桂峰

淺談新鮮冰凍血漿融化后不同放置時間的臨床應用意義

桂峰

目的探討新鮮冰凍血漿融化后24 h內凝血因子的變化，為指導臨床治療提供理論依據。方法 采用SYSMEX CA-1500型自動血凝分析儀，對20份血漿樣品分別于融化后0、6、12、24 h測定凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白(FIB)、凝血酶時間(TT)、凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ(FⅦ、FⅧ、FⅨ)活性水平。結果新鮮血漿融化后24 h之內無明顯改變的有PT、FIB、TT(P＞0.5);其他指標在不同時間段各有明顯的改變，同時顯示FⅧ半衰期為12～24 h。結論新鮮冰凍血漿融化后放置會有凝血因子活性衰減，為保證輸血質量，應盡可能融化后立即輸注。

新鮮冰凍血漿;凝血因子

新鮮冰凍血漿(Fresh frozen plasma，F(xiàn)FP)是自血液采集后6～8 h之內經分離置-50℃中速凍成塊，然后在-30℃中保存1年，其幾乎含有全部凝血因子，包括不穩(wěn)定因子FⅤ和FⅧ.FFP是目前臨床常用的一種血液成分，在治療和預防出凝血疾病及大劑量輸血所致的凝血功能障礙方面起非常重要的作用。然而，凝血因子的不穩(wěn)定性及臨床時常出現(xiàn)FFP融化后不能及時應用而影響治療的效果。為了準確了解冰凍血漿的治療時效性，筆者對新鮮冰凍血漿融化后放置不同時間血漿凝血因子的活性水平進行了測定，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 20份新鮮冰凍血漿來自信陽市中心血站，經ACD-B抗凝全血分離制備而成，操作嚴格按照《中國輸血技術操作規(guī)程》進行制備。

1.2 實驗儀器與試劑 采用SYSMEX CA-1500型全自動血凝分析儀。試劑均為DADE BEHRING公司生產，有標準血漿(Lot.No 502578)，凝血酶原時間(PT)試劑(Lot.No 505627B)，活化部分凝血活酶時間(APTT)試劑(Lot.No 527158)，F(xiàn)IB 試劑(Lot.No 537511)，凝血酶時間(TT)試劑(Lot.No 515465)，Coagulation Factors Ⅶ(Lot.No 500780)，F(xiàn)Ⅷ(Lot.No 503872B)，F(xiàn)Ⅸ(Lot.No 500881B)，Dade Thrombin Reageednt試劑(Lot.No 500560B)。

1.3 取樣方法 隨機分批抽取新鮮冰凍血漿(FFP)20例份，37℃水浴融化。融化后立即在超凈工作室內嚴格按無菌技術要求抽取血漿2 ml于試管內，隨即進行凝血因子測定為0時值，然后把血漿放入4℃冰箱，在6、12、24 h分別進行測定。

1.4 凝血因子測定方法 嚴格按照SYSMEX CA-1500型全自動血凝分析儀操作說明和試劑要求，采用凝結光學檢測法原理，對不同的檢測項目利用不同稀釋度標準血漿原理，對不同的檢測項目利用不同稀釋度標準血漿凝結時間與相應的凝血因子活性率取對數(shù)后標繪于對數(shù)圖上，繪制成標準曲線，然后測定受檢者血漿凝結時間與相應因子活性率，所獲數(shù)據按內插法帶入回歸方程，計算受檢者血漿中凝血因子活性Ⅷ(FⅧ)、FⅨ等的活性。

2 結果

新鮮冰凍血漿融化后24 h內凝血因子變化見。

表1 新鮮冰凍血漿融化后24 h內凝血因子的變化(±s)

表1 新鮮冰凍血漿融化后24 h內凝血因子的變化(±s)

注：*與6 h比較P＜0.05，#與12 h比較P＜0.05，△與24 h比較P＜0.05;INR：PT換算為國際標準比率

時間 PT/s INR APTT/s TT/s FIB/(g/L) FⅦ/% FⅧ/% FⅨ/%0 h 12.11±0.51 1.017±0.08△ 31.26±2.53#△ 18.63±1.34△ 1.945±0.489 97.10±32.88*#△148.32±47.44*#△103.30±13.85#6 h 12.36±0.64 1.059±0.11 32.10±2.92 18.21±0.94 2.005±0.309 81.28±28.37 115.87±33.23 103.44±16.08 12 h 12.71±0.51 1.079±0.74 33.13±3.26 15.89±0.94 1.958±0.329 79.62±26.49 87.26±30.15 87.96±13.63 24 h 12.72±0.62 1.116±0.10 34.42±3.48 17.53±0.93 2.110±2.445 61.45±20.37 84.80±22.67 108.44±15.52

表2 部分凝血因子24 h衰減率情況(%)

