賈 莉，部小霞，李建華，林貴高，鄢盛愷

（中日友好醫(yī)院 檢驗科，北京 100029）

前S1抗原與丙氨酸氨基轉移酶聯(lián)合檢測診斷乙型肝炎病毒復制

賈 莉，部小霞，李建華，林貴高，鄢盛愷

（中日友好醫(yī)院 檢驗科，北京 100029）

目的：探討前S1抗原與丙氨酸氨基轉移酶（ALT）在診斷乙型肝炎病毒復制中的臨床價值。方法：對150例乙型肝炎病毒s抗原（HBsAg）陽性的樣本分別進行血清前S1抗原、乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸（HBVDNA）和ALT的檢測，前S1抗原采用酶聯(lián)免疫吸附法，HBV-DNA采用實時熒光定量聚合酶鏈反應法，ALT采用全自動生化分析儀檢測。結果：150例樣本HBV-DNA均為陽性（≥103IU/ml），其中前S1抗原陽性116例，兩者符合率為77.3%。前S1抗原陽性的116例中95例（81.9%）表現(xiàn)為乙型肝炎病毒的高復制（HBV-DNA＞104IU/ml），同時51例ALT不升高的樣本中35例（68.6%）HBV-DNA＞104IU/ml。結論：前S1抗原是反映乙肝病毒復制及復制程度高低的指標，與血清ALT同時檢測可以指導臨床慢性乙型肝炎患者的定期復檢及療效判定。

乙型肝炎病毒；前S1抗原；病毒復制；乙型肝炎病毒-脫氧核糖核酸

Author's addressDepartment of Clinical Laboratory，China-Japan Friendship Hospital，Beijing 100029，China

對乙肝患者定期進行肝功能和乙肝病毒核酸（hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid，HBVDNA）定量檢測對判斷患者治療效果及其預后有重要意義，尤其是HBV-DNA的定量檢測能直觀、準確地反映出病毒在人體內的復制情況。但由于HBV-DNA定量通常采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）的方法進行，存在著檢查成本較高、耗時較長、檢測過程容易受污染等缺點，在基層實驗室的推廣應用受到一定的限制。前S1抗原 （pre-S1 antigen，pre-S1 Ag）是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）外膜蛋白的組成成分之一，由108或119個氨基酸殘基組成，其表面含有肝細胞受體，在HBV感染肝細胞和機體免疫應答方面起著重要作用。已有研究[1～5]報道前S1抗原可以反映乙肝病毒復制和傳染性的強弱，我們綜合分析了HBsAg陽性患者的血清前S1抗原、丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）和 HBV-DNA 的變化，對前S1抗原與ALT聯(lián)合檢測的臨床應用價值進行探討，以期能為慢性乙肝患者是否有必要開始治療、治療效果監(jiān)測及預后判斷方面提供一個更經(jīng)濟、快速、簡便的檢測指標。

1 對象與方法

1.1 研究對象

150份HBsAg陽性的樣本，來源于2009年4月～8月本院門診及住院患者空腹12h后的血清樣本，其中男84例，女66例，年齡19～81歲。

1.2 檢測方法

ALT采用RANDOX試劑速率法測定，質控品批號536UN，404UE，所用儀器為日立7600全自動生化分析儀，測定當日質控均合格（在±2SD之間），＜40IU/ml為正常參考范圍。

前S1抗原采用上海阿爾法生物技術有限公司試劑盒 （批號20090318），酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測，用ANTHOS酶標儀測定OD值；每一批次實驗的陰性對照、陽性對照都必須滿足試劑盒要求，結果判斷嚴格按照試劑盒說明進行。

HBV-DNA采用中山大學達安基因股份有限公司試劑盒 （批號 2009004）、Roche公司Lightcycler熒光定量PCR儀用實時熒光PCR方法檢測。每批測試均設陰性對照和弱陽性、陽性質控且質控結果合格（在±2SD之間），由試劑盒提供的 4 個濃度的標準工作品（1×104、1×105、1×106、1×107IU/ml） 計算出各標本的濃度值，＜1×103IU/ml為陰性參考范圍，≥1×103IU/ml為陽性，每批測試的線性相關系數(shù)均在 0.99≤｜r｜≤1。

表1 150例HBV-DNA陽性樣本中pre-S1 Ag和ALT的檢測結果

表3 116例pre-S1 Ag陽性的樣本中ALT和HBV-DNA的檢測結果

2 結果

150例HBsAg陽性的樣本HBV-DNA均為陽性（≥103IU/ml），其中前S1抗原和ALT的檢測結果見表1。前S1抗原和ALT不同檢測結果下乙肝病毒的復制情況見表2。116例前S1抗原陽性的樣本中ALT和HBV-DNA的檢測結果見表3。

3 討論

臨床對慢性乙肝患者經(jīng)常根據(jù)其轉氨酶的變化和乙肝核酸定量來判斷其療效及預后，因為ALT可反映肝細胞的損傷，核酸定量可直接反映病毒的復制情況。但ALT的升高不單純出現(xiàn)在由于病毒侵害造成的肝細胞受損的情況，其很容易受到諸多因素的影響，必須結合其它指標來判斷病毒的復制及患者的療效；基于PCR方法進行的核酸定量一般都費用較高，用時也較長，對實驗室的環(huán)境和設備要求較高，對于一些基層檢驗科室不太適合開展。血清前S1抗原測定方法簡單、快速、成本較低，通常是加上“乙肝五項”組合為“乙肝六項”，使臨床檢測更為方便。

