張純林 謝松業(yè) 劉慶中

(1.江蘇無錫市職業(yè)病防治醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇無錫 214000; 2.上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200080)

德靈BNII全自動(dòng)蛋白分析儀的性能評(píng)價(jià)①

張純林1謝松業(yè)2劉慶中2

(1.江蘇無錫市職業(yè)病防治醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇無錫 214000; 2.上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200080)

目的 對(duì)德靈BNII全自動(dòng)蛋白分析儀的使用性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法 采用質(zhì)控樣品和人血清樣本,對(duì)BNII全自動(dòng)蛋白分析儀測(cè)定免疫球蛋白G、A、M(IgG、IgA、IgM)3個(gè)項(xiàng)目的精密度、準(zhǔn)確度、線性、參考區(qū)間和攜帶污染進(jìn)行評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果 各項(xiàng)目批內(nèi)精密度小于CLIA’88的1/4的要求(＜5%),批間精密度＜CLIA’88的1/3的要求(＜7.55%)。IgG、IgA、IgM的準(zhǔn)確度分別為91.06%、94.83%和92.31%;線性實(shí)驗(yàn)表明,樣本的稀釋度與測(cè)定濃度值線性相關(guān)性良好;參考區(qū)間在允許范圍內(nèi);攜帶污染符合要求。結(jié)論 德靈BNII全自動(dòng)蛋白分析儀的各項(xiàng)主要評(píng)價(jià)指標(biāo)均較好,能夠準(zhǔn)確可靠地進(jìn)行臨床標(biāo)本分析檢測(cè) 。

BNII全自動(dòng)蛋白分析儀 免疫球蛋白 性能評(píng)價(jià)

德靈BNII是由西門子公司生產(chǎn)的一種高自動(dòng)化的蛋白定量分析儀,具有高速、高效、靈活和準(zhǔn)確的特點(diǎn),全面實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室蛋白定量的自動(dòng)化和靈活化[1]。BNII檢測(cè)蛋白的原理是通過檢測(cè)蛋白與其特異性抗體形成的免疫復(fù)合物的散射光強(qiáng)度,而散射光的強(qiáng)度與標(biāo)本中的濃度成正比[2]。為了更深入地了解BNII的性能,我們對(duì)該儀器檢測(cè)IgG、IgA和IgM的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、參考區(qū)間和樣本攜帶污染進(jìn)行了評(píng)價(jià),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與標(biāo)本

德靈BNII全自動(dòng)蛋白分析儀;德靈配套IgG、IgA和IgM試劑,批號(hào)分別為153053、153155、153266;標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào):83687);高值蛋白質(zhì)控品(批號(hào):52383);中值蛋白質(zhì)控品(批號(hào):52381)。血清標(biāo)本來源于上海市第一人民醫(yī)院正常體檢者和患者。

