吳 揚，胡志和*，郭 嘉，李文龍，張 敏

(天津市食品生物技術(shù)重點實驗室，天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津 300134)

鉻是目前研究較多且結(jié)論較為一致的具有降血糖作 用的一種重要的微量元素，在糖尿病患者中這種微量元素含量明顯降低[1-2]。故有人嘗試用補鉻的方法治療糖尿病，證明了補鉻對改善糖尿病患者的糖代謝異常是有效的[3-4]。又因為人體對無機鉻吸收率低，有機鉻吸收率高，其有效性約為無機鉻的10倍以上[5]，所以有機鉻成為了一種較有應(yīng)用前景的鉻補充劑。乳鐵蛋白(Lf)是一種鐵結(jié)合性糖蛋白，現(xiàn)已證實Lf具有增強鐵的傳遞和吸收、廣譜的抗菌性、免疫作用、抗氧化作用、促進腸道菌群的平衡等多種獨特的生物學(xué)功能。長期食用添加乳鐵蛋白的食品有助于維持健康的腸道微生物菌群，維持健康，增強免疫力。乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物(Lf-Cr)由乳鐵蛋白與六水三氯化鉻在一定條件下絡(luò)合而成[6]，作為一種新型的營養(yǎng)強化劑，把具有多種生物學(xué)功能的乳鐵蛋白和微量元素鉻(Cr3+)有機結(jié)合起來，增強了二者的協(xié)同作用。因此，乳鐵蛋白鉻可用于開發(fā)新型的保健食品，在食品、生化、醫(yī)藥、化妝品等行業(yè)中，具有廣闊的應(yīng)用和開發(fā)前景。

本實驗研究乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物對四氧嘧啶誘發(fā)的實驗性糖尿病小鼠體質(zhì)量和血糖的影響。以體內(nèi)動物實驗的方法確定乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物的降高血糖作用，為鉻絡(luò)合物作為抗高血糖類功能性食品的開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

Balb/c小鼠(No：0002003，SCXk(津)2009-0001)，雄性，SPF級 天津市山川紅實驗動物科技有限公司。

鹽酸二甲雙胍片 天津太平洋制藥有限公司；四氧嘧啶(Alloxan) Sigma公司；葡萄糖(分析純) 天津市德恩化學(xué)試劑有限公司；0.9%氯化鈉注射液 天津市津蘭藥業(yè)有限公司；手術(shù)刀 上海聯(lián)輝醫(yī)療用品有限公司；乳鐵蛋白(lactoferrin，分子質(zhì)量約80kD，鐵飽和度10%～20%) 新西蘭納瑞斯頂級生物技術(shù)有限公司；乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物(Lf-Cr)、脫鐵乳鐵蛋白(Lf) 自制。

安穩(wěn)血糖測定儀及其試紙條 長沙三諾生物傳感器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 脫鐵乳鐵蛋白的制備和表征

稱取10g乳鐵蛋白，用去離子水溶解；加入冰醋酸，乳鐵蛋白-醋酸溶液由磚紅色變成淡黃色，用pH計檢測乳鐵蛋白-醋酸溶液的pH值，并配制此pH值下的醋酸透析液(冰醋酸中加去離子水調(diào)pH)。把調(diào)節(jié)好pH值的乳鐵蛋白-醋酸溶液在攪拌的條件下透析，直到透析液中檢測不到Fe3+，脫鐵后的乳鐵蛋白溶液變得澄清；繼續(xù)用去離子水透析，直到除去溶液中的醋酸根離子。然后冷凍干燥，得到淡白色粉末。采用KBr壓片法進行紅外光譜的測定。

1.2.2 乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物的制備和表征

稱取5g脫鐵乳鐵蛋白，用去離子水溶解；加入0.25g六水三氯化鉻，用NaOH調(diào)節(jié)各溶液pH6.5，在55℃的恒溫水浴鍋內(nèi)，攪拌絡(luò)合2h，制備乳鐵蛋白鉻的溶液，過濾；然后用去離子水透析48h；冷凍干燥，得到乳鐵蛋白鉻粉末。采用KBr壓片法進行紅外光譜的測定。

1.2.3 糖尿病動物模型的制備

實驗動物(Balb/c小鼠)普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，按照文獻[7]提供的方法制備糖尿病動物模型。實驗小鼠先禁食12h，自由飲水。將2g/100mL的四氧嘧啶生理鹽水溶液按200mg/kg bw的劑量腹腔注射，注射5d后禁食5h，小鼠尾部取血用三諾安血糖儀及其試紙條測血糖，血糖值10～25mmol/L為高血糖模型成功動物。正常對照組注射同體積的生理鹽水。

