周永斌，張志軍，劉連強(qiáng)，訾惠君，李鳳美

（天津市林業(yè)果樹(shù)研究所，天津 300112）

灰樹(shù)花 （Grifola frondosa）又名栗子蘑、舞茸。屬擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、非褶菌目、多孔菌科、樹(shù)花菌屬。子實(shí)體形同盛開(kāi)的蓮花，柄短呈珊瑚狀分枝，菌蓋扇形，重疊成叢；菇體因品系差異呈白色、灰色、褐色等，孢子無(wú)色、光滑，卵圓形至橢圓形。在自然界，夏秋季多發(fā)生于板栗、青岡等闊葉樹(shù)的樹(shù)干周?chē)临|(zhì)多為含有腐葉的沙質(zhì)土?；覙?shù)花是十分珍貴的食 （藥）用菌，它不僅香氣濃郁，肉質(zhì)柔嫩，口感鮮美，而且還具有極高的醫(yī)療保健功能，近年來(lái)以日本為主的許多國(guó)家對(duì)灰樹(shù)花藥理作用的研究表明，灰樹(shù)花具有抗癌和免疫增強(qiáng)作用，并具有抗高血壓，降低血糖、血脂和抗各類肝炎病毒的作用[1]。

白灰樹(shù)花是灰樹(shù)花的一種，從原基形成到子實(shí)體成熟均潔白如玉，商品價(jià)值略高于其它品種。盡管我國(guó)從80年代就開(kāi)始了灰樹(shù)花的人工栽培研究，但對(duì)白灰樹(shù)花的人工栽培直到2004年才開(kāi)始進(jìn)行，且規(guī)模較小，遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求，并且國(guó)內(nèi)關(guān)于白灰樹(shù)花菌生物學(xué)特性研究的報(bào)道很少[2]。本研究通過(guò)對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)進(jìn)行不同碳源、氮源的單因子試驗(yàn)及最適生長(zhǎng)溫度試驗(yàn)，旨在探究其最適的菌絲營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)條件，掌握其生物學(xué)特性，為進(jìn)一步本地化示范推廣奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種

白灰樹(shù)花引自日本鹿島農(nóng)產(chǎn)合作會(huì)社。

1.1.2 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基1：蛋白胨0.2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、瓊脂2%，蒸餾水1000 mL，pH值自然。

培養(yǎng)基2： 葡萄糖2%、KH2PO40.15%、MgSO40.075%、VB12片 （每片10 mg）、瓊脂2%，蒸餾水1000 mL，pH值自然。

馬鈴薯綜合培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨 2 g、 KH2PO41.5 g、 MgSO4·7H2O 0.75g、 VB120 mg、瓊脂20 g，水1000 mL，pH值自然。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 碳源利用試驗(yàn)

在培養(yǎng)基1中分別添加2%的蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、玉米粉、紅糖、果糖。將培養(yǎng)基裝入試管 （20 mm×200 mm）， 制成斜面， 并滅菌 （121℃，30 min）、 接種，每個(gè)處理重復(fù)5次，于25℃條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，以菌絲體在斜面上的直線生長(zhǎng)距離及長(zhǎng)勢(shì)的強(qiáng)弱作為生長(zhǎng)量指標(biāo)，記錄菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲長(zhǎng)勢(shì)和平均滿管天數(shù)。

1.2.2 氮源利用試驗(yàn)

在培養(yǎng)基2中分別添加 0.2%的 （NH4）2SO4、NH4NO3、蛋白胨、酵母膏、麥麩、黃豆粉。制作、培養(yǎng)及檢測(cè)指標(biāo)同1.2.1。

1.2.3 溫度影響試驗(yàn)

將馬鈴薯綜合培養(yǎng)基裝入20 mm×200 mm的試管內(nèi)，制成斜面，高壓滅菌 （121℃，30 min）后接菌種，于不同溫度條件下黑暗培養(yǎng)一定時(shí)間，每個(gè)處理重復(fù)5次，以菌絲體在斜面上的直線生長(zhǎng)距離及長(zhǎng)勢(shì)的強(qiáng)弱作為生長(zhǎng)量指標(biāo)。

