亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        正交試驗探討五靈膠囊配伍對慢性肝損傷小鼠的影響

        2011-01-30 06:23:50瞿新紅王勝春皇甫娟田衛(wèi)斌
        中成藥 2011年2期
        關(guān)鍵詞:全方五味子靈芝

        瞿新紅, 王勝春, 皇甫娟, 田衛(wèi)斌

        (第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院藥劑科,陜西西安710032)

        中醫(yī)方劑,或中藥復方,是中醫(yī)用藥的主要形式與特色,因為它是中醫(yī)辨證施治的具體體現(xiàn)和實施方式,因而復方中藥配伍理論是中醫(yī)藥理論的基礎(chǔ)[1-2],開展方劑配伍規(guī)律的現(xiàn)代研究對于繼承和發(fā)展中藥配伍理論發(fā)揮臨床價值有著重要意義[3-4],也能更有效地指導臨床,為中藥新藥研制提供依據(jù)。五靈膠囊(國藥準字Z20090068)是由五味子、丹參、柴胡、靈芝制成的復方制劑,具有疏肝、益脾、活血功能,用于肝郁脾虛狹瘀癥,臨床用于乙型慢性肝炎治療[5-7]。處方來源于經(jīng)驗方,臨床應(yīng)用33年。本試驗采用正交設(shè)計對五靈膠囊不同配伍進行動物試驗,從藥效學方面探討五靈膠囊配伍的意義。

        1 材料與方法

        1.1 材料 藥材:柴胡Bupleurum chinense DC(陜西白水產(chǎn)),北五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill(河北承德產(chǎn)),丹參Salvia miltiorrhiza Bge(陜西商洛產(chǎn)),靈芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst(河南蘆氏栽培品種)。試劑:膽堿酯酶(CHE)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒(北京中生公司);丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。動物:昆明種小白鼠,♂性,體重(20±2)g,由第四軍醫(yī)大學動物中心提供,動物合格證號:SC×K(軍)2002-05;儀器:半自動生化儀(MD-100型)。

        1.2 方法 取昆明小鼠170只,隨機分為17組,置溫度(25±1)℃,相對濕度(40% ~65%)的實驗室,適應(yīng)環(huán)境3 d后試驗。正常組小鼠皮下注射生理鹽水2 mL/kg,其余各組小鼠皮下注射20%CCl4香油溶液2 mL/kg,每3 d注射1次。第3次注射后,正常、模型組灌胃蒸餾水10 mL/kg,其余各組分別給予相應(yīng)受試藥物,給藥劑量均相當于生藥10 g/kg,連續(xù)給藥10 d,同時各實驗組小鼠每3 d繼續(xù)皮下注射20%CCl4香油溶液2 mL/kg,正常組小鼠皮下注射生理鹽水。末次給藥后,禁食過夜,眼眶取血,離心,取血清測定ALT;取肝組織用預冷的0.9%氯化鈉溶液沖洗,置冰浴中勻化制得10%的肝勻漿,4℃12 000 r/min離心20 min,取上清測定MDA、CHE。

        2 結(jié)果及分析

        2.1 正交設(shè)計 選藥物五味子(A)、丹參(B)、柴胡(C)、靈芝(D)為交互配伍的主要因素,對上述因素各取2水平,選用藥為(1),不選用藥為(2),因素水平安排見表1。

        2.2 正交設(shè)計與結(jié)果 按正交表L16(215)安排試驗,取處方量五味子、丹參、柴胡、靈芝交互配伍,加10倍量乙醇回流2次,每次1 h,濾過,合并2次濾液,回收乙醇,減壓濃縮成稠膏。按上述1.2項方法進行藥效學試驗,結(jié)果見表2~3。