1.2.4 實驗動物分組及處理

高血糖模型小鼠64只，按血糖水平隨機分為8組(組間血糖值≤1.1mmol/L)，每組8只，即：糖尿病對照組(灌胃生理鹽水，10mL/(kg bw·d))為陰性對照組；鹽酸二甲雙胍片組(250mg/(kg bw·d))為陽性對照組；Lf低劑量組(1.4mg/(kg bw·d))；Lf中劑量組(7mg/(kg bw·d))；Lf高劑量組(14mg/(kg bw·d))；Lf-Cr低劑量組(1.4mg/(kg bw·d)，鉻含量為1.67μg/(kg bw·d))，Lf-Cr中劑量組(7mg/(kg bw·d)，鉻含量為8.35μg/(kg bw·d))；Lf-Cr高劑量組(14mg/(kg bw·d)，鉻含量為16.7μg/(kg bw·d))。另設(shè)正常小鼠8只為正常對照組(灌胃生理鹽水，10mL/(kg bw·d))。實驗期間各組小鼠自由飲水，攝食普通飼料。實驗周期為14d，每天灌胃1次。各組小鼠連續(xù)灌胃14d，分別在0、7、14d從小鼠尾部取血，用血糖儀測定其空腹血糖；并在7、14d時進行糖耐量實驗。實驗期間同時測定各組小鼠的體質(zhì)量變化。

1.2.5 檢測方法[8]

1.2.5.1 測定空腹血糖

各組小鼠分別在0、7、14d時，禁食5h，從小鼠尾部取血，用三諾安血糖儀及其試紙條測定其空腹血糖，比較各組小鼠血糖值及血糖下降百分率。

1.2.5.2 糖耐量實驗

實驗小鼠禁食5h，各劑量組均給予不同濃度受試樣品，正常對照組、糖尿病對照組給予同體積生理鹽水。20min后經(jīng)口灌胃給予葡萄糖2.0g/kg bw，測定給葡萄糖后0、0.5、2h的血糖值，觀察正常對照組、糖尿病對照組與受試樣品組給葡萄糖后各時間點血糖曲線下面積的變化。

血糖曲線下面積＝1/2×(0h血糖值＋0.5h血糖值)×0.5＋1/2×(2h血糖值＋0.5h血糖值)×1.5＝0.25×(0h血糖值+4×0.5h血糖值+3×2h血糖值)

1.3 數(shù)據(jù)處理[9]

應(yīng)用SPSS 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(±s)表示，實驗前后采用配對t檢驗，各組之間采用組間t檢驗。P＜0.05，有顯著性差異；P＜0.01，有極顯著性差異；P＞0.05，無顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅外光譜圖定性分析

采用KBr壓片法進行紅外光譜的測定，比較含鐵乳鐵蛋白、脫鐵乳鐵蛋白、乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物的紅外吸收光譜圖，結(jié)果如圖1所示。

圖1 紅外吸收光譜圖Fig.1 IR absorption spectra of lactoferrin, apolactoferrin and lactoferrin/chromium complex

由圖1可知，各圖的圖形骨架特征峰基本一致，相對強度未發(fā)生明顯變化。但在3320～3070cm-1波數(shù)范圍內(nèi)，含鐵乳鐵蛋白的最大吸收峰為3305.66cm-1，脫鐵乳鐵蛋白的最大吸收峰為3293.92cm-1，乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物的最大吸收峰則為3309.59cm-1。但圖1A比圖1B多了約12cm-1單位的位移(3305.66cm-1→3293.92cm-1)，可見Fe3+與脫鐵乳鐵蛋白絡(luò)合的基團就在3320～3070cm-1波數(shù)范圍內(nèi)。經(jīng)相關(guān)文獻證明，此區(qū)域為酰胺基伸縮振動(νN-H)產(chǎn)生的特征吸收峰，可能是由于Fe3+與酰胺基發(fā)生了配位反應(yīng)，影響了基團內(nèi)N—H伸縮振動，從而改變了該基團的特征吸收峰。同時，圖1C與圖1B比較，約有10cm-1單位的位移(3309.59cm-1→3293.92cm-1)，波數(shù)的改變同樣在3320～3070cm-1范圍內(nèi)，這與Fe3+和脫鐵乳鐵蛋白絡(luò)合引起的波數(shù)改變是一致的，進一步說明了Fe3+、Cr3+與脫鐵乳鐵蛋白絡(luò)合的基團是一樣的，均在3320～3070cm-1波數(shù)范圍內(nèi)發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)。這表明可以用紅外吸收光譜圖作為鉻絡(luò)合物絡(luò)合與否的判斷標準。

