謝清春 陳燕忠 呂竹芬 黃惠丹 申樓
舒胸片是由三七,川芎和紅花組成的中藥復(fù)方制劑,收載于中國(guó)藥典。具有活血、祛瘀、止痛之功效;用于瘀血阻滯,胸痹心痛,跌打損傷,瘀血腫痛;冠心病,心絞痛,心律失常,軟組織挫傷。分散片結(jié)合了片劑和液體制劑的優(yōu)點(diǎn)[1],具有便于攜帶、服用方便,吸收快等特點(diǎn),且分散片對(duì)生產(chǎn)工藝和設(shè)備無(wú)特殊要求,是一種具有開發(fā)前景的新劑型。本文將舒胸片研制成舒胸分散片,并采用HPLC法測(cè)定片中人參皂苷Rg1含量。
Dionex ultimate 3000高效液相色譜儀(Dionex Corp.);BS224S電子分析天平(Sartorius);Nichipet Ex 1000微量移液器(日本Nichiryo);K-Q100型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);ZP-19型旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)(上海天馬制藥機(jī)械廠);78X-2型片劑四用測(cè)定儀(上海黃海藥檢儀器廠)。
三七、紅花、川芎(廣州致信藥業(yè)有限公司);人參皂苷Rg1對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)11073-200424);微晶纖維素(上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司);羧甲基淀粉鈉(廣州杰輔貿(mào)易有限公司);淀粉(湖州展望藥業(yè)有限公司);乙醇(廣州化學(xué)試劑廠);甲醇及乙腈(色譜純,天地);水為重蒸餾水,其他試劑均為分析純。
2.1 制備工藝 按處方稱取三七藥材50 g,紅花50 g,川芎100 g,三七用10倍量60%乙醇超聲30 min提取制成干浸膏,粉碎成細(xì)粉;川芎加水煎煮2 h[2],濾過,濾液另存,藥渣與紅花加水煎煮二次,每次1 h,合并三次煎液,濾過,濾液靜置24 h,取上清液,濾過,濾液濃縮,干燥成干浸膏,粉碎成細(xì)粉備用。將上述兩種細(xì)粉與輔料混合均勻制成的軟材,制顆粒、烘干、整粒,外加硬脂酸鎂混合均勻,壓片即得。
2.2 處方篩選 分散片常用的填充劑有微晶纖維素,乳糖,淀粉等,崩解劑有低取代羥丙基纖維素,羧甲基淀粉鈉,交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮等。其中崩解劑起著重要作用[3],它的用量和加入方法會(huì)直接影響分散片的崩解時(shí)間。
本研究針對(duì)分散片的特點(diǎn)設(shè)計(jì)的典型處方見表1,處方1因淀粉用量較多,崩解劑用量少,不能在3 min內(nèi)崩解。處方2和3在減少淀粉用量,增加微晶纖維素用量后崩解時(shí)間縮短。處方4和5加大了藥材提取物干膏粉的比例,輔料的用量相應(yīng)減少,軟材粘性較大,不容易制粒,且影響崩解時(shí)間。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)提取物比例在30%時(shí),適合制粒,不會(huì)出現(xiàn)粘連、結(jié)塊的現(xiàn)象。
硬度的大小也是影響片劑崩解的重要因素之一。硬度過大崩解時(shí)間會(huì)延長(zhǎng),過小則影響脆碎度,不利于儲(chǔ)存,運(yùn)輸。經(jīng)試驗(yàn)片劑硬度在5 kg/mm不會(huì)顯著延長(zhǎng)崩解時(shí)間且能較好保持片劑的完整性。綜上多次試驗(yàn)得壓片物料用量最佳比例為藥材提取物干膏粉:淀粉:微晶纖維素:羧甲基淀粉鈉=30%∶25% ∶40% ∶5%。
3.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取經(jīng)干燥恒重的人參皂苷Rg1對(duì)照品15.60 mg至10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,得到1.560 mg/ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,再吸取1 ml,用甲醇定容至10 ml,制成0.1560 mg/ml的對(duì)照品溶液。
3.2 色譜條件 色譜柱為 C18柱(4.0 mm×200 mm,5 μm),流動(dòng)相為乙腈-蒸餾水(24% ∶76%),檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm,進(jìn)樣量為 10 μl,流速為1.0 ml/min。
3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取人參皂苷Rg1對(duì)照品溶液2,4,6,8,10,12,14,16μl注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定,以對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)作回歸曲線,得人參皂苷 Rg1回歸方程 y=6.8218x-0.0323,R2=0.9998,表明當(dāng)人參皂苷Rg1進(jìn)樣量在3.12×10-4mg~2.496×10-3mg之間線性關(guān)系良好。
表1 處方因素對(duì)崩解時(shí)間的影響(%,s)
3.4 加樣回收試驗(yàn) 精密稱定已知人參皂苷Rg1含量為5.811 mg/g樣品0.1342 g,共6份,置10 ml量瓶中,每份精密加入1.560 mg/ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.5 ml,用60%的乙醇定容至刻度、混勻。用微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液10μl按照上述色譜條件測(cè)定,計(jì)算平均回收率,結(jié)果見表2。
表2 加樣回收率測(cè)試結(jié)果(g,mg,%)
3.5 精密度試驗(yàn) 取加樣回收試驗(yàn)項(xiàng)下樣品一份照含量測(cè)定條件,連續(xù)進(jìn)樣6次,分別測(cè)得其峰面積為6.085、6.071、6.012、6.097、6.043、6.074,RSD 為 0.56%。
3.6 樣品測(cè)定 取舒胸分散片20片,精密稱定,研細(xì),精密稱取0.70 g至25 ml量瓶中,加入60%乙醇20 ml超聲10 min,放冷,加60%乙醇至刻度,混勻,用0.45μm微孔濾膜過濾,按照含量測(cè)定條件測(cè)定得每片自制分散片中的人參皂苷Rg1含量為1.749 mg。
本文以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo),將舒胸片制成分散片,建立了HPLC法測(cè)定片中人參皂苷Rg1含量。分散片的主要指標(biāo)是要能在20℃水中3 min內(nèi)崩解,實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)處方淀粉用量不宜過分,否則會(huì)使崩解困難;提取物干膏粉用量不宜超40%,過多會(huì)使制粒困難且崩解不合格。本文只對(duì)含量較高的人參皂苷Rg1進(jìn)行了含量測(cè)定,其他成分尚需做進(jìn)一步的研究。
[1]陳鷹,匡長(zhǎng)春,宋琪,等.分散片的研究與應(yīng)用.中國(guó)藥師,2001,4(1):62-64.
[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2005版一部.北京:北京工業(yè)出版社,636.
[3]李志紅,賈曉麗,石磊,等.中藥分散片的處方與工藝研究進(jìn)展.中國(guó)藥業(yè),2007,16(7):64-66.