王 鵬 王 安 李麗娟
色氨酸(tryptophan,Trp)于1902年由Hokinst首先從酪蛋白中分離獲得,化學(xué)名稱為α-氨基-β-吲哚丙酸,分子式C11H12N2O2,色氨酸是動(dòng)物維持和生長(zhǎng)的必需氨基酸,是構(gòu)成機(jī)體蛋白質(zhì)的基本組成成分之一,具有多種生理功能,但動(dòng)物體內(nèi)不能合成,需從飼料中供給。在玉米-豆粕型配合日糧中,色氨酸較易缺乏,需要額外添加(Goihl,1996)。色氨酸(Trp)的作用是1910年以玉米蛋白質(zhì)飼喂白鼠,生長(zhǎng)發(fā)育受阻,添加色氨酸后提高了生長(zhǎng)速度才明確的。色氨酸在玉米飼料中為第二限制性氨基酸,在大豆餅飼料中為第三限制性氨基酸。我國(guó)傳統(tǒng)的玉米-豆粕(餅)型為主的肉雞配合飼料中,色氨酸較易缺乏,故色氨酸被認(rèn)定為是繼蛋氨酸、賴氨酸之后的第三限制性氨基酸。
近年來,國(guó)內(nèi)外在肉雞對(duì)蛋氨酸、賴氨酸的需要量方面的研究較多,對(duì)色氨酸的研究甚少,但在國(guó)外的某些發(fā)達(dá)國(guó)家(如日本),色氨酸已廣泛地用于畜禽飼料。本文通過在0~3周齡AA肉仔雞日糧中添加不同水平的色氨酸來研究探討對(duì)其生長(zhǎng)性能及血液生化指標(biāo)的影響,確定玉米-豆粕型飼糧飼喂的AA肉仔雞色氨酸最適添加量,為實(shí)際生產(chǎn)提供理論依據(jù),從而加快國(guó)內(nèi)色氨酸添加劑的應(yīng)用步伐,推動(dòng)飼料工業(yè)和畜牧業(yè)的發(fā)展。
色氨酸(純度99.8%,購(gòu)于華達(dá)飼料公司),1日齡AA肉仔雞購(gòu)于哈爾濱遠(yuǎn)大孵化場(chǎng)。
選用1日齡體重相近、健康A(chǔ)A肉仔雞180只,體重經(jīng)方差分析差異不顯著,采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì),隨機(jī)分為5個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只雞。試驗(yàn)肉雞飼養(yǎng)于3層重疊式金屬雞籠中,飼養(yǎng)前對(duì)雞舍進(jìn)行嚴(yán)格消毒。試驗(yàn)期間保證雞舍較好的通風(fēng)和光照,全期自由采食和飲水,按照常規(guī)方法和程序進(jìn)行飼養(yǎng)管理和免疫,具體實(shí)施辦法參照《現(xiàn)代肉雞生產(chǎn)手冊(cè)》進(jìn)行。每周空腹稱重并記錄飼料消耗量。
I組為對(duì)照組,飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧(色氨酸含量為0.06%),II組~V組為試驗(yàn)組,分別飼喂玉米-豆粕型日糧,并額外添加0.03%、0.06%、0.09%、0.12%色氨酸,日糧配制參照NRC(1994)和中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004),基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))
每周稱量肉仔雞體重,統(tǒng)計(jì)飼料消耗量,到試驗(yàn)結(jié)束時(shí)計(jì)算平均日增重、日采食量和料重比。在試驗(yàn)的第21 d分別從每個(gè)重復(fù)中選取1只體重接近本組平均值的肉雞進(jìn)行頸靜脈采血5 ml,放置于離心機(jī)中,3 500 r/min離心15 min,取上層血清分裝于EP管中,放置于-20℃保存待用。血液生化指標(biāo)分別測(cè)定總蛋白(TP)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(Glu)和尿素氮(BUN),血液生化指標(biāo)的測(cè)定均在意大利產(chǎn)FULLY全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行,所用試劑均采用中生北控公司所提供的試劑盒。