表1 批內(nèi)精密度測(cè)定結(jié)果

表2 批間精密度測(cè)定結(jié)果

1.2 方法

(1)精密度評(píng)價(jià):檢測(cè)德靈公司配套高值和中值蛋白質(zhì)控品,一天內(nèi)重復(fù)測(cè)定20次,計(jì)算均值(x)、標(biāo)準(zhǔn)差(S)和變異系數(shù)(CV),評(píng)價(jià)批內(nèi)精密度;檢測(cè)德靈公司配套高值和中值蛋白質(zhì)控品,每天兩次(上、下午各1次),每次重復(fù)測(cè)定2次,取均數(shù),10個(gè)工作日完成,計(jì)算均值()、標(biāo)準(zhǔn)差(S)、變異系數(shù)(CV),評(píng)價(jià)批間精密度。(2)準(zhǔn)確度評(píng)價(jià):選取2010年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)控品,與臨床檢驗(yàn)中心的靶值進(jìn)行比較,統(tǒng)計(jì)其偏倚%。(3)線性評(píng)價(jià):線性范圍指分析方法能直接測(cè)定的待測(cè)物濃度或質(zhì)量的范圍。選取高值血清按一定比例稀釋后檢測(cè),IgG的稀釋倍數(shù):1∶1.2,1∶1.5,1∶2,1∶3,1∶6,1∶12;IgA的稀釋倍數(shù):1∶1.67,1:2,1∶25,1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40;IgM的稀釋倍數(shù):1∶3.3,1∶5,1∶10,1∶20,1∶40,1∶60。做回歸方程Y=a+bX統(tǒng)計(jì)。(4)參考區(qū)間范圍:選擇20份體檢合格的健康人標(biāo)本,驗(yàn)證廠家提供的參考范圍是否適合于本實(shí)驗(yàn)室。如果僅有5%的數(shù)據(jù)超出試劑說明書提供的參考范圍,表示該參考范圍可以用于本實(shí)驗(yàn)室。否者實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立合適的參考范圍。本實(shí)驗(yàn)室引用的參考區(qū)間:IgG7.00～16.00g/L、IgA0.70～4.00g/L、IgM0.40～2.30g/L。(5)攜帶污染分析:準(zhǔn)備標(biāo)本量足夠的極高和極低濃度的樣本各1份,將高濃度樣本均勻分成10份,編號(hào)H1、H2、……H10,低濃度樣本均勻分成11份,編號(hào)L1、L2……L11,按照一定順序排列。統(tǒng)計(jì)H-L順序結(jié)果和L-L順序結(jié)果的均值和標(biāo)準(zhǔn)差;H-L順序結(jié)果均值減去L-L順序結(jié)果均值,即為攜帶污染量;3倍的L-L順序結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)差即為允許誤差范圍。

表3 準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

圖1 IgG線性測(cè)定結(jié)果

圖2 IgA線性測(cè)定結(jié)果

圖3 IgM線性測(cè)定結(jié)果

2 結(jié)果

(1)精密度評(píng)價(jià):IgG、IgA和IgM的批內(nèi)精密度都＜CLIA’88的1/4(＜5%)要求,批間精密度都＜CLIA’88(＜7.55%)的1/3的要求(表1、2)。(2)準(zhǔn)確度:參照CIA88的允許誤差的1/3(10%)作為允許偏倚,如測(cè)定偏倚在允許偏倚內(nèi),則認(rèn)為該項(xiàng)目準(zhǔn)確度符合要求。測(cè)定結(jié)果與2010年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)控品參考值相比偏倚最小為0%(IgM),最大為-8.94%(IgA（)表3）。(3)線性范圍:圖中Y 值為理論值,X為實(shí)測(cè)值,做回歸方程Y=a+bX統(tǒng)計(jì),斜率在0.95至1.05之間,且r2≥0.95,說明線性相關(guān)性良好,見圖(1～3)。(4)參考區(qū)間:20份健康人血清標(biāo)本中無結(jié)果超出所驗(yàn)證的參考范圍,實(shí)際測(cè)量健康人參考范圍與我們選用的參考范圍相符合。本次實(shí)驗(yàn)參考區(qū)間在IgG9.39～14.59g/L;IgA0.9～2.9g/L;IgA0.59～1.9g/L。實(shí)驗(yàn)室引用的參考區(qū)間在允許范圍內(nèi)。(5)攜帶污染分析,按照一定順序測(cè)定極高和極低濃度的樣本,IgG、IgA、IgM樣本間攜帶污染量分別為0.198、0.07、0.01。允許誤差范圍分別為0.56、0.11、0.15。實(shí)驗(yàn)結(jié)果攜帶污染量非常低,均小于允許誤差范圍,攜帶污染符合要求。