2.2 乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠體質(zhì)量的影響

實驗中觀察到，腹腔注射四氧嘧啶5d后造模成功，糖尿病小鼠明顯出現(xiàn)多食、多飲、多尿、低體質(zhì)量的癥狀。將高血糖小鼠按照方法1.2.4節(jié)分組后進行灌胃。灌胃7d時，與糖尿病對照組小鼠體質(zhì)量變化相比，正常對照組、鹽酸二甲雙胍片組體質(zhì)量顯著增長(P＜0.05)；其他劑量組無顯著性差異(P＞0.05)。灌胃14d時，與糖尿病對照組小鼠體質(zhì)量變化相比，正常對照組、鹽酸二甲雙胍片組、中劑量Lf-Cr組和高劑量Lf-Cr組有極顯著性差異(P＜0.01)；低劑量Lf-Cr組有顯著性差異(P＜0.05)；其他劑量組無顯著性差異(P＞0.05)。可見，隨著灌胃治療時間的延長，正常對照組、鹽酸二甲雙胍片組、中劑量Lf-Cr組和高劑量Lf-Cr組小鼠體重均有不同程度的增長，且有一定的增長趨勢：正常對照組＞鹽酸二甲雙胍片組＞高劑量Lf-Cr組＞中劑量Lf-Cr組。而Lf低、中、高3個劑量組小鼠體質(zhì)量卻持續(xù)降低。結(jié)果見表1。

表1 乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠體質(zhì)量的影響(± s，n=8)Table1 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on body weight of diabetic mice (x ± s，n=8)

表1 乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠體質(zhì)量的影響(± s，n=8)Table1 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on body weight of diabetic mice (x ± s，n=8)

注：*.與糖尿病對照組相比差異顯著，P＜0.05；**.與糖尿病對照組相比差異極顯著，P＜0.01。

組別 劑量/(mg/kg bw) 灌胃前體質(zhì)量/g 灌胃7d體質(zhì)量/g 0～7d體質(zhì)量差值/g 灌胃14d體質(zhì)量/g 0～14d體質(zhì)量差值/g糖尿病對照組 33.25±1.98 31.75±3.33 －1.50±2.68 28.63±4.14 －4.63±2.45正常對照組 32.88±2.53 35.13±3.36 2.25±2.25* 37.00±2.14 4.13±0.99**鹽酸二甲雙胍片組 250 34.00±3.42 34.50±3.51 0.50±1.31* 36.38±4.14 2.38±1.06**Lf-Cr低劑量 1.4 34.63±3.29 33.13±2.75 －1.50±1.07 32.75±3.54 －1.88±0.64*Lf-Cr 中劑量 7 34.25±2.96 33.25±3.01 －1.00±1.07 34.63±2.45 0.38±1.19**Lf-Cr高劑量 14 34.00±3.30 33.75±2.92 －0.25±2.25 35.75±2.43 1.75±1.64**Lf 低劑量 1.4 34.63±4.13 32.25±3.65 －2.38±1.19 30.00±3.58 －4.63±1.19 Lf中劑量 7 34.13±3.44 32.50±3.42 －1.63±0.74 30.13±3.18 －4.00±1.51 Lf 高劑量 14 34.63±3.07 32.88±3.04 －1.75±1.83 30.25±2.71 －4.38±2.13

2.3 乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠空腹血糖的影響

灌胃7d時，與糖尿病對照組相比，鹽酸二甲雙胍片組小鼠的血糖差值及血糖下降百分率有極顯著性差異(P＜0.01)；Lf-Cr高劑量組(14mg/(kg bw·d))小鼠的血糖差值及血糖下降百分率有顯著性差異(P＜0.05)；其他各組均無顯著性差異(P＞0.05)。并且Lf-Cr低、中、高3個劑量組與鹽酸二甲雙胍片組比較均有極顯著性差異(P＜0.01)?？梢姡诠辔?d時，鹽酸二甲雙胍片和高劑量Lf-Cr能顯著降低四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠的空腹血糖，而低、中劑量Lf-Cr及Lf則無顯著降低空腹血糖作用。另外，高劑量Lf-Cr沒有鹽酸二甲雙胍片降血糖作用明顯。結(jié)果見表2。