        表1 因素水平

        2.3 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠MDA影響結(jié)果分析 本試驗中并未設(shè)置誤差項,故將S值最小的因素B作為誤差項,結(jié)果另外14組因素全部顯著,提示正交試驗沒有意義。隨后合并S值較小的4項B、C、BD、ABD作為誤差項,其自由度為4,以F值檢驗作為判斷指標,除配伍組A(五味子)和ABC(五味子+丹參+柴胡)無顯著性,其它配伍組均顯著或高度顯著。由于本試驗要求各試驗組有降低慢性肝損傷小鼠MDA的作用,故要求K1<K2,即R值為負數(shù)有降低MDA作用,且負值越大效果越好。實驗組 D、AD、CD、ACD、BCD、ABCD 的R值為負,說明單味靈芝,五味子+靈芝,柴胡+靈芝,五味子+柴胡+靈芝,丹參+柴胡+靈芝及全方能降低慢性肝損傷小鼠肝組織MDA值,其降MDA作用順序為CD>D>BCD>AD>ABCD>ACD。其余4配伍組 AB、AC、BC、ABC的 R值為正,則沒有降MDA的作用,結(jié)果見表4。

        表2 正交試驗設(shè)計與結(jié)果(n=10)U/L

        表3 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠ALT、CHE、MDA的影響 (n=10)

        表4 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠肝MDA的影響(方差分析)

        2.4 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠肝ALT影響結(jié)果分析 合并S值較小的5項作為誤差項,其自由度為5,以F值檢驗作為判斷指標,除配伍組B(丹參),BC(丹參+柴胡)無顯著性,其它配伍組均顯著或高度顯著。由于本試驗要求各配伍組有降低慢性肝損傷小鼠ALT酶的作用,故要求K1<K2,即R值為負數(shù)時有效,且負值越大降酶效果越好。而配伍組 A、B、C、ABC、ABCD得R值為負,說明這5組配伍均有降低ALT酶的作用,但配伍組B(丹參)無顯著性,故丹參對降低小鼠ALT酶作用不顯著,其余4配伍組降A(chǔ)LT酶的作用順序為A >ABC > ABCD > C。另外,配伍組AC、BC、D、ACD、BCD的R值為正,說明這5組配伍升高小鼠肝ALT值,結(jié)果見表5。

        表5 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠肝ALT酶的影響(方差分析)

        2.5 藥物不同配伍對CCl4所致小鼠慢性肝損傷CHE影響的結(jié)果分析 合并S值較小的5項作為誤差項,以F值檢驗作為判斷指標,除配伍組AB(五味子+丹參)無顯著性,其余配伍組均高度顯著。由于本試驗要求各配伍組有升高慢性肝損傷小鼠CHE酶的作用,故要求K1>K2,即R值為正顯示有效,且正值愈大藥效作用愈強,故只有配伍組A、B、CD、BCD、ABCD能升高慢性肝損傷小鼠 CHE酶,其作用順序為A>ABCD>BCD >B>CD,其余配伍組C、BC、AD、ABD的R值為負,說明這4組配伍降低慢性肝損傷小鼠CHE酶,結(jié)果見表6。

        表6 藥物不同配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠肝CHE酶的影響(方差分析)

        2.6 驗證 取小鼠50只,分為正常組、模型組、配伍BC組、配伍ABC組和全方組,每組10只,小鼠按上述1.2項下試驗方法制備慢性肝損傷模型,各試驗組給藥方法及劑量同上。結(jié)果:與正常組比較,模型組ALT與MDA顯著升高,CHE顯著降低(P <0.01,P <0.05)。與模型組比較,配伍BC組明顯降低ALT,顯著升高CHE(P < 0.01,P <0.05);配伍ABC組顯著降低ALT,升高CHE與MDA;全方組顯著降低ALT與MDA,升高CHE(P <0.01,P<0.05),見表7。

