姜莉 鄭舒聰 萬偉國 蘇媁

(復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院風(fēng)濕科,*皮膚科免疫實驗室,上海 200040)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是以慢性、進(jìn)行性、對稱性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的異質(zhì)性、全身性疾病,是常見的風(fēng)濕病之一。在我國其患病率為0.3%～0.5%。RA患者的骨破壞多發(fā)生在發(fā)病后的1～2年內(nèi),故早期診斷、早期治療尤為重要。除1931年Cecil[1]發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor,RF)以外,近年來發(fā)現(xiàn)RA患者體內(nèi)存在多種自身抗體和(或)抗原,其中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,抗-CCP)及葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶(glucose-6-phophate isomerase,GPI)受到較多的關(guān)注。本研究比較和評估抗-CCP及GPI對RA診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 (1)RA組：RA患者136例,為2007年12月—2008年12月我院門診和住院患者,所有患者均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)RA的分類標(biāo)準(zhǔn),其中男性 24例,女性112例;年齡19～88歲,平均年齡 48±14歲。(2)非 RA 組：非RA其他風(fēng)濕病患者246例,包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡59例,骨關(guān)節(jié)炎46例,血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病40例,原發(fā)性干燥綜合征17例,硬皮病10例,皮肌炎/多肌炎21例,未分化結(jié)締組織病11例,混合性結(jié)締組織病7例,血管炎6例,成人Still病 2例,風(fēng)濕性多肌痛3例,痛風(fēng) 24例。其中男性69例,女性177例;年齡15～89歲,平均年齡45±17歲。(3)對照組：健康者 31例,其中男性 9例,女性 22例;年齡14～74歲,平均年齡43±15歲。

1.2 方法 取受試者靜脈血2～3 mL,分離血清,按說明書檢測要求保存至測試時。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測抗-CCP,試劑盒購自德國歐盟公司,以實驗試劑說明書標(biāo)明的5 U?L-1為臨界值。采用雙抗體夾心ELISA法檢測GPI,試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)品由上海北加生化試劑公司提供,臨界值為試劑盒標(biāo)定的 0.20 μ g?L-1。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,根據(jù)不同濃度時抗-CCP和GPI診斷RA的敏感度和特異度,繪制受試者工作特征曲線(ROC),比較兩者的曲線下面積(AUC)。計算抗-CCP和GPI診斷RA的敏感度、特異度、預(yù)測值和似然比,同時比較抗-CCP和GPI聯(lián)合診斷和平行診斷RA的敏感度和特異度。

2 結(jié) 果

2.1 抗-CCP和GPI診斷RA的 ROC曲線下面積(圖1)

圖1 抗-CCP與GPI診斷RA的ROC曲線

2.2 抗-CCP和GPI診斷RA的陽性率、陰性率抗-CCP在RA組的陽性率為90.4%(123/136),非RA組陽性率為7.3%(18/246),與RA組相比,P＜0.01。正常對照組陽性率為0%(0/31),與RA組相比,P＜0.01;與非RA組相比,P=0.12。GPI在RA組的陽性率為35.3%(48/136),非RA組陽性率為12.6%(31/246),與RA組相比,P＜0.01。正常對照組的陽性率為9.6%(3/31),與RA組相比。P＜0.01,與非RA組相比,P=0.64。

2.3 抗-CCP和GPI診斷 RA的敏感度、特異度、預(yù)測值及似然比比較(表1)

表1 抗-CCP與GPI對RA診斷的各項指標(biāo)的評價

抗-CCP診斷的敏感度和特異度均優(yōu)于GPI。GPI的陽性似然比2.8,抗-CCP的陽性似然比13.9,即抗-CCP陽性診斷患 RA的概率約是不患RA概率的14倍,其診斷價值高于GPI。

