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        古墨膏對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性及氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和一氧化氮含量影響的實(shí)驗(yàn)研究

        2010-10-27 09:10:12王思農(nóng)
        衛(wèi)生職業(yè)教育 2010年3期
        關(guān)鍵詞:通透性洗液氣囊

        王思農(nóng)

        (甘肅中醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000)

        古墨膏對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性及氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和一氧化氮含量影響的實(shí)驗(yàn)研究

        王思農(nóng)

        (甘肅中醫(yī)學(xué)院,甘肅 蘭州 730000)

        目的研究古墨膏的抗炎作用,并初步探討其作用機(jī)制。方法 采用小鼠氣囊炎性模型觀察古墨膏的抗炎作用。結(jié)果 古墨膏能明顯降低小鼠氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和一氧化氮(NO)含量,并具有抑制冰醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的作用。結(jié)論 古墨膏具有明顯的抗炎作用,其機(jī)理可能與抑制NO等炎癥介質(zhì)合成、抑制脂質(zhì)過氧化、增強(qiáng)自由基清除能力、抑制白細(xì)胞滲出有關(guān)。

        古墨膏;抗炎作用;實(shí)驗(yàn)研究

        我院制劑古墨膏對(duì)體表感染、肛門部疾病,尤其是便血、腫痛、水腫等癥狀治療效果非常顯著。以前我們只注重古墨膏的臨床應(yīng)用,對(duì)其本質(zhì)研究較少。本實(shí)驗(yàn)利用動(dòng)物模型,觀察古墨膏的抗炎作用,并對(duì)其機(jī)理作初步探討。

        1 材料

        1.1 受試藥與試劑

        古墨膏(主要組成:古墨、黃連、豬膽粉、冰片等),我院制劑室配制,批號(hào)為050216,賦形劑為凡士林;陽(yáng)性對(duì)照為馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏,武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)為050323;1%伊文思藍(lán)、0.6%冰醋酸,甘肅中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室提供;一氧化氮(NO)測(cè)試盒,購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

        1.2 主要儀器

        Sartorius分析天平,德國(guó)賽多利斯公司生產(chǎn);722可見分光光度計(jì),上海菁華科技儀器有限公司生產(chǎn);T6紫外-可見光分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)。

        1.3 動(dòng)物

        昆明種小鼠,SPF 級(jí),雌雄各半,體重(20±2)g,甘肅中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證為SCXK(甘)2009-0000419。

        1.4 古墨膏制備

        將煅古墨研粉,過100目篩,黃連粉碎為100目細(xì)粉,把煅古墨、豬膽粉、黃連粉置乳缽中,按等量遞增法分別加入麝香、冰片等研磨混勻,過100目篩。熔化凡士林,自然冷卻至表皮微凝固時(shí)(38~60℃),徐徐加入上述藥粉,充分?jǐn)嚢瑁靹?,裝入油膏盒,每盒25g。

        1.5 統(tǒng)計(jì)方法

        采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。2組間資料比較采用t檢驗(yàn)(方差不齊時(shí)采用t′檢驗(yàn))。

        2 方法

        2.1 對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響[1]

        將40只小鼠按體重隨機(jī)分為空白組,模型組和古墨膏高、低劑量組。直腸給藥,古墨膏劑量分別為 375.0、187.5mg/cm2。空白組不給予任何處理。連續(xù)給藥6d。末次給藥后1h尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1毫升/只,隨即腹腔注射0.6%冰醋酸生理鹽水溶液0.2毫升/只。30min后處死小鼠,用蒸餾水5ml,充分洗滌腹腔,收集洗滌液,1 000r/min離心10min,取上清液于722可見分光光度計(jì)590 nm波長(zhǎng)處讀取光密度(OD)值。

        2.2 對(duì)小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和NO含量的影響[1,2]

        40只小鼠分組同上。直腸給藥,連續(xù)7d。第1天給藥前于小鼠肩胛區(qū)皮下無菌注入空氣5ml形成氣囊。第4天補(bǔ)充注射空氣3ml維持氣囊膨脹。末次給藥1h后除空白組外其他組小鼠氣囊內(nèi)注入0.25%角叉菜膠1ml,立即將鼠背向下徐徐轉(zhuǎn)動(dòng)??瞻捉M氣囊內(nèi)注入等容量生理鹽水。致炎6h后以生理鹽水4ml灌洗氣囊,收集灌洗液并定量其體積,2 000r/min離心10min,沉淀用5ml生理鹽水重懸并進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù);取上清液0.05ml,采用化學(xué)法NO試劑盒測(cè)定NO含量。

        3 結(jié)果

        3.1 古墨膏對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(見表1)

        3.2古墨膏對(duì)小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)、NO含量的影響(見表2)

        表1 古墨膏對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(n=10,±s)

        表1 古墨膏對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響(n=10,±s)

        注:與空白組比較,※P<0.05;與模型組比較,▲▲P<0.01;與古墨膏低劑量組比較,#P<0.05

        組別 劑量(mg/cm2) OD值空白組模型組古墨膏高劑量組古墨膏低劑量組——375.0 187.5 0.067±0.023▲▲0.127±0.041 0.058±0.018※▲▲#0.074±0.015※▲▲

        表2 古墨膏對(duì)小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和NO含量的影響(n=10,±s)

        表2 古墨膏對(duì)小鼠氣囊炎性模型氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和NO含量的影響(n=10,±s)

        注:與空白組比較,※※P<0.01;與模型組比較,▲▲P<0.01;與古墨膏低劑量組比較,#P<0.05

        組別 劑量(mg/cm2) 白細(xì)胞數(shù)(×104/ml) NO含量(mg/L)空白組模型組古墨膏高劑量組古墨膏低劑量組——375.0 187.5 11.250±1.807▲▲89.760±18.647※※34.350±11.399※※▲▲#57.820±15.664※※▲▲4.932±2.477▲▲76.529±19.262※※5.715±2.450※※▲▲#8.617±3.497※※▲▲

        4 討論

        外科創(chuàng)傷以及創(chuàng)口感染在臨床上十分常見,嚴(yán)重影響病人生活質(zhì)量。創(chuàng)面愈合受多種因素影響,除常見各種感染外,還與全身與局部營(yíng)養(yǎng)狀況有關(guān),在細(xì)胞分子學(xué)上主要與一些炎癥介質(zhì)釋放和細(xì)胞生長(zhǎng)因子分泌有關(guān)。細(xì)胞因子在炎癥發(fā)生、發(fā)展過程中有重要作用,其中NO等是促進(jìn)炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)。

        古墨膏能顯著降低小鼠氣囊灌洗液中白細(xì)胞數(shù)和NO含量,并具有抑制冰醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的作用。

        綜上所述,古墨膏對(duì)動(dòng)物炎癥模型具有明顯的抗炎作用。其機(jī)理可能與抑制白細(xì)胞向炎癥部位游走、抑制NO合成、對(duì)抗自由基損傷有關(guān)。

        [1]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.

        [2]李瑩,秦獻(xiàn)輝.復(fù)方魚腥草膠囊抗炎作用及機(jī)制實(shí)驗(yàn)[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2004,21(5):371~374.

        G424.31

        B

        1671-1246(2010)03-0099-02

        注:本文為甘肅省中醫(yī)管理局計(jì)劃項(xiàng)目(06-GSZ-21){甘衛(wèi)中發(fā)(2006)-298號(hào)}

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