        3 討論

        采用正交設(shè)計法研究五靈膠囊各組分交互配伍對CCl4所致慢性肝損傷小鼠MDA、ALT和CHE酶水平的影響,旨在明確4種組分交互配伍后藥效作用的意義和組方合理性。本試驗中五味子、丹參、柴胡、靈芝是交互配伍的主要因素,按L16(215)正交列表安排試驗,同一提取條件和給藥劑量,測定指標為血清ALT酶水平與肝勻漿MDA值和CHE酶水平,每一試驗組受試慢性肝損傷小鼠10只,采用數(shù)據(jù)取均值,15組配伍方測定結(jié)果以F值檢驗[8-9]顯著性差異(P <0.01,P <0.05)。CCl4所致慢性肝損傷小鼠肝組織MDA增加、ALT酶水平升高和CHE酶水平下降,能夠清除MDA、降A(chǔ)LT酶或升高CHE酶水平的因素為有效因素。就MDA和ALT而言即R值為負且負值愈大,清除自由基和降酶效果愈好,反之則沒有作用;而CHE酶的R值偏向正數(shù)愈大,說明肝功能修復作用愈強。試驗分析結(jié)果顯示:因素D有清除慢性肝損傷小鼠肝組織自由基作用(P<0.01),而因素A(五味子)與因素C則無此作用,但當靈芝配伍五味子或柴胡,能增強五味子和柴胡清除肝組織自由基的作用;五味子配伍丹參、柴胡無清除肝自由基作用;丹參+柴胡,五味子+丹參+柴胡也沒有降低MDA的作用,因為這5配伍組的R值為正,丹參+柴胡+靈芝和全方有顯著降MDA作用。慢性肝損傷小鼠肝細胞壞死導致ALT明顯升高,五味子、柴胡對慢性肝損傷小鼠血清ALT酶有明顯降低作用(P<0.05),但二者配伍后五味子+柴胡降A(chǔ)LT酶作用顯著減弱;靈芝無降低慢性肝損傷小鼠血清ALT酶作用,丹參有較弱的降低ALT酶作用;全方和五味子+丹參+柴胡配伍組有明顯降低ALT酶。慢性肝損傷小鼠肝細胞壞死導致肝功能下降,其肝臟合成功能標志酶CHE降低,CHE合成增加意味著肝臟功能改善。五味子、丹參有升高CHE酶的作用(P <0.01),但二者配伍后反而無升高CHE酶作用;柴胡、靈芝無增加CHE合成作用,柴胡 +靈芝配伍能顯著升高 CHE酶(P <0.01);五味子+丹參+靈芝配伍組無升高CHE酶作用,而全方和丹參+柴胡+靈芝配伍組均能升高CHE酶(P <0.01)。驗證結(jié)果顯示:配伍BC組可降低ALT,升高CHE;配伍ABC組顯著降低ALT,升高CHE與 MDA;全方組降低 ALT與 MDA,升高CHE,與正交試驗結(jié)果趨勢一致。在此實驗條件下五靈膠囊配伍是合理的,綜合分析相對最佳因素為全方,既降低MDA與ALT酶活性,又增加CHE酶活性。

        表7 各配伍組對CCl4所致小鼠慢性肝損傷酶活性的影響 (±s,n=4)

        表7 各配伍組對CCl4所致小鼠慢性肝損傷酶活性的影響 (±s,n=4)

        與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

        組別 劑量/(g/kg)血清ALT/(U/L)肝勻漿CHE/(U/L) MDA 值正常組 10 mL 7.15±2.11** 89.76±11.3** 94.98±10.37*模型組 10 mL 39.39±10.60 30.00±9.35 128.50±21.07 BC組 10 g 25.81±8.67* 101.40±19.20** 133.20±41.89 ABC組 10 g 12.38±7.49** 70.49±24.16** 162.50±31.58*全方組 10 g 10.90±2.66** 61.75±36.85** 71.15±8.73**

        [1]呂 祥,李 柏.中藥復方析方研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2008,15(10):105-106.

        [2]胡人杰.中藥方劑配伍的實驗研究[J].中華中醫(yī)藥學刊,2009,27(1):117-119.

