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        中藥潰結(jié)靈配合柳氮磺胺吡啶對潰瘍性結(jié)腸炎患者防御素、一氧化氮及丙二醛表達的影響*

        2010-08-27 05:58:30劉子志馮春霞
        中國中醫(yī)急癥 2010年10期
        關(guān)鍵詞:煎劑丙二醛磺胺

        常 東 劉子志 李 鍵 馮春霞 李 輝 何 方

        中藥潰結(jié)靈配合柳氮磺胺吡啶對潰瘍性結(jié)腸炎患者防御素、一氧化氮及丙二醛表達的影響*

        常 東1劉子志2李 鍵3馮春霞3李 輝1何 方1

        目的觀察中藥潰結(jié)靈煎劑對潰瘍性結(jié)腸炎(UC)結(jié)腸組織HNP1-3、NO和MDA的影響,探討其治療機制。方法活動期UC(大腸濕熱證)患者隨機分為中西藥結(jié)合組(予潰結(jié)靈、SASP)與柳氮磺胺吡啶組(予SASP),檢測治療前后腸黏膜組織內(nèi)HNP1-3蛋白表達情況及結(jié)腸組織NO、MDA水平。結(jié)果隨著病變程度的增加,HNP1-3、NO和MDA的表達逐漸增強,三者呈明顯正相關(guān);兩組治療后HNP1-3、NO和MDA表達較治療前明顯減少,治療組的減少程度高于對照組。結(jié)論潰結(jié)靈配合SASP治療能使NO和MDA對組織的細(xì)胞毒性降低,從而達到治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用。

        潰瘍性結(jié)腸炎 防御素 一氧化氮 丙二醛 潰結(jié)靈

        1武警廣東邊防總隊醫(yī)院(深圳518029)

        2廣州中醫(yī)藥大學(xué)(廣州510405)

        3廣東省深圳市中醫(yī)院(深圳518033)

        *廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強省科研課題(No.2009044)

        目前認(rèn)為,免疫異常尤其是腸黏膜局部的免疫紊亂在潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的發(fā)病中占有非常重要的地位。近年來,隨著研究的深入,防御素家族在先天免疫中的作用受到廣泛關(guān)注。潰結(jié)靈是廣東省名老中醫(yī)勞紹賢教授治療UC(大腸濕熱證)的經(jīng)驗方,療效較好[1-2]。本研究觀察結(jié)腸組織中防御素(HNP1-3)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的表達,分析三者的相關(guān)性,探尋中藥潰UC的作用機制?,F(xiàn)報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 觀察對象60例均為近3年武警深圳醫(yī)院和深圳市中醫(yī)院的住院及門診患者,按文獻[3]確診。辨證屬大腸濕熱。隨機分為兩組各30例,另設(shè)正常組30例(健康武警部隊?wèi)?zhàn)士)。治療組男性19例,女性11例;年齡18~63歲,平均 (34.50±8.60)歲;病程 1~12年,平均(7.40±4.50)年;病情輕、中、重度各5、20、5例。對照組男性18例,女性12例;年齡 20~65歲,平均(33.20±7.40)歲;病程 1~13年,平均(8.40±4.20)年;病情輕、中、重度各 6、17、7例。各組資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

        1.2 治療方法 治療組予中藥潰結(jié)靈煎劑:救必應(yīng)30g,火炭母 30g,地榆 15g,三七 10g,敗醬草 30g。每日1劑,煎取藥汁200mL早晚分服。同時服用柳氮磺胺吡啶片(SASP),每次1g,每次4次。對照組予SASP片,每次1g,每日4次。兩組療程均為12個月。

        1.3 觀察方法 患者于治療前后常規(guī)腸道準(zhǔn)備后行結(jié)腸鏡檢查,于病變處取4塊組織,檢測HNP1-3、NO和MDA的表達。HNP1-3檢測采用免疫組化S-P法,NO檢測采用硝酸還原酶法,MDA檢測采用硫代巴比妥酸顯色法。

