付秋風(fēng) 熊勇 孫麗萍 秦贇娜 于曉紅

（江西省婦幼保健院 南昌 330006）

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢，嚴(yán)重威脅婦女的健康。而腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移與臨床的治療有著很大的關(guān)系。近年來研究表明，腫瘤基膜的完整與否和細(xì)胞外基質(zhì)的降解情況是影響腫瘤細(xì)胞移動(dòng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，CD44（粘附分子）及其變異體與MMP9（基質(zhì)金屬蛋白酶）在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中起著重要作用。本文通過聯(lián)合檢測MMP9、CD44v6在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)，探討其與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 2004年1月～2005年8月在本院手術(shù)治療的患者，從中選取子宮內(nèi)膜癌組織78例（根據(jù)FIGO分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期48例，Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期17例），其中子宮內(nèi)膜腺癌59例、非子宮內(nèi)膜腺癌19例。對每例的手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級、肌層浸潤和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移予以登記。同時(shí)選取子宮內(nèi)膜不典型增生組織30例、正常子宮內(nèi)膜組織30例（增生期子宮內(nèi)膜10例、分泌期子宮內(nèi)膜10例、絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜10例）作為對照組。所有患者術(shù)前均未行放、化療或激素治療。

1.2 染色方法 免疫組化采用Elivision plus試劑盒將多個(gè)抗鼠和抗兔的IgG分子與辣根過氧化物酶聚合，所形成的聚合物直接與一抗結(jié)合，從而放大了抗原抗體結(jié)合的信號。

1.3 結(jié)果判定 采用雙向評分：CD44v6和MMP-9均定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞漿，按染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞所占百分比打分。癌細(xì)胞＜10%陽性0分，11%～40%1分，40%～70%2分，＞70%3分；顯色度計(jì)分：細(xì)胞無顯色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。將兩分相加，0分為-，1～2分為+、3～4分為 ++，5～6分為 +++。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件分析系統(tǒng)，設(shè)計(jì)的兩樣本比較用秩和檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD44v6、MMP9在正常內(nèi)膜、不典型增生內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá) 不典型增生內(nèi)膜與正常內(nèi)膜相比，CD44v6與MMP9陽性率有上升趨勢，但無統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05），正常內(nèi)膜、不典型增生內(nèi)膜與子宮內(nèi)膜癌相比有顯著差異（P＜0.01）。見表1。

表1 CD44v6、MMP9在正常內(nèi)膜、不典型增生內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá) 例

2.2 子宮內(nèi)膜癌CD44v6、MMP9表達(dá)的臨床病理意義 CD44v6、MMP9的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌病理分級、臨床分期、組織類型無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。見表2。

表2 子宮內(nèi)膜癌MMP9、CD44v6表達(dá)的臨床病理意義 例（%）

2.3 CD44v6、MMP9的表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌中關(guān)系CD44v6、MMP9表達(dá)有明顯相關(guān)性，二者共同表達(dá)即顯示有較高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生。見表3。

表3 MMP9、CD44v6的表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌中關(guān)系 例

3討論

子宮內(nèi)膜癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，浸潤和轉(zhuǎn)移是影響其預(yù)后的重要因素。近年來研究表明，表面粘附分子（CD44）和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）在浸潤和轉(zhuǎn)移中起著重要作用。CD44是腫瘤轉(zhuǎn)移中一個(gè)重要的粘附分子，是一種高度異質(zhì)性跨膜單鏈糖蛋白，廣泛存在于淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞中，由結(jié)締組織、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、膠原細(xì)胞合成，參與細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)之間的特異性粘附[1]，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與移動(dòng)，參與淋巴細(xì)胞分化，活化成熟及“歸巢”以及促進(jìn)血管生成。人類CD44基因定位于11號染色體短臂上，包含至少20個(gè)外顯子，外顯子按其轉(zhuǎn)錄片段是否參與拼接分為兩種：一種為標(biāo)準(zhǔn)CD44型（即CD44s），另一種為變異型 CD44（即 CD44v）。多種研究表明，CD44變異體的不同表達(dá)方式在多種腫瘤的轉(zhuǎn)移中起著重要作用，其中以CD44v6在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移中關(guān)系密切，甚至認(rèn)為CD44v6可作為腫瘤獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)[2]。目前關(guān)于CD44v6定量與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系尚存在爭議，Ayhan等[3]認(rèn)為CD44v6表達(dá)與肌層浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等不良預(yù)后因素呈負(fù)相關(guān)，CD44v6表達(dá)陰性患者有較高的復(fù)發(fā)率及較短的無瘤生存期。曲群等[4]則報(bào)道CD44v6在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)率高達(dá)74%，與臨床分期和病理分級呈正相關(guān)，并隨腫瘤細(xì)胞侵襲肌層深度增加，陽性表達(dá)率增高。而Hoshimoto等[5]卻認(rèn)為CD44v6的表達(dá)與臨床病理參數(shù)無相關(guān)性，腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移是個(gè)復(fù)雜的過程。

MMP則是降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的主要酶類，是由結(jié)締組織、內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、膠原細(xì)胞合成和分泌，能分解纖維類膠原；同時(shí)也調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)生長因子和細(xì)胞因子的分泌。哺乳動(dòng)物中，迄今為止鑒定出24種MMP，各自降解不同的底物，MMP9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員之一，可降解細(xì)胞外多種基質(zhì)成分，其中包括基底膜的主要成分Ⅳ型膠原。腫瘤細(xì)胞表達(dá)MMP9與其侵襲轉(zhuǎn)移能力有關(guān)，其過度表達(dá)與人類許多惡性腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Larlaro[6]甚至認(rèn)為MMP9是子宮內(nèi)膜中的主要金屬蛋白酶，其過度表達(dá)隨子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)病理分期的升高、肌層浸潤程度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)，但其高表達(dá)機(jī)制不清。YU等[7]在乳腺癌的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)CD44和MMP9有協(xié)同作用，認(rèn)為CD44是MMP9在細(xì)胞表面的附著點(diǎn)，確保了CD44介導(dǎo)的腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的機(jī)制。

本研究結(jié)果顯示：MMP9、CD44v6的陽性表達(dá)與病理分級、臨床分期、肌層浸潤程度、組織型類別雖呈上升趨勢但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，二者之間有顯著差義。表明通過聯(lián)合檢測MMP9、CD44v6在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)，可以預(yù)測轉(zhuǎn)移潛能判斷預(yù)后，為臨床進(jìn)一步積極治療提供理論依據(jù)。

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