灌胃14d時，與糖尿病對照組相比，鹽酸二甲雙胍片組、Lf-Cr中劑量組(7mg/(kg bw·d))和Lf-Cr高劑量組(14mg/(kg bw·d))小鼠的血糖差值及血糖下降百分率有極顯著性差異(P＜0.01)；其他各組均無顯著性差異(P＞0.05)。而Lf-Cr劑量組與鹽酸二甲雙胍片組相比，Lf-Cr低、中、高3個劑量組有顯著(P＜0.05)或極顯著性差異(P＜0.01)。可見，在灌胃14d時，鹽酸二甲雙胍片和中、高劑量Lf-Cr能顯著降低四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠的空腹血糖，而低劑量Lf-Cr及Lf則無顯著降低空腹血糖作用。另外，中、高劑量Lf-Cr沒有鹽酸二甲雙胍片降血糖作用明顯，但隨著Lf-Cr劑量的增加，降糖效果越明顯。結(jié)果見表3。

表2 灌胃7d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠空腹血糖的影響(± s，n=8)Table2 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on fasting blood glucose level of diabetic mice with administration for 7 days (x± s，n=8)

表2 灌胃7d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠空腹血糖的影響(± s，n=8)Table2 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on fasting blood glucose level of diabetic mice with administration for 7 days (x± s，n=8)

注：▲.與糖尿病對照組相比有顯著性差異，P＜0.05；▲▲.與糖尿病對照組相比有極顯著性差異，P＜0.01；*.與鹽酸二甲雙胍片組相比有顯著性差異，P＜0.05；**.與鹽酸二甲雙胍片組相比有極顯著性差異，P＜0.01。下表3、4、5同。

組別 劑量/(mg/kg bw) 空腹血糖/(mmol/L) P值 血糖下降百分率/% P值灌胃0d 灌胃7d 差值糖尿病對照組 15.48±3.55 14.29±2.54 1.19±1.87 6.18正常對照組 7.8±0.37 7.26±0.36 0.54±0.57 0.403 6.65 0.932鹽酸二甲雙胍片組 250 15.55±3.35 10.80±1.08 4.75±2.42▲▲ 0.001 28.64▲▲ 0.000 Lf-Cr低劑量 1.4 15.94±3.56 14.1±2.72 1.84±0.91** 0.270 10.80** 0.229 Lf-Cr 中劑量 7 15.69±3.33 13.35±2.36 2.34±1.04** 0.093 14.14** 0.085 Lf-Cr高劑量 14 15.51±3.24 12.59±1.85 2.93±1.46**▲ 0.017 17.78**▲ 0.014 Lf 低劑量 1.4 15.93±2.25 14.81±2.73 0.99±0.20 0.765 6.36 0.967 Lf中劑量 7 15.51±2.68 14.86±2.59 1.06±0.35 0.885 7.00 0.847 Lf 高劑量 14 16.01±3.14 14.93±3.30 1.09±0.44 0.903 7.20 0.846

表3 灌胃14d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠空腹血糖的影響(± s，n=8)Table3 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on blood glucose of diabetic mice with administration for 14 days (x ± s，n=8)

表3 灌胃14d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠空腹血糖的影響(± s，n=8)Table3 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on blood glucose of diabetic mice with administration for 14 days (x ± s，n=8)

組別 劑量/(mg/kg bw) 空腹血糖/(mmol/L) P值 血糖下降百分率/% P值灌胃0d 灌胃14d 差值糖尿病對照組 15.48±3.55 14.40±2.50 1.08±1.72 5.52正常對照組 7.8±0.37 7.69±0.63 0.11±0.53 0.155 1.42 0.319鹽酸二甲雙胍片組 250 15.55±3.35 8.91±0.75 6.64±3.12▲▲ 0.001 40.43▲▲ 0.001 Lf-Cr低劑量 1.4 15.94±3.56 13.93±2.73 2.01±1.02** 0.099 11.88** 0.057 Lf-Cr中劑量 7 15.69±3.33 11.73±2.11 3.96±1.59**▲▲ 0.007 24.38**▲▲ 0.005 Lf-Cr高劑量 14 15.51±3.24 9.91±1.21 5.58±2.22*▲▲ 0.001 34.58**▲▲ 0.000 Lf 低劑量 1.4 15.93±2.25 14.68±2.56 1.13±0.53 0.942 7.01 0.737 Lf中劑量 7 15.51±2.68 14.68±2.31 1.25±0.44 0.792 7.93 0.547 Lf 高劑量 14 16.01±3.14 14.65±3.55 1.36±0.69 0.745 9.28 0.501

