趙金輝,王曉巖

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院,北京 100006;2.北京市延慶縣中心血站,北京 102100)

605份血液培養(yǎng)的細(xì)菌分布情況及耐藥結(jié)果分析

趙金輝1*,王曉巖2

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院,北京 100006;2.北京市延慶縣中心血站,北京 102100)

*通訊作者

菌血癥、敗血癥目前仍是臨床感染性疾病加重乃至死亡的主要原因,血培養(yǎng)陽性是其確診的重要依據(jù),其陽性率的高低及藥敏試驗(yàn)的準(zhǔn)確性對臨床治療有很大影響,本文通過分析我院2006-2008年血培養(yǎng)致病菌的種類及藥物敏感率,以了解血培養(yǎng)致病菌的分布及藥敏情況,為感染性疾病的診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2006年1月-2008年12月我院臨床各科室懷疑菌(敗)血癥患者的血標(biāo)本605份,共培養(yǎng)出病原菌52份,占總標(biāo)本數(shù)的8.6%,其中革蘭陽性菌20株,革蘭陰性菌32株。

1.2 儀器與材料 儀器為美國BACTEC9050全自動(dòng)血培養(yǎng)儀,材料為含樹脂需養(yǎng)瓶和含溶血素厭氧培養(yǎng)瓶(可檢測血液中的厭氧微生物及真菌等),用美國DADE BEHRING MicroScan Walk Away40SI全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對陽性血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行菌種鑒定和藥物敏感試驗(yàn)。

1.3 方法 用美國BD公司的BACTEC 9050血培養(yǎng)儀采用連續(xù)熒光法快速檢測血液及體液中細(xì)菌。采集成人肘靜脈血液10-20 ml,無菌操作分別注入含樹脂需氧瓶和含溶血素厭氧瓶,新生兒血采集5-10 ml,分別注入兒童瓶和含溶血素厭氧瓶,把標(biāo)本放入儀器內(nèi),儀器每10分鐘自動(dòng)檢測一次,放置5天后。如無菌生長,儀器自動(dòng)報(bào)結(jié)果:陰性。如果有標(biāo)本報(bào)陽性結(jié)果,立即取出陽性瓶,涂片,進(jìn)行革蘭氏染色,和分離培養(yǎng)。并告知臨床主管大夫涂片結(jié)果。把菌株接種于美國 DADEMicroScanW-alyAway40SI儀器配套的復(fù)合板,進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏的檢測。用標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,銅綠假單胞菌ATCC27853,做質(zhì)控。對產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的菌株,確證實(shí)驗(yàn)參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)2005年版藥敏實(shí)驗(yàn)操作,用標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC35218做質(zhì)控。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的確證實(shí)驗(yàn)參照NCCLS2005年版藥敏實(shí)驗(yàn)操作,用敏感菌株ATCC29213用耐藥菌株ATCC433300做質(zhì)控菌株。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽性率及其細(xì)菌構(gòu)成 605份血培養(yǎng)標(biāo)本中培養(yǎng)出52株病原菌,陽性率為8.6%。其中,革蘭陽性球菌20株占總數(shù)的38.5%,其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)占很高比例。革蘭陰性桿菌32株占總數(shù)的61.5%,最常見的菌是大腸埃希菌和產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌(ESBLs+)。分布見表1。

表1 52株病原菌的分布

2.2 藥敏結(jié)果分析 陰性病原菌的比例占病原菌總數(shù)的61.5%,其中大腸埃希菌19例,對所有抗生素的耐藥性很低,特別是對亞胺培南的敏感率是100%,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的大腸埃希菌7株,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的肺炎克雷伯氏菌2株,占有很高比例,于國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道一致,是菌血癥和敗血癥感染中的主要病源菌。此菌對派拉西林/他唑巴坦、氨芐青霉素/舒巴坦、環(huán)丙沙星的耐藥率已經(jīng)超過50%,對亞胺培南的耐藥率是11.1%,耐藥性低。陽性菌所占病原菌總數(shù)的38.5%,低于其它文獻(xiàn)報(bào)道。其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)在陽性菌中占很高比例,此菌對青霉素類、碳青霉烯類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素,多種抗生素多重耐藥。利福平、復(fù)方新諾明和環(huán)丙沙星耐藥率都低于30%,至今沒發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的菌株。見表2。