表1示，150例HBV-DNA陽性（≥103IU/ml）的患者中，前S1抗原陽性的有116例，兩者有77.3%的符合率；表現(xiàn)為ALT增高且前S1抗原陽性的有65例，占43.3%，這些患者的病毒復制程度很高，其中92.3%的乙肝病毒載量＞104IU/ml（表2）。值得注意的是，在前S1抗原陽性的116例患者中51例（44%）并不表現(xiàn)為ALT的升高，但其中病毒高水平復制 （＞104IU/ml）者有 35例，占68.6%（表3）。說明有相當數(shù)量的HBsAg陽性的患者雖然其肝細胞受損尚不嚴重，ALT還表現(xiàn)為正常，但其體內乙肝病毒的復制仍存在，甚至是高載量的復制。提醒臨床醫(yī)生在患者ALT正常的情況下雖然可以不考慮干預治療，但其體內的高病毒復制要引起足夠重視。

表2 pre-S1 Ag和ALT不同檢測結果下乙肝病毒的復制情況

有學者報道[6]在用核苷類似物干預后的慢性乙肝患者中，其前S1抗原與HBV-DNA呈現(xiàn)出不一致的變化，本研究未對患者樣本進行詳細的病種及病程分組，相關的研究還有待進一步進行，但從本實驗結果中也看到在150例HBV-DNA陽性的患者中有34例（22.7%）是前S1抗原陰性的患者，所以若單獨從前S1抗原的結果判定病毒復制情況的話，顯然會有將近1/4的患者漏診；不過我們發(fā)現(xiàn)這部分患者中有15例（44.1%）表現(xiàn)出ALT 的升高（表 1），且高病毒復制（＞104IU/ml）的患者占66.7%（表2），分析可能是由于肝細胞早期損傷時ALT出現(xiàn)變化較早，前S1抗原的反應出現(xiàn)較晚，或是前S1抗原檢測方法的靈敏度所限造成，所以有必要同時進行ALT的檢測，同時檢測血清前S1抗原和ALT水平能幫助我們更好地分析患者體內病毒的復制情況。

HBV的 e抗原（HBeAg）與病毒 Dane顆粒、HBV-DNA具有伴隨關系。但是，當HBV的前核心區(qū)發(fā)生突變時，HBeAg無法表達，表現(xiàn)為血清HBeAg或抗HBe測定陰性，而前 S1抗原作為病毒復制指標，能彌補HBeAg變異造成的誤診，是較 HBeAg 更為敏感的病毒復制指標[3，7，8]。 本研究結果前S1抗原與HBV-DNA的陽性符合率為77.3%，這與文獻報道基本一致[8～10]，且其陽性者病毒復制程度大都較高，表明前S1抗原可以作為乙肝病毒感染和復制的一個很好的輔助指標；而且其檢測方法相對簡單、快速、經(jīng)濟，比HBV-DNA更易在臨床尤其是在不具備定量PCR實驗室的醫(yī)院進行推廣，再結合血清ALT的檢測可在很大程度上為臨床提供患者體內病毒復制的基本情況，幫助判斷患者療效及預后，亦為長期治療的慢性乙肝患者節(jié)約了醫(yī)藥費，應得到臨床的足夠重視與應用。

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Clinical value of detection of pre-S1 antigen and alanine aminotransferase in patients with hepatitis Bvirus and the virus replication

JIA Li，BU Xiao-xia，LI Jian-hua，et al//Journal of China-Japan Friendship Hospital，2010 Feb，24（1）：15-17

Objective：To investigate the clinical significance of pre-S1 antigen （pre-S1 Ag）of hepatitis B virus（HBV）and alanine aminotransferase （ALT）detection on the diagnosis of virus replication.Methods：Pre-S1 Ag，HBV-DNA and ALT of 150 serum samples，which HBsAg were positive，were detected by ELISA，real-time fluorescence polymerase chain reaction assay and auto-biochemical analysis respectively.Results：One hundred and sixteen samples were pre-S1 Ag positive in all samples and were HBV-DNA positive（≥103IU/ml），the coincident rate of pre-S1 Ag and HBV-DNA was 77.3%.Among the 116 pre-S1 Ag positive samples，95 of them （81.9%）had the higher level of HBV virus replication （HBV-DNA＞104IU/ml）.Fifty one samples had the common level of serum ALT，among them 35 samples were HBV-DNA＞104IU/ml.Conclusion：Pre-S1 Ag is a good indicator of HBV virus replication and the results which combined with serum ALT will guide the following up of chronic hepatitis B patients who need retest virus replication in a long time.

hepatitis B virus；pre-S1 antigen；virus replication；hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid

R512.6+2；R446.61

A

1001-0025（2010）01-0015-03

10.3969/j.issn.1001-0025.2010.01.004

賈 莉（1969-），女，主管技師。

2009-12-14

2010-01-06