2.4 乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠葡萄糖耐量的影響

灌胃7d時，正常對照組與糖尿病對照組相比，經(jīng)口灌胃給予葡萄糖后，血糖水平均在0.5h時升高到最高水平，但正常小鼠在2h血糖水平已接近空腹血糖值，而糖尿病對照組小鼠到2h時血糖水平仍保持在很高的水平，下降緩慢，由此造成了血糖曲線下面積糖尿病對照組小鼠顯著高于正常對照組小鼠(P＜0.001)，二者差異極顯著。各劑量組與糖尿病對照組相比，給予葡萄糖后，其中鹽酸二甲雙胍片組和Lf-Cr高劑量組小鼠的血糖曲線下面積與糖尿病對照組相比有極顯著性差異(P＜0.01)，其他各組則無顯著性差異(P＞0.05)，這表明鹽酸二甲雙胍片和高劑量Lf-Cr具有顯著增強糖尿病小鼠糖耐量的作用，而Lf則無顯著改善糖尿病小鼠的糖耐量作用。另外，Lf-Cr高劑量組與鹽酸二甲雙胍片組相比仍有極顯著性差異(P＜0.01)，說明鹽酸二甲雙胍片改善糖耐量作用要強于高劑量Lf-Cr。結(jié)果見表4。

灌胃14d時，與糖尿病對照組相比，各組給予葡萄糖后，其中正常對照組、鹽酸二甲雙胍片組和Lf-Cr中、高劑量組小鼠的血糖曲線下面積均有極顯著性差異(P＜0.01)，其他各組則無顯著性差異(P＞0.05)，這表明鹽酸二甲雙胍片和中、高劑量Lf-Cr具有顯著增強糖尿病小鼠糖耐量的作用，而Lf則無顯著改善糖尿病小鼠的糖耐量作用。但與鹽酸二甲雙胍片組相比，Lf-Cr低、中劑量組有極顯著性差異(P＜0.01)；Lf-Cr高劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，說明鹽酸二甲雙胍片組改善糖耐量作用要強于Lf-Cr低、中、高劑量組，且隨Lf-Cr劑量的增加，改善糖耐量效果越明顯。結(jié)果見表5。

在葡萄糖耐量實驗中，經(jīng)口灌胃給予葡萄糖7、14d時的血糖曲線下面積有所不同，14d時血糖曲線下面積與7d時相比，鹽酸二甲雙胍片組和Lf-Cr高劑量組有極顯著性差異(P＜0.01)；而Lf-Cr低、中劑量組則無顯著性差異(P＞0.05)。說明隨著治療時間的延長，鹽酸二甲雙胍片和高劑量Lf-Cr改善高血糖小鼠糖耐量效果越明顯。結(jié)果見表6。

表4 灌胃7d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠糖耐量的影響(± s，n=8)Table4 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on glucose tolerance of diabetic mice with administration for 7 days (x± s，n=8)

表4 灌胃7d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠糖耐量的影響(± s，n=8)Table4 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on glucose tolerance of diabetic mice with administration for 7 days (x± s，n=8)

組別 劑量/(mg/kg bw) 血糖/(mmol/L) 血糖曲線下面積 P值0h 0.5h 2h糖尿病對照組 14.25±2.33 24.56±2.33 20.33±1.88 43.37±3.81正常對照組 7.38±0.52 14.16±1.20 7.24±0.40 21.43±1.23▲▲ 0.000鹽酸二甲雙胍片組 250 10.10±1.10 18.93±2.70 13.40±2.86 32.86±5.58▲▲ 0.001 Lf-Cr低劑量 1.4 13.81±2.68 23.10±2.82 17.69±2.56 39.82±5.28** 0.078 Lf-Cr 中劑量 7 12.85±2.37 23.34±1.69 17.60±3.01 39.75±4.27** 0.054 Lf-Cr高劑量 14 12.36±1.77 21.19±3.28 15.46±2.33 35.88±5.32**▲▲ 0.004 Lf 低劑量 1.4 14.19±2.57 23.10±2.70 19.54±3.29 41.30±5.59 0.300 Lf中劑量 7 14.80±2.79 23.63±3.31 18.89±3.52 41.49±6.44 0.392 Lf高劑量 14 14.24±3.14 22.21±2.91 18.01±3.56 39.28±6.25 0.123