表2 病原菌的耐藥率(%)

3 討論

從605份標(biāo)本中共檢出52份陽性標(biāo)本,其中新生兒科28例,產(chǎn)科20例,其它科 4例,由于大腸埃希菌是陰道和腸道的定植菌,也是產(chǎn)婦在生產(chǎn)過程中感染的常見菌,在生產(chǎn)的過程中更易造成新生兒的感染。所以在病源菌中占有很高的比例。陰性桿菌對各種抗生素的耐藥情況不高,最高的是三代頭孢(13%),對亞胺培南的耐藥率是0%。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的大腸埃希菌也占有很高的比例,所以氨芐青霉素、三代頭孢、氨曲南即使體外藥敏敏感,對臨床也要報(bào)耐藥[1]。對氨芐青霉素/舒巴坦(55.5%),派拉西林/他唑巴坦(55.5%),環(huán)丙沙星(66.6%),都已經(jīng)超過 50%,亞胺培南(11.1%)。在70年代末和80年代初,頭孢三代和單環(huán)菌素等新一代抗生素在臨床大量應(yīng)用,初期對革蘭氏陰性桿菌很有效,但在1982年在英國利物浦一家醫(yī)院的新生兒病房發(fā)生了由質(zhì)粒介導(dǎo)的對頭孢他啶耐藥的產(chǎn)酸克雷伯菌株的爆發(fā)流行,從此,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的研究受到關(guān)注。大量文獻(xiàn)報(bào)道我國是以CTX-M型流行為主,這可能與我國大量生產(chǎn)和使用頭孢噻肟類抗生素有關(guān)[1]。我院用三代頭孢作為常規(guī)用藥,也是造成產(chǎn)酶菌株升高的原因,它是由質(zhì)粒介導(dǎo)的能水解第三代頭孢菌素和氨曲南,其耐藥基因可通過結(jié)合轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式在細(xì)菌間擴(kuò)散易造成醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率高于金黃色葡萄球菌與國內(nèi)報(bào)道一致[2],凝固酶陰性葡萄球菌作為條件致病菌以前認(rèn)為是共棲于皮膚黏膜的非致病菌,但近年來報(bào)道由凝固酶陰性葡萄球菌引起的感染逐年增多,特別是靜脈導(dǎo)管等醫(yī)用植入裝置的使用,使此菌成為具有重要意義的醫(yī)院感染菌[3]。革蘭陽性球菌(不包括MRCNS)的耐藥率:青霉素(66.6%)、氨芐青霉素(66.6%)、苯唑西林(33.3%)、紅霉素(40%)、克林霉素(33.3%)、頭孢唑啉(66.6%)、耐藥率超過50%,萬古霉素(0%)。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的耐藥率:此菌對青霉素類、碳青霉烯類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素,多種抗生素多重耐藥。復(fù)方新諾明(25%)、環(huán)丙沙星(25%)、氯霉素(25%)、萬古霉素(0%)、利福平(25%)。分析我院兩年的血培養(yǎng)陽性菌的藥敏情況凝固酶陰性葡萄球菌對多種抗生素耐藥性高,特別是青霉素類的和頭孢菌素類的。陰性桿菌(不包括產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的陰性桿菌)對抗生素耐藥性低。主要應(yīng)該減少產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的產(chǎn)生。我院現(xiàn)在存在抗生素使用不規(guī)范,劑量大等問題,也是耐藥菌株升高的主要原因。建議醫(yī)院建立細(xì)菌流行病學(xué)和藥敏資料的跟蹤機(jī)制,根據(jù)我院婦產(chǎn)?？频奶攸c(diǎn),建立本院的抗感染藥物應(yīng)用指南,在致病菌尚未明確或病情危重時(shí)根據(jù)上述資料進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性的治療,待病原菌明確后在依藥敏結(jié)果合理選用感染藥物[4]。所以快速、準(zhǔn)確的血培養(yǎng)結(jié)果對臨床大夫正確選用合理的抗生素起到非常重要的作用,可以減少耐藥菌株的產(chǎn)生,使病人得到快速、合理治療,減少病人痛苦,降低病人費(fèi)用。

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