孫秋艷
Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成員,Survivin具有腫瘤特異性,只表達于腫瘤和胚胎組織,且與腫瘤細胞的分化增殖及浸潤轉移密切相關[1]。幽門螺桿菌感染是慢性活動性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界衛(wèi)生組織/國際癌癥研究機構 (WHO/IARC)將幽門螺桿菌定為Ⅰ類致癌原[2]。但是,國內很少報道Survivin蛋白在腫瘤中的表達及與Hp感染之間的聯(lián)系。筆者對胃癌組織中Survivin蛋白的表達應用免疫組化方法進行檢測及研究其與HP感染之間的聯(lián)系,現(xiàn)報道如下。
1.1 一般資料 采集我院2009年3月至2010年2月行手術切除并經(jīng)病理證實收集的胃癌標本50例,50例患者術前未行放、化療。所有標本采用40 g/L中性甲醛進行固定,石蠟包埋,4μm厚切片,HE染色及復核病理診斷,同時按照WHO標準進行分級。所有患者中男36例,女14例,年齡36~79歲,平均59.9歲;中高分化18例,低分化32例;有淋巴轉移38例。癌組織浸潤至黏膜下層及以上5例,浸潤至肌層14例,浸潤至漿膜層及以下31例。
1.2 檢測試劑及方法 采用免疫組化SP法檢測Survivin蛋白表達。羊抗人Survivin(1:150)(美國 Santa cruz公司生產),羊SP試劑盒(北京中杉金橋生物工程有限公司生產)。用已知胃癌陽性切片作陽性對照,陰性對照省略一抗,用封閉血清代替。
1.3 結果評定[3]Survivin陽性染色為棕黃色顆粒,定位于細胞漿或細胞核,部分細胞膜少量表達。每張切片隨機選取10個高倍視野(×400倍),每個高倍視野計數(shù)100個癌細胞,觀察陽性細胞染色強度,并計數(shù)陽性細胞百分數(shù)。首先按染色強度計分:0分:基本不著色1分;著色淡;2分:棕黃色;3分:深棕黃色或棕褐色。其次按著色細胞占計數(shù)細胞百分率:0分:≤5%;1分:6% ~30%;2分:31% ~70%;3分:≥71%;將每張切片的兩種方法分數(shù)相加,0分:陰性(-);1~2分:弱陽性(+);3~4分:中陽性(2+);5~6分:強陽性(3+)。
1.4 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 11.5統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析,計數(shù)資料采用χ2檢驗。
2.1 50例胃癌組織中有37例Survivin表達陽性,其中弱陽性8例,中陽性14例,強陽性15例,陽性表達率為74.0(37/50),癌旁組織有21例表達陽性,其中弱陽性13例,中陽性8例,無強陽性,陽性表達率為42.0%(21/50)。胃癌組織Survivin的陽性表達率高于癌旁組織,二者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);胃癌組織中Survivin的表達強度明顯高于癌旁組織(P<0.05)。
2.2 Survivin蛋白表達與胃癌臨床病理特征間的關系
2.2.1 Survivin蛋白表達與患者性別關系 男患者中陽性表達率為80.6%(28/36),女患者為78.6%(11/14),在性別中陽性表達無明顯差異(P>0.05)。
2.2.2 Survivin蛋白表達與臨床分期、浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移的關系 臨床分期中,Ⅰ~Ⅱ陽性表達率為61.5%(16/26),Ⅲ ~Ⅳ為87.5%(21/24);浸潤深度中,黏膜下層及以上患者的陽性表達率為40.0%(2/5),肌層為64.2%(9/14),漿膜層及以下為83.9%(26/31);分化程度中,中高分化中陽性表達率為50%(9/18),低分化為87.5%(28/32);有淋巴結轉移的陽性表達率為84.2%(32/38),無有淋巴結轉移的陽性表達率為50%(6/12),可見,Survivin蛋白表達與臨床分期、浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移有明顯關聯(lián)(P<0.05)。
