吳文靜,程勁松,王 慧,柯元南,鄭金剛*

(1.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 研 究生院,北京 100730;2.中日友好醫(yī)院 心 內(nèi)科,北京 100029)

急性非ST段抬高心肌梗死患者血漿ADAMTS-7水平研究

吳文靜1,2,程勁松1,2,王 慧1,2,柯元南2,鄭金剛2*

(1.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 研 究生院,北京 100730;2.中日友好醫(yī)院 心 內(nèi)科,北京 100029)

目的檢測(cè)急性非ST段抬高心肌梗死(non ST elevated myocardial infarction,NSTEMI)患者血漿ADAMTS-7水平的變化,以探索ADAMTS-7與心肌缺血的關(guān)系。方法選擇86例確診NSTEMI患者及52例通過(guò)冠脈造影排除冠心病患者,取外周血離心、分離血漿,使用ELISA法檢測(cè)血漿ADAMTS-7水平。結(jié)果兩組受試者在年齡、吸煙史、高血壓病史、冠心病家族史、血脂水平、體重指數(shù)方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;NSTEMI組男性患者居多,有糖尿病史患者明顯高于對(duì)照組(P＜0.05);NSTEMI組與對(duì)照組血漿ADAMTS-7水平分別為(37.38±19.61)ng/ml、(18.54±10.51)ng/ml,NSTEMI組較對(duì)照組明顯升高,與高敏C反應(yīng)蛋白、TIMI評(píng)分變化一致,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論血漿ADAMTS-7水平可能作為NSTEMI患者早期識(shí)別指標(biāo)之一,血漿ADAMTS-7可與高敏C反應(yīng)蛋白、TIMI評(píng)分一起對(duì)判斷預(yù)后提供幫助。

ADAMTS-7;NSTEMI;心肌缺血

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1396)

ADAMTS(a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs)意為含Ⅰ型血小板結(jié)合蛋白基序(TSP)的解聚蛋白樣金屬蛋白酶,是繼基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs后新發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)Zn2+依賴(lài)的分泌型金屬蛋白酶。關(guān)于ADAMTSs家族的研究才剛剛開(kāi)始,已有研究表明其參與了極其復(fù)雜多樣的生物學(xué)和疾病過(guò)程,與疾病有著密切的關(guān)系,可能在體內(nèi)多種疾病中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用,也可能為疾病的診斷和治療提供新的靶點(diǎn)。其中ADAMTS-7是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的直接與軟骨基質(zhì)蛋白(Cartilage oligomeric matrix protein COMP)結(jié)合并降解COMP的蛋白酶[1],我們最近研究發(fā)現(xiàn)ADAMTS-7參與了血管損傷后內(nèi)膜的增生[2],但其與心血管疾病的關(guān)系并不明確,本研究擬進(jìn)一步研究ADAMTS-7表達(dá)與心肌缺血的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 觀察對(duì)象 病例選擇2008年12月-2009年2月收治的疑似缺血性胸痛的患者138例,男性75例,女性63例,年齡(64.33±10.97)(40-82)歲,開(kāi)始出現(xiàn)胸痛癥狀至采血(302.63±282.28)小時(shí)。每位患者采血6 ml,置于使用EDTA抗凝的采血管中保存于4℃,半小時(shí)之內(nèi)以1 000 g離心15分鐘,將上清取出,保存于-80℃?zhèn)錂z。本研究用冠脈造影法確定病例分組,NSTEMI診斷根據(jù)《2007ACC/AHA不穩(wěn)定型心絞痛與非ST段抬高心肌梗死治療指南》:至少有一項(xiàng)心肌生化標(biāo)志物(優(yōu)選肌鈣蛋白)升高超過(guò)99%正常參考值上限,同時(shí)至少有下列一項(xiàng)改變①有典型心肌缺血癥狀②心電圖改變提示新發(fā)生的心肌缺血。所有患者簽署了知情同意書(shū),研究方案經(jīng)過(guò)中日友好醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 血漿ADAMTS-7檢測(cè) 通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),試劑盒購(gòu)自中美合資?武漢中美科技有限公司(USENLIFE),靈敏度為0.039 ng/ml,測(cè)量線(xiàn)性范圍0.156-10 ng/ml,酶標(biāo)儀為Molecular Devices公司生產(chǎn)的spectramax M2型。試驗(yàn)步驟按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t檢驗(yàn),率的比較采用 χ2檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 入選患者基本情況如表1所示,兩組患者在性別、糖尿病史、高敏C反應(yīng)蛋白、TIMI評(píng)分上有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。

表1 患者基本情況

2.2 NSTEMI組及對(duì)照組的ADAMTS-7水平比較NSTEMI組與對(duì)照組血漿ADAMTS-7水平分別為(37.38±19.61)ng/ml、(18.54 ±10.51)ng/ml,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。(見(jiàn)圖1)

