李 雅， 齊香君， 龔 頻， 劉瑞穎， 李衛(wèi)平

(陜西科技大學生命科學與工程學院， 陜西 西安 710021)

0 前 言

黃芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)是一種常用的中藥，具有抗菌消炎、清熱燥濕、瀉火解毒、止血安胎等功效，近年來由于黃芩藥物的大量開發(fā)，其資源日漸短缺.黃芩毛狀根是以黃芩莖段為外植體，由發(fā)根農(nóng)桿菌(Agrobacteriumrhizogenes)形成的毛發(fā)狀組織[1].本課題組研究了黃芩毛狀根在抗炎、解熱及鎮(zhèn)痛方面的活性，并與藥材黃芩(陜西)進行了比較.

1 材料與儀器

1.1 動物

小鼠，體重18～22 g，由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供.

1.2 藥品與試劑

黃芩毛狀根總黃酮(SHRF)與黃芩總黃酮(SF)，由陜西科技大學藥學系提供；松節(jié)油，天津市東力區(qū)天大化學試劑廠；二甲苯，國藥集團化學試劑有限公司；地塞米松磷酸鈉注射液(Dex，天津藥業(yè)焦作有限公司)；阿司匹林(Asp，陜西省華陰市錦前程藥業(yè)有限公司)；活性干酵母，安琪酵母股份有限公司.

1.3 儀器

DPX-9282B-1電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海?，攲嶒炘O備有限公司；TE612-L電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司.

2 研究方法

2.1 黃芩毛狀根的抗炎作用

取小鼠40只，雌雄各半，隨機均分4組，即對照組、陽性對照組(Dex 0.5 mg·kg-1)、SHRF(6.0 mg·kg-1)、SF(6.0 mg·kg-1)，劑量由預試驗模型確定.灌胃30 min后，在小鼠右耳均勻涂抹100%二甲苯0.05 mL，左耳作對照，4 min后處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用6.0 mm直徑打孔器等面積切雙耳同部位，稱取質(zhì)量，以兩耳質(zhì)量差值判定炎癥腫脹度[2-5].

2.2 黃芩毛狀根解熱作用

取小鼠40只(體溫變化不超過0.3 ℃)，雌雄各半，隨機分為4組，即對照組、陽性對照組(Asp 7.0 mg·kg-1)、SHRF(6.2 mg·kg-1)以及SF(6.2 mg·kg-1)，劑量由預試驗模型確定.每只小鼠皮下注射10.0%酵母懸液(0.5%甲基纖維素配制)7.0 mL·kg-1，致熱6 h后每鼠腹腔注射藥物，藥后每隔l h測溫[4,5].

2.3 黃芩毛狀根的鎮(zhèn)痛作用

取小鼠40只，雌雄各半，隨機分為4組，即對照組、陽性對照組(Asp 100.0 mg·kg-1)、SHRF(65.0 mg·kg-1)、SF(65.0 mg·kg-1)，劑量由預試驗模型確定.皮下給藥30 min后，每鼠腹腔注射0.1 mol·L-1醋酸0.4 mL，觀察15 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，計算疼痛抑制率[5].

表1 對二甲苯所致小鼠耳腫脹的作用

注：與對照組比較，*P<0.05.

3 實驗結果

3.1 黃芩毛狀根的抗炎作用

6.0 mg·kg-1黃芩毛狀根總黃酮能夠減弱二甲苯所致的炎癥，腫脹抑制率為44.4%，抗炎作用稍弱于黃芩總黃酮，見表1.

3.2 黃芩毛狀根的解熱作用

黃芩毛狀根總黃酮解熱效果顯著，6.2 mg·kg-1黃芩毛狀根總黃酮60 min小鼠體溫恢復正常，同劑量黃芩總黃酮有相同的解熱效果，見表2.

表2 黃芩毛狀根總黃酮的解熱作用

注：與對照組比較，*P<0.05.

表3 黃芩毛狀根總黃酮的鎮(zhèn)痛作用(n=10)

注：與對照組比較，*P<0.05.

3.3 黃芩毛狀根的鎮(zhèn)痛作用

65.0 mg·kg-1黃芩毛狀根總黃酮能夠明顯減少小鼠扭體次數(shù)，疼痛抑制率為61.2%，鎮(zhèn)痛作用稍弱于黃芩總黃酮，見表3.

4 結束語

本研究表明，整合了發(fā)根農(nóng)桿菌rol B基因的黃芩毛狀根在抗炎、解熱及鎮(zhèn)痛方面療效顯著，與同劑量的黃芩藥材有相同的藥用價值.本課題組研究的黃芩毛狀根生長迅速，黃酮類化學成分與黃芩藥材基本相同[6]，特別是黃芩苷的含量高于普通黃芩藥材數(shù)倍[7]，而且不受自然條件影響、不占用土地、無農(nóng)藥殘留、產(chǎn)品質(zhì)量可控.黃芩毛狀根具有的黃酮合成能力及藥理活性，為日后黃芩毛狀根研究和開發(fā)、解決黃芩苷來源短缺問題提供了新的途徑.但是黃芩毛狀根屬轉基因品種，其安全性還有待于進一步的藥理研究.

參考文獻

[1] 齊香君,陳秀清,何恩銘.發(fā)根農(nóng)桿菌誘導黃芩毛狀根的研究[J].西北農(nóng)業(yè)學報, 2006,15(5): 244-247.

[2] 劉金霞,鄧淑華,楊鶴松,等.黃芩莖葉總黃酮的抗炎作用機制的研究[J].中國藥理學通報, 2002,18 (6):713-715.

[3] H.Y. Younga, Y.L. Luob, H.Y. Cheng,etal. Analgesic and anti-inflammatory activities of 6-gingerol[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2005, 96(1-2): 207-210.

[4] 蘇圣華,靳亞平,秦新喜,等.蒲公英提取物與狼毒素總黃酮主要藥效作用研究[J].西北農(nóng)業(yè)學報,2008,17(4):181-185.

[5] J.Y. Kanga, M.N.A. Khana, N.H. Parka,etal. Antipyretic, analgesic, and anti-inflammatory activities of the seaweedSargassumfulvellumandSargassumthunbergiiin mice[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2008, 116(1): 187-190.

[6] 劉美蘭,高 文.黃芩中黃酮類成分的分析研究[J].藥物分析,1982,2(3):134-136.

[7] 齊香君,郭樂康,陳微娜.誘導子對黃芩毛狀根生長及黃芩苷合成的影響[J].中草藥,2009,40 (5):801-803.