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        環(huán)氧化酶-2在分化型甲狀腺癌中的表達(dá)及意義

        2011-01-10 02:51:12李曉玲黃健萍
        實用癌癥雜志 2011年4期
        關(guān)鍵詞:濾泡淋巴管乳頭狀

        李曉玲 黃 仲 黃健萍

        分化型甲狀腺癌(differentiated thyroid carcinoma,DTC)包括甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和濾泡癌 (follicular thyroid carcinoma,F(xiàn)TC),它們是甲狀腺濾泡源性惡性腫瘤中2種不同生物學(xué)行為的病理類型。頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是PTC的主要轉(zhuǎn)移途徑,血行轉(zhuǎn)移少見,而FTC則易發(fā)生血行轉(zhuǎn)移而較少發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。近年來大量研究表明,環(huán)氧化物酶2(COX-2)與許多腫瘤的轉(zhuǎn)移相關(guān)。本實驗檢測分化型甲狀腺癌中COX-2的表達(dá),探討COX-2在分化型甲狀腺癌中的表達(dá)及意義。

        1 材料與方法

        1.1 一般資料

        選自廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科及廣東農(nóng)墾中心醫(yī)院病理科、2005年1月~2010年6月存檔的、有明確病理診斷的甲狀腺癌蠟塊。51例分化型甲狀腺癌中,男性14例,女性37例,年齡13~72歲,中位年齡42歲。其中乳頭狀癌36例,濾泡癌15例;頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者28例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例;按照國際抗癌協(xié)會聯(lián)盟(UICC)的TNM分期,Ⅰ~Ⅱ期33例,Ⅲ~Ⅳ期18例;所有患者術(shù)前均未接受藥物及同位素治療。

        1.2 試劑與方法

        全部標(biāo)本均經(jīng)4%中性甲醛固定,梯度脫水、浸蠟、包埋,4μm連續(xù)切片,烤干、常規(guī)脫蠟后行免疫組織化學(xué)SP法染色。兔抗人單克隆抗體COX-2、抗體稀釋液、SP-900通用型試劑盒、DAB顯色試劑盒、PBS磷酸鹽緩沖液及Citrate枸櫞酸鹽緩沖液,均購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,采用高溫高壓抗原修復(fù)。

        1.3 結(jié)果判定

        COX-2陽性表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì),呈棕黃色或棕褐色顆粒樣分布。每張切片隨機(jī)選擇3個視野(×100),在顯微鏡(×400)下計數(shù)每個視野100個腫瘤細(xì)胞中陽性細(xì)胞數(shù),以3個視野的平均百分?jǐn)?shù)為判定結(jié)果。評分標(biāo)準(zhǔn)采用半定量積分法,將染色強(qiáng)度分為3級:無著色記1分,淺著色記2分,棕黃色記3分;陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)≤5%為0分;6%~25%為1分;26%~50%為2分;51%~75%為3分;>75%為4分。上述兩項評分的乘積為最后得分:0~1分為陰性(-);2~3分為陽性(+~++);≥4分為強(qiáng)陽性(+++)。(+)及以上評為陽性表達(dá)。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

        采用SAS 8.0軟件分析,免疫組織化學(xué)染色陽性率比較采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 COX-2在分化型甲狀腺癌中的表達(dá)情況

        COX-2陽性表達(dá)于細(xì)胞胞質(zhì),乳頭狀癌組織中其陽性率(72.22%,26/36)高于濾泡癌組織(40.00%,6/15),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

        2.2 COX-2表達(dá)與甲狀腺癌臨床病理因素的關(guān)系

        COX-2陽性表達(dá)與患者性別、年齡無關(guān)(P>0.05),而與甲狀腺癌病理類型、有無頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān)(P<0.05),見表1。

        表1 COX-2表達(dá)與甲狀腺癌臨床病理因素的關(guān)系(例,%)