全部數(shù)據(jù)采用SAS6.12版軟件的Anova法進(jìn)行方差分析,差異顯著則進(jìn)行Duncan's法多重比較分析,數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示。
表2 日糧中添加色氨酸對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響
由表2可以看出,日糧中添加色氨酸對(duì)0~3周齡的肉仔雞無論是采食量,還是日增重都有顯著的影響。和對(duì)照組相比,大部分試驗(yàn)組的平均日采食量和平均日增重差異明顯(P<0.05)。但是第V組的平均日采食量、平均日增重與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05)。各試驗(yàn)組中日增重以第III組效果最好,好于其他各試驗(yàn)組。料重比各組之間差異不明顯(P>0.05),第III組的料重比最低,飼喂效果最好,而添加水平較高的第V組和未添加色氨酸的第I組數(shù)據(jù)基本一致。由此可以看出,在飼糧中添加適當(dāng)濃度的色氨酸可以不同程度降低料重比而提高飼糧的利用率。
從表3可以看出,第II、III、IV和V組血清中總蛋白含量均高于第I組,分別比第I組提高了9.4%、17%、8.3%和3.8%,其中各試驗(yàn)組中,以第III組含量最高,并且和第Ⅰ組相比差異顯著(P<0.05),但與其他各試驗(yàn)組之間存在差異,但不顯著(P>0.05),從總體來看,本試驗(yàn)中肉仔雞血清總蛋白(TP)含量隨著色氨酸添加量逐漸增大呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)。
AA肉仔雞血清中總膽固醇的含量第II、III、IV和第V組相對(duì)于第I組都有不同程度降低。其中第III組和第IV組與第I組相比差異顯著(P<0.05),分別比第I組降低了20.3%和19.4%,這兩組之間并無顯著差異(P>0.05)。第II組和第Ⅴ組總膽固醇含量雖低于第I組,但是差異不顯著(P>0.05)。從表中數(shù)據(jù)可以看出,本試驗(yàn)中各組肉仔雞血清中總膽固醇含量隨著色氨酸添加水平的增加有不同程度的降低,但是當(dāng)添加量升高到一定水平后又表現(xiàn)為上升的趨勢(shì)。
肉仔雞血清中甘油三酯(TG)含量趨勢(shì)為各試驗(yàn)組均低于對(duì)照組,其中含量最低為第Ⅳ組,相比于第Ⅰ組降低了6%。但各試驗(yàn)組數(shù)據(jù)和第I組數(shù)據(jù)無顯著差異,且各試驗(yàn)組間差異也不顯著(P>0.05)。
各試驗(yàn)組肉仔雞血清中葡萄糖(Glu)含量均低于第I組,第III組和第I組之間差異顯著(P<0.05),比第I組含量降低了4.2%。其余各組間無顯著差異(P>0.05)。從整體上來看,本試驗(yàn)中肉仔雞血清中葡萄糖含量隨著色氨酸添加量的增加表現(xiàn)出下降的趨勢(shì),但當(dāng)添加量達(dá)到一定水平后開始出現(xiàn)上升的現(xiàn)象。
日糧中添加色氨酸以后可不同程度的降低肉仔雞血清中尿素氮(BUN)的含量。其中含量最低的是第III組,比第I組含量降低了8.5%。各試驗(yàn)組中含量最高的是第V組,第II、IV組和III組含量比較接近。各試驗(yàn)組肉仔雞血清尿素氮的含量均低于第I組,但差異均不顯著(P>0.05)。
表3 日糧中添加色氨酸對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)的影響
據(jù) Walstrom(1985)、Bory等(1985)、Sato等(1987)、Burgoon等(1990)的報(bào)道表明,飼糧中色氨酸水平微弱變化(0.03%)可顯著影響斷奶仔豬的采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗(yàn)研究表明,在0~3周齡AA肉仔雞生長(zhǎng)期間日糧中添加色氨酸可影響其生長(zhǎng)性能,其中平均日采食量和平均日增重變化與對(duì)照組相比較為明顯。在色氨酸添加量為0.06%水平時(shí),差異顯著(P<0.05)。料重比雖然沒有顯著變化,但飼糧中添加色氨酸的試驗(yàn)組除第V組外與對(duì)照組相比仍有不同程度的降低。