2.3 Survivin蛋白表達與Hp感染之間的關系 Hp陽性胃癌組織Survivin蛋白的陽性表達率為88.2%(30/34),Hp陰性組胃癌組織中Survivin蛋白的陽性表達率為43.8%(7/16),HP陽性組胃癌組織中Survivin蛋白表達強度顯著高于Hp感染陰性組(P<0.05)。
Survivin是IAPs家族中最小成員,它在正常分化成熟的組織中不表達,而廣泛表達于人類常見的腫瘤組織。它可促進細胞的惡性轉化、抑制細胞凋亡、促進細胞增殖、參與調節(jié)細胞的有絲分裂,并可能參與血管生成,對腫瘤的浸潤、轉移可能起重要作用。Survivin在幾乎所有被檢測過的惡性腫瘤組織中有不同程度的表達,表達率為30% ~100%[4],且Survivin的表達與多種腫瘤的生物學特性和(或)疾病分期有關。正常胃黏膜組織、淺表型胃炎組織中不表達,提示Survivin蛋白的表達發(fā)生在胃癌惡性轉化的早期和進展期,表明Survivin蛋白與胃癌的發(fā)生發(fā)展有關。Survivin蛋白在胃癌組織中高表達,相應癌旁組織中無表達。本研究采用免疫組化法檢測了胃癌組織中Survivin的表達,結果顯示陽性染色均定位于胃癌細胞漿中,遠癌黏膜組織中Survivin不表達,胃癌組織中Survivin的陽性表達率明顯高于癌旁組織,提示Survivin蛋白的表達與胃癌的發(fā)生有關。Survivin蛋白表達與腫瘤預后、淋巴結轉移、組織學分級無關。根據(jù)筆者研究,臨床分期晚者,浸潤深度深者,分化程度低者及淋巴結轉移者,Survivin蛋白的表達增強(P<0.05),提示Survivin蛋白與胃癌細胞生物學行為及發(fā)展有關。
在胃癌的形成過程中,Hp感染可明顯增加胃黏膜增殖。Hp感染可引起胃黏膜損傷,同時可引起DNA的損傷及基因突變。Hp感染可上調胃黏膜組織中ras-p21和p53基因的表達,參與胃癌的發(fā)生發(fā)展。在腸化生的過程中Hp可誘導細胞凋亡,但在不典型增生過程中,Hp可以抑制細胞凋亡[5]。Hp感染與Survivin的表達之間的關系,目前尚缺乏研究。胃癌組織中Hp感染陽性組Survivivn蛋白的表達顯著高于陰性組,提示Survivin蛋白在胃癌組織中的表達與Hp感染有關,兩者在胃癌的發(fā)生中可能有協(xié)同作用。Hp陽性胃癌組織中Survivin蛋白的陽性表達率高于Hp陰性組,Hp陽性胃癌組織中Survivin蛋白的表達強度顯著高于Hp陰性者,提示Hp感染可促使胃癌組織Survivin蛋白的表達水平的增高。
綜上所述,病理上Survivin蛋白表達在胃癌中的發(fā)生發(fā)展中有著非常重要的意義,同時胃癌組織中Survivin蛋白的表達可因幽門螺桿菌感染而增強。
[1]趙君寧,張振玉,孫士其,等.Survivin在胃癌中的表達及其與COX-2相關性的研究.中國癌癥雜志,2004,14(1):15-18.
[2]李鳳朝,孔慶兗,楊雪梅.Survivin在胃癌中的表達及其與細胞凋亡、p53的關系.實用腫瘤學雜志,2004,18(6):451-453.
[3]呂曉君,吳東瑛,楊琳,等.胃癌前病變及胃癌組織中survivin和caspase-3蛋白表達的意義.世界華人消化雜志,2005,13(16):1951-1955.
[4]李美梁.胃鏡活檢標本診斷胃癌的臨床病理分析.醫(yī)學信息,2010,23(3):765-766.
[5]Okada E,Murai K ,Isizawa S,et al.Survivin expression in tumor cell nuclei is predictive of a favorable prognosis in gastric cancer patients.Cancer Lett,2001,163(1):109-116.