3 討論

本資料凝血因子檢測指標有PT試驗，是用于快速、敏感檢測外源性凝血途徑(Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅰ)凝血功能紊亂的篩選，INR是PT用國際標準化比值來表示;APTT試驗，是用于內源性凝血因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)活性異常的篩選;TT試驗，是用于快速評定止血和血栓形成的有效方法，可以定量監(jiān)測功能性纖維蛋白原水平。

本資料顯示：新鮮冰凍血漿中不穩(wěn)定的凝血因子(如FⅧ)因其在體外半衰期較短，多為8～12 h，而易使其活性喪失，加之血液離體后血漿凝血因子接觸異物表面不同程度被激活，凝血酶和FⅩa也能在此繼續(xù)裂解FⅧa，使之失活［1］。我們的實驗結果顯示：新鮮凍凍血漿融化后，F(xiàn)Ⅷ：C隨時間的改變而有明顯的降低，由即時的(148.32±47.44)%下降到24 h測定值(84.8±22.67)%;在12 h時，其活性為(87.26±30.15)%，衰減了41.17%，與24 h衰減42.82%基本保持恒定，這與文獻［2］報道的FⅧ：C在4℃保持12 h、24 h的FⅧ：C水平，與抽血即刻比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)的結論不同，而與文獻［3］測定的新鮮冰凍血漿4℃保存12 h FⅧ：C衰減48.78%和24 h衰減66.77%的趨勢基本一致，從而證明FⅧ的半衰期為12～24 h。

本資料同時顯示：觀察的凝血指標中，F(xiàn)FP在融化后，6 h有明顯改變的有FⅦ、FⅧ(P＜0.05)，12 h有明顯變化的有APTT、TT、FⅦ、FⅧ和 FⅨ(P ＜0.05)，而 24 h有變化的有INT、APTT、FⅦ、FⅧ(P ＜0.05)，6～24 h沒有顯著變化的有PT、FIB(P＞0.05)。APTT的延長與內源性凝血系統(tǒng)的改變有關，其衰減可能與FⅧ降低有關;而PT時間延長與外源性凝血系統(tǒng)的改變有關，6～24 h沒有明顯改變，證明外源性凝血因子比較穩(wěn)定或改變小而沒有影響到其改變。纖維蛋白原因其比較穩(wěn)定測定結果無明顯改變。

由表2可知，F(xiàn)FP在融化后，F(xiàn)Ⅶ活性在6 h衰減16.3%，12 h衰減18.0%，24 h衰減36.7%;而FⅨ在12 h有一過性的降低，24 h又恢復到原水平，其原因有待進一步探討。從結果可知，F(xiàn)FP融化后，不僅有FⅧ活性的衰減，同時還有FⅦ活性的衰減。提示我們FFP在融化后要立即輸注，以保證凝血因子的足夠療效。

我院成分輸血率已達100%，了解和掌握成分血液的制備過程和血液成分含量，對指導臨床用血，計算血漿用量有一定的現(xiàn)實意義。由于冰凍血漿中幾乎包含了所有的凝血因子，因而是其他血液制品不能代替的。為了保證有效成分的含量，在新鮮冰凍血漿從制備到臨床應用整個環(huán)節(jié)中，都應進行嚴格的監(jiān)控，盡量縮短在室溫的停留時間，以減少不穩(wěn)定因子的失活，確保臨床用血的安全有效。

［1］ 李靜旗，張麗，宮本蘭.冷鏈對新鮮冰凍血漿FⅧ活性的影響.臨床輸血與檢驗，2003，5(3)：193.

［2］ 胡麗華，曹奎杰，陳漢華，等.庫存全血凝血因子Ⅷ改變的研究.臨床血液學雜志，2000，13(1)：21-22.

［3］ 張遠鵬，羅紅林，王麗.凝血因子Ⅷ在FFP過程中受時間和溫度的影響.鎮(zhèn)江醫(yī)學院學報，2001，11(1)：82.

The clinical significance of different place time after fresh frozen plasma warmed

GUI Feng.Department of Blood Transfusion，People's Hospital Gushi County Henan 465200，China

ObjectiveTo explore the changes of coagulation factor of warmed fresh Frozen plasma within 24 h，which provides theory basis for clinical transfusion.MethodsWe warmed 20 samples of FFP and detected PT，APTT，F(xiàn)IB，TT，F(xiàn)Ⅶ，F(xiàn)Ⅷ，F(xiàn)Ⅸ at 0、6、12、24 h respectively by SYSMEX CA-1500.ResultsPT，TT and FIB didn’t change obviously within 24 h after warmed(P ＞0.5)，but other indexes changed obviously at different time.It indicated that the half life of FⅧ was 12 ～ 24 h.ConclusionCoagulation factor activity should decrease after FFP is warmed.It has better be transfused immediately after warmed in order to assure quality of transfusion.

Fresh frozen plasma;Coagulation factors;Significance

465200 河南省固始縣人民醫(yī)院供血庫