        2 結(jié)果

        2.1 各組HNP1-3、NO和MDA的表達與UC的病理分級比較 見表1。結(jié)果 顯示HNP1-3分別表達于中性粒細(xì)胞胞質(zhì)、腔腺之間,呈彌漫或顆粒性分布。HNP1-3在正常組無表達或少量表達,NO和MDA在正常組有少量表達;Ⅱ級和Ⅲ級與Ⅰ級比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P < 0.05 或 0.01)。正常組與病變組 HNP1-3、NO、MDA表達的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

        表1 各組HNP1-3、NO和MDA的表達情況與UC的病理分級(±s)

        表1 各組HNP1-3、NO和MDA的表達情況與UC的病理分級(±s)

        與Ⅱ級比較,*P <0.05;與Ⅲ級比較,△P <0.01;與Ⅲ級比較,▲P <0.05;與病變組各級比較,○P <0.01

        n HNP1-3(IA)NO(μmol/g)MDA(mmol/g)31.134 ±5.261*△52.886 ±10.123▲78.792 ± 14.675 18.369 ± 3.046○組別病變組Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級正常組60 15 39 6 30 183.63 ±46.41*△278.96 ±46.35▲410.42 ± 91.83 53.73 ±15.11○19.736 ±2.972*△34.964 ±4.356▲77.129 ± 4.854 10.795 ±2.415○

        2.2 兩組治療前后HNP1-3、NO、MDA表達比較 見表2。結(jié)果 表明,兩組治療后 HNP1-3、NO、MDA 表達明顯減少(P <0.01或0.05),其中治療組減少程度大于對照組。

        3 討論

        研究認(rèn)為,UC屬免疫性疾病,發(fā)病機制復(fù)雜,天然免疫受體的表達及功能異常能在免疫性疾病的發(fā)病過程中起重要作用[4]。防御素作為機體天然防御的屏障,在宿主天然免疫中起著重要的作用。HD亞型可介導(dǎo)炎癥反應(yīng),啟動機體免疫防御系統(tǒng)[5]。NO是一種相對穩(wěn)定的氣體自由基,可引起脂質(zhì)過氧化反應(yīng),產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化物,其中以MDA毒性作用最大,其含量反映機體脂質(zhì)過氧化的速率及強度,可間接反映組織受自由基損傷的程度[6],研究發(fā)現(xiàn),NO能影響多種免疫活性物質(zhì)的合成和分泌,激活和放大免疫/炎癥反應(yīng),形成瀑布效應(yīng),從而加重炎癥和組織損傷[7]。

        表2 治療組與對照組治療前后HNP1-3、NO、MDA表達情況(±s)

        表2 治療組與對照組治療前后HNP1-3、NO、MDA表達情況(±s)

        與本組治療前比較,☆P<0.05,☆☆P<0.01;與對照組治療后比較,★P < 0.05

        組別治療組(n=30)對照組(n=30)治療前治療后治療前治療后HNP1-3(IA)291.48 ± 42.60 180.69±46.19**△289.11 ± 43.53 226.27 ± 40.52*NO(μmol/g)35.86 ±4.24 12.24 ±2.20**△36.12 ±4.59 19.23 ±3.52*MDA(μmol/g)52.14 ± 10.25 24.61 ±3.30**△52.20 ± 10.13 37.11 ± 5.93*

        本研究發(fā)現(xiàn),隨著病變組分級程度的增高,UC患者腸黏膜HNP1-3表達逐漸增強,與NO、MDA呈明顯的正相關(guān);而正常組無表達或少量表達。由此可見,NO、MDA可作為UC病情程度的重要檢測檢測指標(biāo)。推測UC的發(fā)生發(fā)展與NO、MDA、HNP1-3的參與有著密切的聯(lián)系。HNP1-3分子具有趨化動力和趨化活性,可趨化單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,刺激成纖維細(xì)胞的增生,改變細(xì)胞膜的通透性,從而引起免疫調(diào)節(jié)功能失衡,誘發(fā)免疫反應(yīng)的增強,導(dǎo)致?lián)p傷性免疫因子的釋放增加,引起腸黏膜損害。NO和MDA均具有細(xì)胞毒性作用,同時也能協(xié)同防御素的細(xì)胞毒作用。因此可以認(rèn)為,HNP1-3可能在UC結(jié)腸組織炎癥損傷過程中起重要作用,NO和MDA也參與了UC的發(fā)生、發(fā)展,并可能與HNP1-3協(xié)同發(fā)揮作用。

