劉靜 劉燦仿

RP-HPLC法測(cè)定牡荊片中牡荊素的含量

劉靜 劉燦仿

牡荊片；RP-HPLC；牡荊素

1 儀器與試藥

LC-2010AH型高效液相色譜儀(日本島津)；HS10260D型超聲波清洗器(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司)；AUW 120D型電子天平(日本島津)；UV-2450型紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津)。牡荊素(Viterxin)對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,編號(hào) 111687-200701,供含量測(cè)定用)；牡荊片(河北國(guó)金藥業(yè)提供,批號(hào)為 080615,080717,080728,080810,080818)。乙腈為色譜純；水為娃哈哈純凈水；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法 取牡荊片,研碎,精密稱(chēng)定,置 250ml圓底燒瓶中,加甲醇-25%鹽酸(4∶1)[2]150ml,水浴加熱 20min,放冷至室溫,揮干,殘?jiān)恿鲃?dòng)相溶解,移入 250ml容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

2.2 最大吸收波長(zhǎng)的確定 取對(duì)照品牡荊素適量,用流動(dòng)相稀釋后在 UV-7501紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定,測(cè)得牡荊素的最大吸收波長(zhǎng)為 270 nm。本實(shí)驗(yàn)選用 270 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 色譜條件 色譜柱為 Diamonsil C18柱(250 mm×4.6mm),柱溫為 25℃ ,流動(dòng)相為甲醇-乙腈-0.025mol/L磷酸水(5∶15∶80),流速為 1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng) 270nm。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取牡荊素對(duì)照品,精密稱(chēng)定 11.10mg,置 50m l容量瓶中,加甲醇超聲溶解,定容,搖勻,精密吸取5ml,置 100 m l量瓶中,加甲醇稀釋,定容,制成每毫升含0.0111mg牡荊索的溶液,精密吸取 2.0,4.0,6.0,8.0,10.0μl注入高效液相色譜儀中,測(cè)定色譜峰的峰面積。見(jiàn)表 1。

表1 線性范圍考察

可得回歸方程:Y:2242239X-1619.7,r=0.9997,結(jié)果顯示牡荊索進(jìn)樣量在 0.0222～0.1110μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 穩(wěn)定性考察 取本品 4片,取約 0.3 g,精密稱(chēng)定,按供試品制備的方法操作,制成供試品溶液。精密吸取供試品溶液10μl,按 0,2,4,6,8 h時(shí)間間隔,分別進(jìn)樣分析,測(cè)定牡荊素的色譜峰面積。分別為 124124,124116,123142,123587,123698,平均值為 123733,RSD=0.33%。結(jié)果表明,供試品溶液制備后8 h內(nèi)測(cè)定,牡荊素的峰面積無(wú)明顯變化,說(shuō)明在此時(shí)間內(nèi),供試品溶液化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定。

2.6 精密度考察 精密吸取同一供試品溶液 10μl,按確定色譜條件,連續(xù)進(jìn)樣 5次,測(cè)定色譜峰面積分別為 124689,124551,124876,123171,123456,平均值為 124148,RSD=0.63%。結(jié)果提示,本實(shí)驗(yàn)精密度符合要求。

2.7 重現(xiàn)性考察 取本品 4片,取約 0.3 g,精密稱(chēng)定,分別按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液,測(cè)定含量,結(jié)果分別為 1.18,1.17,1.17,1.20,1.18,1.17 mg/片,平 均 值 為1.18mg/片,RSD=1.03%。結(jié)果表明,本實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性符合規(guī)定。

2.8 加樣回收率 實(shí)驗(yàn)精密稱(chēng)取本品(批號(hào) 080615,含量1.1796mg/片)0.3 g,共稱(chēng)取 5份,置 250ml容量瓶中,精密加入濃度為 0.2496mg/ml的牡荊素對(duì)照品溶液 5ml,按樣品測(cè)定方法測(cè)定。結(jié)果提示,本方法的回收率在97.54%～100.42%之間,RSD為 1.08%,符合有關(guān)規(guī)定。見(jiàn)表 2。

表2 加樣回收率

2.9 樣品含量測(cè)定 按供試品溶液的制備方法,對(duì) 5批樣品進(jìn)行含量。結(jié)果各批次樣品(批號(hào)為 080615,080717,080728,080810,080818)中牡荊素的含量分別為 1.17、1.20、1.21、1.15、1.16mg/片。

3 討論

HPLC法測(cè)定牡荊片中牡荊素的含量未見(jiàn)報(bào)道。本文采用HPLC法測(cè)定牡荊片中牡荊素的含量,結(jié)果不同廠家、不同批次產(chǎn)品的牡荊素含量相差較大,建議通過(guò)測(cè)定牡荊素的含量來(lái)控制牡荊片的質(zhì)量。

1 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑(第 10冊(cè)).北京:人民衛(wèi)生出版社,1997.124.

2 仲英.高效液相色譜法測(cè)定山楂葉總黃酮中牡荊素含量.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2000,11:10.

R 917

A

1002-7386(2011)03-0448-01

10.3969/j.issn.1002-7386.2011.03.078

053200 河北省冀州市醫(yī)院(劉靜)；邢臺(tái)醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校藥劑教研室(劉燦仿)

牡荊片是由牡荊子制成的制劑,具有平喘,鎮(zhèn)咳,祛痰的功能。主要用于慢性氣管炎,支氣管哮喘。本方源自《中華人民共和國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)?中藥成方標(biāo)準(zhǔn)》第 10冊(cè)[1],原標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下無(wú)含量測(cè)定的方法,為有效控制其質(zhì)量,筆者用RP-HPLC法對(duì)其中的牡荊素的含量進(jìn)行了測(cè)定,經(jīng)方法學(xué)考察認(rèn)為本法簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確,可用于該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2010-10-13)