準(zhǔn)，每個(gè)視野觀察100個(gè)細(xì)胞，取其平均值，陽性率<10%表示Hp感染陰性。按照悉尼標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)評分[3]，固有層出現(xiàn)淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞為慢性炎癥，按炎性細(xì)胞數(shù)量的多少顯示炎癥程度，可分為0~3分：0分為無炎性細(xì)胞浸潤；1分為少量炎性細(xì)胞浸潤；2分為中等量炎性細(xì)胞浸潤；3分為大量炎性細(xì)胞浸潤。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采 用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，根除Hp前后COX-2陽性表達(dá)率的比較采用配對t檢驗(yàn)，以P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

所有Hp感染的胃竇黏膜中均可見COX-2的特異性染色，為壁細(xì)胞和表層上皮細(xì)胞胞漿著色。固有層漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞亦有COX-2的陽性著色。根除Hp的胃竇黏膜及其上皮細(xì)胞亦可檢測到COX-2的表達(dá)。8例慢性炎癥評分為3分的患者治療后有4例降至2分，4例降至1分；7例慢性炎癥評分為2分的患者治療后有6例降至1分，1例基本未變。治療后COX-2的陽性染色率在組織學(xué)評分3分者（11.88±3.98）%與2分者（7.86±2.91）%均較治療前（50.38±8.02）%和（40.71±5.94）%顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為12.167和13.148，均P<0.01）。

3 討論

COX是前列腺素合成過程中的限速酶，可催化花生四烯酸合成前列腺素，有COX-1和COX-2 2種異構(gòu)體，前者存在于大多數(shù)正常組織中，對黏膜-碳酸氫鹽屏障起正向調(diào)節(jié)作用,并增加黏膜血流量，促進(jìn)黏膜修復(fù)[4]。COX-2被認(rèn)為是一種炎癥酶，當(dāng)組織受損傷時(shí)表達(dá)增高[2]。有研究認(rèn)為Hp感染與慢性胃炎、消化性潰瘍及胃癌有著密切關(guān)系［1］。

本研究結(jié)果顯示，Hp感染的胃竇上皮細(xì)胞和相應(yīng)的壁細(xì)胞中均可檢測到COX-2的陽性表達(dá)，考慮原因可能為Hp菌體及其所含的脂多糖類物質(zhì)具有內(nèi)毒素活性，其不僅促進(jìn)炎性細(xì)胞的浸潤，而且使各種炎性細(xì)胞產(chǎn)生大量的炎性因子。有研究認(rèn)為這些炎性因子均可誘發(fā)上皮細(xì)胞高度表達(dá)COX-2，使前列腺素合成增加，加重胃黏膜的炎癥反應(yīng)，最終影響?zhàn)つは袤w的結(jié)構(gòu)和功能，破壞黏膜屏障[5]。Hp根除后胃黏膜COX-2的表達(dá)明顯減少，表明Hp感染可誘導(dǎo)COX-2的表達(dá)，但其并未完全消失，考慮原因可能是根除Hp后炎癥還要持續(xù)一段時(shí)間，提示COX-2的高表達(dá)是Hp所致的慢性胃炎和潛在致癌的可能機(jī)制之一，這與McCarthy等[6]研究結(jié)果相近。

綜上所述，Hp感染可能是慢性胃炎的主要病因，COX-2的高表達(dá)是Hp相關(guān)性胃炎發(fā)生的重要機(jī)制，根除Hp可使胃黏膜活動(dòng)性炎癥消失，慢性炎癥程度減輕，可以明顯減緩癌前病變的進(jìn)展，并有可能減少胃癌發(fā)生的危險(xiǎn)。

[1]Forones NM,Kawamura KY,Segreto HR,et al.Expression of COX-2 in stomach carcinogenesis[J].Gastrointest Cancer,2008,39(1-4):4-10.

[2]Jang SH,Lim JW,Kim H.Beta-carotene inhibitsHelicobacter pylori-induced expression of inducible nitric oxide synthase and cyclo oxygenase-2 in human gastric epithelial AGS cells[J].Physiol Pharmacol,2009,60(7):131-137.

[3]Dixon MF,Genla RM,Yardlry JH,et al.Classification ang grading of gastritis[C].The updated Sydney system international wordshop on the Histopathology of Gastritis.Houston:Am J Sung Pathol,1996.

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