2 結(jié)果與分析

2.1 白灰樹(shù)花菌對(duì)碳源營(yíng)養(yǎng)的利用

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)白灰樹(shù)花菌接種到各種培養(yǎng)基上，要經(jīng)5 d～6 d后才開(kāi)始萌發(fā)，而且在這5 d～6 d期間用肉眼無(wú)法看出試管斜面的變化，滿管時(shí)間相比其他食用菌要長(zhǎng)，需15 d～20 d。對(duì)碳源營(yíng)養(yǎng)的利用結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同碳源對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)的影響

從表1可以看出，白灰樹(shù)花對(duì)果糖的利用最差，在以果糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲基本不萌發(fā)。白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)速度和長(zhǎng)勢(shì)，在其他5種不同碳源培養(yǎng)基上表現(xiàn)差異明顯。其中菌絲生長(zhǎng)速度在以葡萄糖為碳源時(shí)最快，達(dá)0.55 cm·d-1，其次是可溶性淀粉、紅糖；再次是玉米粉和蔗糖。以葡萄糖、可溶性淀粉為碳源時(shí)，菌絲長(zhǎng)勢(shì)相近，菌絲生長(zhǎng)濃白、細(xì)密、健壯。同時(shí)發(fā)現(xiàn)白灰樹(shù)花在以紅糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲長(zhǎng)勢(shì)要明顯好于以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基，可能是紅糖中含有部分可刺激菌絲生長(zhǎng)的物質(zhì)。在玉米粉培養(yǎng)基上菌絲淺白，生長(zhǎng)較弱。

2.2 白灰樹(shù)花菌對(duì)氮源營(yíng)養(yǎng)的利用

比較了6種氮源對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)的影響，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 不同氮源對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)的影響

從表2可以看出，有機(jī)氮比無(wú)機(jī)氮更適合白灰樹(shù)花菌絲的生長(zhǎng)，菌絲體萌發(fā)時(shí)間、滿管時(shí)間和不同碳源培養(yǎng)基上培養(yǎng)的情況一致。2種無(wú)機(jī)氮 （NH4）2SO4和NH4NO3為氮源的培養(yǎng)基上，白灰樹(shù)花菌絲基本不萌發(fā)。菌絲生長(zhǎng)的最適氮源是蛋白胨，在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)濃白、細(xì)密、健壯，且日生長(zhǎng)速度高達(dá)0.55 cm·d-1；其次是酵母膏，以麥麩和黃豆粉為氮源的培養(yǎng)基上，菌絲生長(zhǎng)較稀疏，不理想。

2.3 白灰樹(shù)花菌絲體最適生長(zhǎng)溫度的確定

溫度對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)的影響見(jiàn)表3。

表3 溫度對(duì)白灰樹(shù)花菌絲生長(zhǎng)的影響

由表3可以看出，白灰樹(shù)花菌絲在5℃～30℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，35℃時(shí)菌絲不再生長(zhǎng)。適宜生長(zhǎng)溫度為20℃～25℃，培養(yǎng)溫度為25℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)最快。

3 小結(jié)與討論

通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白灰樹(shù)花菌絲體生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，且要經(jīng)4 d～6 d后才開(kāi)始萌發(fā)。培養(yǎng)白灰樹(shù)花菌絲的最適碳源為葡萄糖，菌絲生長(zhǎng)速度為0.55 cm·d-1，菌絲長(zhǎng)勢(shì)在所試驗(yàn)的碳源中表現(xiàn)最強(qiáng)，這說(shuō)明白灰樹(shù)花菌與其它大部分食用菌一樣都能很好的利用以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基[3]。同時(shí)發(fā)現(xiàn)白灰樹(shù)花菌絲體在無(wú)機(jī)氮中的銨態(tài)氮和硝態(tài)氮培養(yǎng)基上不萌發(fā)，這可能與無(wú)機(jī)氮提供的氮源營(yíng)養(yǎng)單一有關(guān)。有機(jī)氮更適合菌絲體的生長(zhǎng)，最適氮源是蛋白胨，其次是酵母膏、黃豆粉，在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)旺盛、潔白、濃密。菌絲體適宜生長(zhǎng)溫度在20℃～25℃，培養(yǎng)溫度為25℃時(shí)，生長(zhǎng)最快。

[1]蘭進(jìn).食藥用菌栽培技術(shù)圖解[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004.

[2]鮑正光.白色灰樹(shù)花栽培技術(shù)[J].食用菌，2006(10)：48.

[3]楊國(guó)良.蘑菇生產(chǎn)全書(shū)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2004.