2.4 抗-CCP和GPI平行試驗及聯(lián)合試驗診斷RA的敏感度和特異度 抗-CCP+GPI聯(lián)合試驗(即抗-CCP與GPI均為陽性才視為診斷試驗陽性病例)與抗-CCP獨立檢驗相比,敏感度從90.4%下降至36.4%,而特異度則由93.5%提高至99.6%;與GPI獨立檢驗比較,抗-CCP+GPI聯(lián)合試驗的敏感度降低了約1%,而特異度提高了12%?？?CCP+GPI平行試驗(即抗-CCP與GPI兩者任何一項陽性即可視為診斷試驗陽性病例)與抗-CCP獨立檢驗相比其敏感度由 90.4%提高至 91.2%,但特異度由93.5%下降至81.6%;與GPI獨立檢驗比較,抗-CCP+GPI平行試驗的敏感度由35.3%上升至91.2%,特異度由87.7%下降至81.6%。

3 討 論

2000年Schellekens等[2]首先報道134例RA患者抗-CCP的敏感度為68%,特異度為98%。隨后Kroot等[3]報道抗-CCP對RF陰性的RA的診斷有補(bǔ)充價值。Nishimura等[4]分析1987—2007年的87項研究共30000多個檢驗結(jié)果證實：抗-CCP抗體診斷RA較RF更特異。國內(nèi)外諸多實驗證實抗-CCP是RA的特異性抗體,其敏感度和特異度均可以達(dá)到90%以上,本研究也進(jìn)一步證實了上述觀點。

2001年Schaller等[5]首次報道GPI與 RA相關(guān)。GPI含有40個堿基,其活化形式為二聚體,每個亞基由577個氨基酸組成。除了催化D-葡萄糖-6-磷酸鹽和D-果糖-6-磷酸鹽之間的相互轉(zhuǎn)化外,還具有細(xì)胞代謝和生長因子的活性。近年來,在GPI對于RA臨床診斷價值及GPI與抗-CCP相比有無優(yōu)越性等方面人們持不同觀點。張炯等[6]報道GPI與抗-CCP、RF-IgM之間存在良好的相關(guān)性,而Herve等[7]報道RA患者血清中GPI的濃度與干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。這說明差異可能來源于實驗方法的不同;也可能表明GPI不是 RA的特異性抗原。本研究結(jié)果顯示GPI在RA組的陽性率高于非RA組及健康對照組,其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,但它診斷RA的敏感性和特異性都低于抗-CCP。ROC曲線顯示抗-CCP的曲線下面積為0.958,GPI的曲線下面積為0.685,比較曲線下面積可見抗-CCP的測定對 RA的診斷價值高于GPI。

綜上所述,抗-CCP是診斷RA理想的實驗室指標(biāo),其敏感度和特異度均可達(dá)到90%以上。抗-CCP在RA患者中的陽性率及其敏感度和特異度均高于GPI,GPI的檢測對診斷 RA的臨床價值明顯遜于抗-CCP。在檢測抗-CCP的同時如加測GPI,與單測抗-CCP比較,聯(lián)合實驗可將其特異度從93.5%提升到99.6%,平行實驗使敏感度從90.4%提高到91.2%,但檢查費用增加約1倍,經(jīng)濟(jì)學(xué)效應(yīng)較差。

1 Cecil RL,Nicholls EE,Stainsby WJ.The etiology of rheumatoid arthritis[J].The American Journal of the M edical Sciences,1931,181(1)：12-24.

2 Schellekens G,Visser H,de Jong B,et al.T he diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide[J].Arthritis Rheum,2000,43(1)：155-163.

3 Kroot EJ,de Jong BA,van Leeuwen MA,et al.The prognostic value of anti-cyclic citrullinated peptide antibody in patients with recent-onset rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,2000,43(8)：1831-1835.

4 Nishimura K,Sugiyama D,Kogata Y,et al.Meta-analy sis：diagnostic accuracy of anti-cyclic citrullinated peptide antibody and rheumatoid facto r for rheumatoid arthritis[J].Ann Intern M ed,2007,146：797-808.

5 SchallerM,Burton DR,Ditzel HJ.Autoantibodies to GPI in rheumatoid arthritis：linkage between an animal model and hu-man disease[J].Nat Immunol,2001,2(8)：746-53.

6 張炯,鄒和建,陳宇明,等.抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶抗原對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷價值的比較[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志,2008,12(1)：33-35.

7 Herve CA,Wait R,Venables PJ.Glucose-6-phosphate isomerase is not a specific autoantigen in rheumatoid arthritis[J].Rheumatology(oxford),2003,42(3)：986-988.