3 討論

精密度是反應(yīng)同一組測(cè)量值之間彼此的接近程度,是進(jìn)行其他方法學(xué)驗(yàn)證的前提,從精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果看,IgG、IgA和IgM的批內(nèi)精密度變異系數(shù)在2.17%～4.68%之間,批間精密度變異系數(shù)在3.51%～5.54%之間,可以看出該機(jī)的重復(fù)性很好,可滿足臨床要求。準(zhǔn)確度表示測(cè)量結(jié)果與真值的符合程度,本文選取2010年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)控品靶值相比,因此,可以作為判斷準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)。本次實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度介于91.06%～94.83%之間,所檢測(cè)的結(jié)果與衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)控品靶值偏倚較小,樣品的實(shí)測(cè)濃度和預(yù)期濃度非常符合,因此,可為臨床提供可靠的檢測(cè)結(jié)果。線性是保證臨床試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要法碼。線性評(píng)估可以檢查方法、儀器和試劑的性能,保證在可報(bào)告范圍內(nèi)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。本次實(shí)驗(yàn)線性范圍IgG2.96～35.48g/L、IgA0.23～7.43g/L、IgM0.26～4.20g/L,圖（1～3）結(jié)果表明,BNII檢測(cè)免疫球蛋白較為理想,相關(guān)系數(shù)r(IgG、IgA、IgM)分別為:0.9968、0.998、0.9979。說明線性相關(guān)性較好,對(duì)于超過線性范圍的樣品,應(yīng)用做適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)重新進(jìn)行分析測(cè)定。參考范圍涉及臨床的診斷和治療,因此本實(shí)驗(yàn)室需對(duì)廠家提供的參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證,本實(shí)驗(yàn)室選取的20例正常人的標(biāo)本進(jìn)行分析,沒有1例超出試劑說明書提供的參考范圍,證實(shí)廠家的參考范圍符合本實(shí)驗(yàn)室。臨床常遇到高濃度樣本對(duì)以后樣本產(chǎn)生污染和干繞的問題,因此,評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)的樣本間攜帶污染非常重要。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)高值和低值樣本的測(cè)定,其攜帶污染量均小于允許誤差范圍,表示高值標(biāo)本對(duì)低值標(biāo)本交叉污染小。目前的自動(dòng)化的分析儀通過大量的沖洗程序可以基本解決攜帶污染問題[3],IgG、IgA和IgM的攜帶污染驗(yàn)證,說明該儀器具有良好的沖洗功能,交叉污染率低。

BNII支持條形碼功能,采用多點(diǎn)定標(biāo)建立參考曲線,以克服偏差,多點(diǎn)定標(biāo)能夠準(zhǔn)確反應(yīng)抗原抗體與吸光度間的關(guān)系[4]。如果使用了不同批號(hào)的抗血清,則必須建立新的參考曲線,可以更好的保證結(jié)果的準(zhǔn)確。BNII檢測(cè)項(xiàng)目多、速度快,具有樣本稀釋功能,對(duì)每個(gè)樣本預(yù)先稀釋再分析,預(yù)稀釋樣本可保留至得到檢測(cè)結(jié)果,以方便自動(dòng)對(duì)已稀釋的樣本進(jìn)行復(fù)查,提高了工作效率和檢驗(yàn)質(zhì)量。綜上所述,BNII能夠符合其公司的設(shè)計(jì)能力,為進(jìn)一步探討免疫球蛋白在臨床中的應(yīng)用價(jià)值提供可靠的依據(jù)。

[1]李文波.日本7180全自動(dòng)生化分析儀性能評(píng)價(jià)[J].齊魯醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2005,16(4):55～57.

[2]王蘭蘭,吳健民.臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:252～254.

[3]邱玲,程歆琦,劉茜,等.自動(dòng)生化分析儀攜帶污染率來源檢出及處理[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2007,36(6):64.

[4]石凌波,林龍順,關(guān)幼華,等.載脂蛋白A1、B免疫比濁法試劑盒的評(píng)價(jià)[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,14(1):27～29.

R19

A

1674-0742(2011)8(c)-0176-02

①通訊作者:謝松業(yè)：55歲,男,副主任技師，上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，郵編200080,E-maiL:13671692739@139.com。

2011-07-18