3 討論

基質(zhì)的合成和降解參與了一系列生理和病理生理過(guò)程,包括血管生成、細(xì)胞凋亡、腫瘤轉(zhuǎn)移、炎癥發(fā)生等,而降解基質(zhì)的蛋白酶在其中起著關(guān)鍵性的作用。目前已知的參與基質(zhì)重構(gòu)的蛋白水解酶包括絲氨酸蛋白酶、酪氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。ADAMTSs家族與解聚蛋白樣金屬蛋白酶ADAMs及基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs同屬于金屬蛋白酶家族,其主要結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是羧基端含有至少一個(gè)TSP基序。ADAMTSs屬于分泌型蛋白酶,可由巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞合成和分泌,通常結(jié)合于基質(zhì)上。目前人類(lèi)已找到19個(gè)ADAMTSs成員,部分成員的特異性底物及重要功能正逐步被人們認(rèn)識(shí),如ADAMTS-1可能通過(guò)裂解ECM蛋白聚糖加速動(dòng)脈粥樣硬化形成[2]。ADAMTS-1的227Pro多態(tài)性與冠心病事件增加2倍相關(guān)[3]。ADAMTS-4和 -8也被認(rèn)為是人類(lèi)粥樣硬化斑塊中富含巨噬細(xì)胞區(qū)域的炎性調(diào)節(jié)酶[4]。其中ADAMTS-7定位于人15號(hào)染色體,人和小鼠的ADAMTS-7蛋白分別包含1686和1641個(gè)氨基酸,分子量大小大約為181和178KD。它可以經(jīng)過(guò)多次的弗林蛋白酶依賴(lài)的剪切過(guò)程,無(wú)論全長(zhǎng)還是剪切形式均表現(xiàn)出水解活性。ADAMTS-7在人心臟、胰腺、腎臟、軟骨、骨骼肌和肝臟中均有高表達(dá),呈現(xiàn)分布的廣泛性,ADAMTS-7是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的直接與COMP結(jié)合并降解COMP的蛋白酶。

圖1 兩組受試者血漿ADAMTS-7水平

急性冠脈綜合征的發(fā)生多是在不穩(wěn)定斑塊出現(xiàn)裂縫、糜爛及破裂的基礎(chǔ)上,血管內(nèi)血栓形成以至管腔閉塞所致。目前認(rèn)為斑塊的生物學(xué)特征是決定其穩(wěn)定性的主要因素。外力對(duì)斑塊的作用主要由纖維帽承受,纖維帽變薄是不穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的特征之一。纖維帽由膠原纖維、蛋白多糖、彈性蛋白等組成。纖維帽的完整性及對(duì)破裂的抵抗力主要靠細(xì)胞外基質(zhì)來(lái)維持,最主要的是基質(zhì)中的膠原纖維[5]?，F(xiàn)在認(rèn)為COMP是人類(lèi)血管細(xì)胞外基質(zhì)的組成成分,與平滑肌細(xì)胞的黏附和趨觸性相關(guān)[6],其可以通過(guò)結(jié)合在其他細(xì)胞外基質(zhì)成分,如Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ型膠原和胞外基質(zhì)蛋白來(lái)維持細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)穩(wěn)態(tài)[7]。Hala′sz等認(rèn)為COMP是膠原原纖維生成過(guò)程的催化劑[8]。

本研究首次比較了NSTEMI與對(duì)照組之間血循環(huán)中ADAMTS-7表達(dá)的區(qū)別,發(fā)現(xiàn)NSTEMI組較對(duì)照組循環(huán)ADAMTS-7水平顯著升高(分別為37.38±19.61 ng/ml、18.54 ±10.51 ng/ml,P＜0.05)。NSTEMI組高敏C反應(yīng)蛋白水平與TIMI評(píng)分均明顯高于對(duì)照組,與ADAMTS-7變化趨勢(shì)一致。已知高敏C反應(yīng)蛋白水平與冠心病的預(yù)后有密切關(guān)系,提示ADAMTS-7的水平與NSTEMI患者遠(yuǎn)期預(yù)后密切相關(guān)。心臟嚴(yán)重缺血時(shí)ADAMTS-7表達(dá)顯著升高的原因尚不明確,可能與以下機(jī)制有關(guān):(1)已知ADAMTS-7作為基質(zhì)降解酶,可能是引起動(dòng)脈斑塊破裂的原因[5-8],從而引起心肌缺血;(2)心臟缺血后,缺血區(qū)ADAMTS-7表達(dá)升高,引起心臟的重構(gòu)。因此,進(jìn)一步分析ADAMTS-7表達(dá)升高的原因?qū)υ贜STEMI患者的診治可能具有重要意義。

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PlasmaADAMTS-7 in acute non ST elevated myocardial infarction patients

WU Wen-jing1,2,CHENGJin-song1,2,WANG Hui1,2,et al.(1.Graduate school of Peking Union Medical College&Chinese Academy of Medical Science,Beijing100730,China;2.China-Japan FriendshipHospital,department of Cardiology,Beijing100029,China)

ObjectiveDetecting level of plasma ADAMTS-7 in patients suffering from acute non ST elevatedmyocardial infarc-tion to explore the relationship between ADAMTS-7 and myocardial ischemia.MethodsELISA was used to measure level of plasma ADAMTS-7 in 86 NSTEMI patients and 52 control patientswithout coronary heart disease confirmed by coronary angiography.ResultsTwo groups had no difference in age,smoking history,hypertension history,coronary heart disease family history,serum lipid level and body mass index.There were more male patients in ADAMTS-7 group and more patients in this group had diabetes.Plasma ADAMTS-7 in NSTEMI patients and control groupwere(37.38±19.61)ng/ml and(18.54±10.51)ng/ml respectively.NSTEMI had significantly higher ADAMTS-7 level,higher high-sensitivity C reactive protein level andhigher TIMI score.(P＜0.05).ConclusionADAMTS-7 may be a new index for the early recognizing of NSTEMI patients.It can help to evaluate prognosis together with high-sensitivity C reactive protein and TIMI score.

ADAMTS-7;NSTEMI;myocardial ischemia

R541.4

A

1007-4287(2010)09-1396-03

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30770865;30670849)

*通訊作者

吳文靜(1979-),女,碩士,主要從事冠心病發(fā)病機(jī)制研究;鄭金剛(1970-),男,副主任醫(yī)師,博士后,主要從事冠心病介入研究。

2009-12-04)