        潰結(jié)靈煎劑具有清熱利濕、涼血解毒、理氣活祛瘀止痛之功效。本研究表明治療組治療后前NO和MDA表達明顯減少,情況優(yōu)于對照組,說明潰結(jié)靈煎劑配合SASP可明顯降低NO和MDA的表達。我們認(rèn)為,潰結(jié)靈配合SASP治療很可能是使NO和MDA對組織的細(xì)胞毒性降低,繼而達到治療UC(大腸濕熱證)的作用。

        [1]常東,勞紹賢,樊亞巍,等.潰結(jié)靈顆粒配合柳氮磺胺吡碇治療大腸濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎30例[J].遼寧中醫(yī)雜志,2007,34(11):1566 - 1567.

        [2]常東,黃志新,樊亞巍,等.潰結(jié)靈顆粒對大腸濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎患者Toll-like受體等指標(biāo)的影響 [J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2008,15(1):11 -13.

        [3]中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會消化系統(tǒng)疾病專業(yè)委員會.潰瘍性結(jié)腸炎中西醫(yī)結(jié)合診治方案(草案)[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2004,24(11):1052.

        [4]Heumann D, Roger T.Initial responses to endotoxins and gramnegtive[J].Clin Chim Acta,2002,323(1):59 -72

        [5]Wehkamp J, Schwind B, Herrlinger K R,et al.Innate immunity andcolonic inflammation:enhanced exp ression of ep ithelial alpha2de2fensins[J].Dig Dis Sci, 2002,47(6):1349-1355.

        [6]Serra J A,Marschoff E R,Dominguez R O,et al.Comparison of thedetermination of superoxide dismutase and antioxidant capacity inneurological patients using two different procedures[J].Clin Chim Acta,2000,301(1 -2):87 - 102.

        [7]Potoka D A, Nadler E P, Upperman J S, et al.Role of nitricoxide and peroxynitrite in gut barrier failure[J].World J Surg, 2002,26(7):806 - 811.

        Effect of Kuijieling Decociton plus Sulfasalazine on HNP1-3,NO and MDA expressions in Ulcerative Colitis

        CHANG Dong1, LIU Zi-zhi2, LI Jian3, et al
        1 Shenzhen Hospital of Armed Police(Shenzhen 518029)
        2 Guangzhou University of Chinese Medicine(Guangzhou 510405)
        3 Shenzhen TCM Hospital,Guangdong Province(Shenzhen 518033)

        Objective:To probe into the correlation among HNP1-3, NO and MDA and these expression in ulcerative colitis(UC)with colorectal damp heat syndrome and to observe the effect of Kuijieling Decoction in the above indices and to investigate the mechanism of Kuijieling Decociton on in UC.MethodsPatients of active UC with damp heat syndrome were randomly divided into the combination group with Kuijieling Decociton plus SASP and the control group with SASP.The HNP1-3protein expression was detected by S-P method.The NO and the MDA were detected by the nitrate reductase method and thiobarbituric acid (TBA)coloration.ResultsThe expression of HNP1-3was significantly correlated with that of NO and MDA.In the combination group and the control group, expressions such as HNP1-3,NO and MDA after the treatment were decreased significantly compared with those before the therapy.There was a remarkable difference between the combination group and the control group after treatment.ConclusionThe cytotoxicity with NO and MDA could be reduced by the combination therapy.Also,the rate and the intensity of perosidation could be decreased by this method.Moreover, the damage with histocyte could be reduced to the lowest degree so that the histocyte could be restored to treat the ulcerative colitis.

        Ulcerative colitis;HNP1-3;NO;MDA;Kuijieling Decoction

        R574.62

        B

        1004-745X(2010)10-1654-03

        2010-07-12)

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