陳葉平 高婷婷

復(fù)方氯霉素陰道泡騰片由氯霉素、己烯雌酚與輔料組成，具有殺菌、抗炎作用，主要用于各種陰道炎、宮頸糜爛和官頸炎。該品種現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)氯霉素含量測(cè)定采用亞硝酸鈉滴定法[1]，操作比較繁瑣，易容易引起結(jié)果的誤差，本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色普法該制劑中氯霉素的含量，方法簡便、敏感、準(zhǔn)確，結(jié)果較滿意，現(xiàn)介紹如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津LC-10ATVP高效液相色譜儀；瑞士梅特勒GB204電子天平（0.1mg）；PMS-3C型精密PH計(jì)；超聲清洗機(jī)等。

1.2 試藥

復(fù)方氯霉素陰道泡騰片（市售品，批號(hào)20070922、20080302、20081017）；氯霉素對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)130436-200704）。

1.3 試劑

庚烷磺酸鈉、二甲基甲酰胺、冰醋酸為分析純、乙腈為色譜純、水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[2]

菲羅門色譜柱C18（250mm×4.60mm，5μm）；流動(dòng)相0.1%庚烷磺酸鈉的溶液（取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL與二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻）-已腈（70∶30）；檢測(cè)波長275nm；流速1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL。

2.2 試驗(yàn)溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液

精密稱取干燥劑至恒重的氯霉素對(duì)照品10mg，置100mL量瓶中，加適量的甲醇使溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。精密量取該溶液5mL，置于10mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻， 即得對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液

精密稱取本品內(nèi)容物50mg，置100mL量瓶中，加甲醇5mL，再加適量流動(dòng)相，超聲處理5min，再加流動(dòng)相至刻度，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品儲(chǔ)備溶液。精密量取該溶液5mL，置于50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照品溶液

按處方比例制備缺少氯霉素的陰性樣品，并按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備成陰性對(duì)照品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

分別取“2.2.1”、“2.2.2”、“2.2.3”項(xiàng)下的溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件經(jīng)驗(yàn)進(jìn)樣，記錄色譜圖，見圖1。由色譜圖可知，陰性對(duì)照品色譜在對(duì)照品出峰位置上無干擾峰，即在本實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)測(cè)定無干擾。氯霉素的保留時(shí)間為7.898min，理論塔板數(shù)高于9000。

2.4 線性關(guān)系的考察

圖1 色譜對(duì)照?qǐng)D

精密吸取“2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品儲(chǔ)備溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0mL，分別置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋于刻度，搖勻，進(jìn)樣，測(cè)得峰面積。以質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)，得回歸方程：Y=5E+0.7X，r=0.9995（n=6）。表明氯霉素在0.005～0.05mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn)

取“2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積。RSD為0.07%（n=5）。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

按“2.2.2”項(xiàng)下方法處理同一批批號(hào)（20080302）樣品5份，依法測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果氯霉素的含量為標(biāo)示量的101.7%：RSD為0.12%（n=5）。

表1 回收率試驗(yàn)表

表2 樣品含量測(cè)定表

2.7 回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的供試品適量（相當(dāng)于氯霉素0.5mg）項(xiàng)下的溶液5mL于10mL量瓶中，共3份，分別加入對(duì)照溶液3、4、5mL，再加流動(dòng)相至刻度，分別加樣分析，結(jié)果見表1。

2.8 樣品含量測(cè)定

稱取3批不同批號(hào)的樣品分別按按“2.2.2“項(xiàng)下方法處理，進(jìn)樣，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算含量，并與結(jié)果見表2。

3 討 論

本法用于測(cè)量復(fù)方氯霉素陰道泡騰片中氯霉素的含量，無其他成分的干擾，專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，精密度高，與化學(xué)測(cè)量法進(jìn)行比較，測(cè)量結(jié)果基本一致，適宜控制本品質(zhì)量。

[1]國家食品藥品監(jiān)督局標(biāo)準(zhǔn)[S].WS-10001(HD～14840-2003).

[2]國家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國藥典[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:776.