        3 討論

        環(huán)氧化酶(COX) 是催化花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素(PG) 的重要限速酶。目前發(fā)現(xiàn)哺乳動物的COX有3種同工酶:COX-1為結(jié)構(gòu)型基因,在正常組織和細(xì)胞內(nèi)表達(dá);COX-2為誘導(dǎo)型基因,在生理狀態(tài)下很少檢測到,正常表達(dá)被認(rèn)為限制于某些組織中,如前列腺、乳腺、胃腸;COX-3則表達(dá)于腦、脊髓等組織,具體功能有待研究。人類COX-2基因定位于1號染色體的1q25.2~q25.3[1],由10個外顯子和9個內(nèi)含子構(gòu)成,產(chǎn)物為編碼604個氨基酸殘基組成的多肽,大小為69.93 kDa。

        COX-2在多種腫瘤組織的癌變過程中出現(xiàn)高表達(dá),表達(dá)程度與多種惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)[2~4]。目前認(rèn)為,COX-2的致癌機(jī)制主要是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和抑制凋亡、影響腫瘤細(xì)胞的黏附和遷移、抑制免疫反應(yīng)、促進(jìn)腫瘤血管形成以及影響腫瘤淋巴管的生成。關(guān)于COX-2與腫瘤血管的形成是研究的一個熱點(diǎn),目前對該機(jī)制的了解比較清楚,認(rèn)為COX-2能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生VEGF,而腫瘤組織產(chǎn)生的COX-2產(chǎn)物如PGE2、PGF2及TXA2等亦可直接或間接促進(jìn)血管的生成,此外COX-2促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá),激活血管生成素,也可刺激抗凋亡因子Bcl-2的表達(dá)來抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡,從而促進(jìn)血管的生成[5]。但關(guān)于COX-2在甲狀腺濾泡癌血行轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制方面研究不多。在甲狀腺乳頭狀癌的研究中,朱洪源等[6]發(fā)現(xiàn),COX-2高表達(dá)于甲狀腺乳頭狀癌,發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組表達(dá)率高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,與Lo等[7]的研究結(jié)果相近。有學(xué)者[8]發(fā)現(xiàn)COX-2和VEGF-C在甲狀腺乳頭狀癌中呈高表達(dá)且關(guān)系密切,兩者在甲狀腺乳頭狀癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用且可能存在協(xié)同效應(yīng),與朱洪源等[8]、胡賢杰等[9]的研究結(jié)論相一致,認(rèn)為COX-2對甲狀腺乳頭狀癌患者的淋巴管形成起重要作用,其機(jī)制可能是通過上調(diào)VEGF-C的表達(dá)促進(jìn)腫瘤淋巴管的形成,利于甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。本實驗中,COX-2在PTC中的陽性表達(dá)率高于FTC,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,并與TNM分期有關(guān),與文獻(xiàn)報道的一致,可見COX-2在分化型甲狀腺癌的轉(zhuǎn)移中起重要作用,其機(jī)制可能與VEGF、VGEF-C等血管、淋巴管生成因子相關(guān)。目前COX-2在PTC的淋巴管生成與淋巴道轉(zhuǎn)移、在FTC的血管生成與血行轉(zhuǎn)移機(jī)制中的研究尚淺,甲狀腺乳頭狀癌與濾泡癌同屬分化型甲狀腺癌,卻有著兩種不同的轉(zhuǎn)移傾向路徑,COX-2在此2種轉(zhuǎn)移路徑中的具體機(jī)制,仍有待深入研究。

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        [5]趙淑華,趙永慶,曹巍子.環(huán)氧化酶-2與惡性腫瘤〔J〕.醫(yī)學(xué)信息內(nèi)外科版,2009,22(7):627.

        [6]朱洪源,湯建國,毛鑫禮,等.甲狀腺癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶中COX-2表達(dá)水平的比較研究〔J〕.臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2007,21(18):853.

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        [8]朱洪源,湯建國,毛鑫禮,等.環(huán)氧化酶-2和血管內(nèi)皮生長因子與甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕.中國耳鼻咽喉頭頸外科,2007,14(5):284.

        [9]胡賢杰,郭貴龍,顧 馨,等.COX-2的表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌中淋巴管生成及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕.實用腫瘤學(xué)雜志,2008,22(2):104.

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