表5 灌胃14d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠糖耐量的影響(± s，n=8)Table5 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on glucose tolerance of diabetic mice with administration for 14 days (± s，n=8)

表5 灌胃14d時乳鐵蛋白及其鉻絡(luò)合物對高血糖小鼠糖耐量的影響(± s，n=8)Table5 Effects of lactoferrin and lactoferrin-chromium complex on glucose tolerance of diabetic mice with administration for 14 days (± s，n=8)

組別 劑量/(mg/kg bw) 血糖/(mmol/L) 血糖曲線下面積 P值0h 0.5h 2h糖尿病對照組 14.14±2.34 25.30±3.12 19.41±3.31 43.39±5.01正常對照組 7.71±0.59 15.11±2.20 7.94±0.58 22.99±2.36▲▲ 0.000鹽酸二甲雙胍片組 250 8.89±0.68 15.48±0.92 9.24±0.78 24.63±1.41▲▲ 0.000 Lf-Cr低劑量 1.4 13.80±2.74 23.66±3.50 17.10±2.64 39.94±5.96** 0.056 Lf-Cr 中劑量 7 11.66±2.07 21.24±3.48 17.98±3.14 37.63±6.26**▲▲ 0.002 Lf-Cr高劑量 14 9.65±1.12 17.54±2.46 11.56±1.71 28.62±3.54*▲▲ 0.000 Lf 低劑量 1.4 14.49±2.36 25.34±3.12 19.06±3.48 43.26±5.64 0.945 Lf中劑量 7 14.39±2.13 24±2.64 18.98±2.73 41.83±5.14 0.318 Lf高劑量 14 15.10±3.06 24.47±2.78 20.07±3.67 41.58±7.43 0.246

表6 血糖曲線下面積的比較Table6 Comparison of area under the curve of blood glucose among positive and 3 lactoferrin-chromium complex groups

3 結(jié) 論

在實驗劑量范圍內(nèi)，隨著Lf-Cr劑量的增加，和食用時間的延長，其降血糖效果和改善葡萄糖耐量作用會越明顯，且與鹽酸二甲雙胍片治療效果的差異性有變小的趨勢。所以，在可耐受范圍內(nèi)，長期服用添加乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物的食品或營養(yǎng)強化劑有助于對糖尿病的輔助治療，改善糖尿病患者的葡萄糖耐量。

4 討 論

鉻可分為無機鉻和有機鉻，鉻的吸收與化學(xué)結(jié)合形式有很大關(guān)系，無機鉻吸收率僅為0.4%～3%；有機鉻的吸收率為10%～25%，其有效性約為無機鉻的10倍以上[5]。近些年來，國內(nèi)外已經(jīng)合成了一系列有機鉻試用于臨床、預(yù)防和治療糖尿病，并證明有機鉻的降糖效果要強于無機鉻。劉安軍等[3]用膠原蛋白多肽-鉻(Ⅲ)螯合物灌胃，可顯著降低四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病小鼠空腹血糖，且作用強于三氯化鉻的降糖作用。鄧巖沈等[10]用有機鉻(7.5μg/kg bw)灌胃，可明顯降低正常小鼠和Alloxan糖尿病小鼠的血糖，其作用強于三氯化鉻(7.5 μg/kg bw)而且作用維持時間較長，證明了三價鉻離子較難進入細胞中，降糖效果不明顯，而以絡(luò)合物的形式給藥有利于鉻離子的吸收。過去還有報道采用無機酸鉻鹽制劑來補充，但結(jié)果不能達到預(yù)期效果[11]。

本實驗采用乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物觀察其對四氧嘧啶誘發(fā)的實驗性糖尿病小鼠的血糖水平的影響，證明了乳鐵蛋白鉻絡(luò)合物可使實驗性糖尿病小鼠的體質(zhì)量有所增長，明顯的降低血糖和增強葡萄糖耐量作用，且具有一定的劑量效應(yīng)關(guān)系，這與上述報道相近，進一步證明有機鉻在防治糖尿病方面具有積極的意義，為研制和開發(fā)新的防治糖尿病的營養(yǎng)強化劑提供了有力的依據(jù)。

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