日采食量隨著色氨酸添加水平不同表現(xiàn)為“低-高-低”的變化趨勢(shì),其可能原因在于色氨酸在動(dòng)物體內(nèi)代謝產(chǎn)物5-羥色胺的作用。5-羥色胺能夠調(diào)節(jié)人和動(dòng)物的進(jìn)食量(Rossi等,1991;Ponter等,1993),另外一些研究認(rèn)為,色氨酸可能是直接作用于氨基酸受體或通過增加外周5-羥色胺含量而調(diào)節(jié)采食作用(Lacy等,1986)。Crozo(2005)研究認(rèn)為,在適當(dāng)水平下添加色氨酸對(duì)肉仔雞有促進(jìn)采食和生長(zhǎng)作用,缺乏色氨酸則會(huì)引起采食量下降,體增重降低和飼料利用率下降。NRC標(biāo)準(zhǔn)(1994)推薦的0~3周齡肉仔雞色氨酸需要量為0.20%,而本次試驗(yàn)研究表明,0~3周齡肉仔雞飼喂玉米-豆粕型日糧時(shí),適宜色氨酸添加水平為0.06%。造成結(jié)果差異較大的原因可能是由于基礎(chǔ)日糧組成、日糧可消化率、試驗(yàn)方法研究手段不同所致。另外,由于色氨酸在測(cè)定過程中容易受到水解和所使用的藥品試劑等因素的影響,因而飼料中色氨酸的準(zhǔn)確測(cè)定非常困難,從而造成不同研究者得出的色氨酸需要量結(jié)果差異變化很大(張慶生等,2009)。
動(dòng)物體內(nèi)物質(zhì)代謝所需的原料以及代謝的產(chǎn)物的運(yùn)輸都要依靠血液循環(huán)來完成,因此,血液生化指標(biāo)反映了動(dòng)物體內(nèi)物質(zhì)合成與分解的詳細(xì)情況。色氨酸一方面可以作為蛋白合成的原料影響蛋白的合成;另一方面色氨酸也可以通過一些其他作用來促進(jìn)蛋白合成。Challakondan等(1980)在飼料中添加色氨酸,發(fā)現(xiàn)鼠肝細(xì)胞內(nèi)蛋白合成增加;Herschel等(1984)發(fā)現(xiàn),色氨酸可以改變核膜的滲透性,并使核膜上有關(guān)酶的活性增強(qiáng),從而促進(jìn)了肝細(xì)胞的蛋白合成。Borg等(1987)和 Malmlof等(1988)研究指出,血漿尿素氮(BUN)可以比較準(zhǔn)確地反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的情況和日糧中氨基酸的平衡情況。蘇有鍵等(2005)研究結(jié)果表明,在低蛋白的飼料中添加色氨酸可以不同程度的降低仔豬血漿尿素氮的水平。色氨酸對(duì)于脂類的代謝影響比較復(fù)雜。Akiba等(1992)研究報(bào)道,給雞補(bǔ)充色氨酸會(huì)使雞肝總脂下降,同時(shí)會(huì)影響血漿膽固醇和甘油三酯的含量,其可能機(jī)理是色氨酸可以減少肝臟脂肪的合成。色氨酸對(duì)糖類(碳水化合物)代謝作用相關(guān)的研究并不多,多數(shù)集中在色氨酸與其他大分子中性氨基酸的比值(TRP/LNAA)上,Venziale等(1981)研究發(fā)現(xiàn),色氨酸及其代謝產(chǎn)物對(duì)動(dòng)物體內(nèi)糖原異生有抑制作用,這可能就是色氨酸可以降低動(dòng)物血糖含量的原因之一。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,在0~3周齡肉仔雞玉米-豆粕型日糧中添加不同水平色氨酸,肉仔雞血清中總蛋白含量有不同程度的提高,但是當(dāng)添加到一定劑量的時(shí)候又出現(xiàn)了下降的情況。而血糖和血脂的含量則隨著色氨酸的添加出現(xiàn)了不同程度的下降,血清尿素氮的含量也隨著色氨酸的添加出現(xiàn)了下降的情況。
①在本試驗(yàn)條件下,在玉米-豆粕型日糧中添加色氨酸提高了0~3周齡AA肉仔雞的日增重,并降低了料重比。
②隨著色氨酸的添加,AA肉仔雞血清中蛋白含量均有不同程度的提高,而血脂和血糖則有不同程度的下降。而色氨酸添加水平過高會(huì)導(dǎo)致血液中蛋白含量降低,血脂和血糖升高。
③綜合分析,建議在飼喂AA肉仔雞的玉米-豆粕型日糧中添加0.06%水平的色氨酸為宜。
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