        [3]鄧文龍.討論中藥藥方配伍合理性研究與評價[J].中藥藥理與臨床,2008,24(1):73-76.

        [4]王勝春,田衛(wèi)斌,李劍鋒,等.五味子及其與丹參靈芝柴胡配伍對慢性肝損傷的影響[J].解放軍藥學學報,2001,17(1)4-8.

        [5]李克敏,周歧新,高麗佳,等.肝勃寧對四氯化碳所致大鼠慢性肝損傷的保護作用[J].中藥藥理與臨床,1998,14(1):38.

        [6]趙輝平,王勝春,胡詠武.五靈膠囊對肝纖維化大鼠 TGF-(/Smad及Ras/ERK信號通路蛋白的影響[J].胃腸病學和肝病學雜志,2009,18(5):392-396.

        [7]李劍鋒,王勝春,田衛(wèi)斌,等.五靈膠囊對轉(zhuǎn)化生長因子-β1誘導肝星狀細胞 TGF-β/Smad信號通路的影響[J].中成藥,2010,32(1)35-38.

        [8]呂圭源,王一濤.中藥新產(chǎn)品開發(fā)學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:98.

        [9]胡 琳主編.醫(yī)學統(tǒng)計學[M].陜西:第四軍醫(yī)大學,1985:154-157

        猜你喜歡
        全方五味子靈芝
        薏苡附子敗醬散對腸上皮細胞屏障損傷的保護作用研究
        春天來了
        珍珠舌草膠囊揮發(fā)油對胃癌細胞增殖與凋亡的影響及機制研究
        一株“靈芝”——一位貧困婦女的脫貧自述
        當代陜西(2019年5期)2019-03-21 05:12:30
        HPLC-DAD法快速篩查五味子顆粒(糖漿)中南五味子代替五味子
        中成藥(2018年12期)2018-12-29 12:26:02
        化瘀通絡(luò)中藥全方及拆方對DN大鼠血液相關(guān)指標及腎臟足細胞ZO-1表達的干預作用
        菌草靈芝栽培技術(shù)
        五味子醇甲提取純化方法的研究進展
        中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:06
        北五味子化學成分的研究
        中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:01
        HPLC法同時測定五酯膠囊中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量
        藥學研究(2015年11期)2015-12-19 11:10:54
        亚洲xx视频| 午夜成人鲁丝片午夜精品| 久久国产色av| 国产精品欧美亚洲韩国日本| 美腿丝袜视频在线观看| 小妖精又紧又湿高潮h视频69| 国产成人无码一区二区三区在线| 天天躁日日操狠狠操欧美老妇| 人妻精品久久久一区二区| 国产精品蝌蚪九色av综合网| 野外少妇愉情中文字幕| 亚洲日韩欧美一区二区三区| 熟女不卡精品久久av| 亚洲av无码乱码精品国产| 风间由美性色一区二区三区| 日韩人妻无码精品久久伊人| 亚洲中文字幕第一页免费| 欧美做受又硬又粗又大视频| 曰本极品少妇videossexhd| 中文字幕日韩一区二区不卡| 国产一区视频在线免费观看| 黑人免费一区二区三区| 蜜臀av一区二区三区免费观看| 2021国产精品国产精华| 深夜国产成人福利在线观看女同| 中文字幕一区二区网址| 国产亚洲精品美女久久久m| 亚洲成a人v欧美综合天堂麻豆| 国产亚洲高清在线精品不卡| 精品一区二区三区婷婷| 久久久国产精品免费a片3d| 中文字幕av免费专区| 尤物在线观看一区蜜桃| 国产激情视频免费在线观看| 亚洲免费一区二区三区四区| 国产av无码专区亚洲av毛网站| 最新国产在线精品91尤物| 在线观看免费的黄片小视频| 暖暖 免费 高清 日本 在线| 国产性猛交╳xxx乱大交| 日本草逼视频免费观看|