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        分離方法對玉米淀粉分離組分結(jié)構(gòu)特性的影響

        2010-07-09 13:30:56曾紅華
        關(guān)鍵詞:聚合度支鏈直鏈

        曾紅華,胡 蝶,吳 平,左 健,謝 濤

        (湖南工程學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院,湘潭411104)

        直鏈淀粉與支鏈淀粉的分離方法有很多,常用的有選擇瀝濾法、完全分散法、鹽析法、凝沉分離法、酶脫支法、電泳法和纖維素柱色譜分離法等[1,2].采用不同方法分離所到的直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉的比例、支鏈長度、支化度及分子量分布等結(jié)構(gòu)特性也會發(fā)生很大的變化,而這些結(jié)構(gòu)特性直接影響直鏈淀粉和支鏈淀粉的物化特性及其在工業(yè)上的應(yīng)用[3~5].因此,本文將以玉米淀粉為原料,選用三種方法分離得到玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉,并通過掃描電子顯微鏡(SEM)和X-射線衍射技術(shù)對其結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行表征.

        1 材料與方法

        1.1 原料

        精制玉米淀粉(市售,直鏈與支鏈淀粉含量分別為26.75%、65.39%).

        1.2 直鏈、支鏈淀粉分離

        方法一(楊澤敏法[6]):①稱10 g淀粉,加入到300 mL二甲基亞砜(AR)中緩緩攪動(dòng)24 h后2000 g離心15 min.上清液用于分離3種淀粉成分,沉淀為非淀粉成分,加無水乙醇(AR)洗滌除去DMSO,烘干稱重,稱作DMSO不溶物.②將上清液注入2倍量的正丁醇(AR)中,不攪拌,靜止24 h后4000 g離心.沉淀用無水乙醇洗滌數(shù)次除去DMSO后轉(zhuǎn)入到1000 mL蒸餾水中,加熱使其連續(xù)沸騰1 h,冷卻至60℃時(shí)加1 g百里酚(AR),攪拌均勻,室溫下放置3天.③2000 g離心15 min分離沉淀I,上清在0~4℃預(yù)冷1 h后加入適量乙醚,劇烈振蕩后靜置片刻,萃取百里酚,重復(fù)3次后加入過量酒精,放置24 h.④4000 g離心15 min,沉淀烘干稱重即為支鏈淀粉.⑤將沉淀I轉(zhuǎn)入700 mL蒸餾水中,加熱使之連續(xù)沸騰45 min,冷卻后加入10mL正丁醇,攪拌均勻,放置 24 h.⑥2000 g離心分離沉淀 II,上清在0~4℃下預(yù)冷1 h后加入適量乙醚,振蕩后靜置片刻,萃取百里酚,重復(fù)3次后加過量酒精,放置24 h.⑦4000 g離心15 min,沉淀烘干稱重即為中間成分;沉淀II用酒精洗滌除去正丁醇,烘干即為直鏈淀粉.

        方法二:在方法一基礎(chǔ)上略做改動(dòng),只將方法一②中的“2倍量的正丁醇”改成“過量的無水乙醇”,③和⑥中的“上清在0~4℃預(yù)冷1 h后加入適量乙醚,劇烈振蕩后靜置片刻,萃取百里酚,重復(fù)3次后加入過量酒精”改為“先在0℃冰凍、然后室溫自然溶解分層,傾出上層清液,下層用乙醚萃取,最后再用無水乙醇沉淀”,其余不變.

        方法三:正丁醇法,參考文獻(xiàn)[7].

        1.3 測定方法

        掃描電子顯微鏡(SEM)分析:將干燥樣品充分混合隨機(jī)取樣,再將樣品粒子均勻撒在貼有雙面膠的樣品臺上,用離子濺射儀噴金固定8 min,在日立S-570型掃描電子顯微鏡(日本)觀察攝像.

        X-射線衍射分析:采用TTRAX3型X-射線衍射儀(美國),分析條件:特征射線CuKa,石墨單色器 ,管壓 40 k V,電流25 mA,測量角度 2θ=10°~60°,步長 0.02 °/步,掃描速度 2 °/min.按參考文獻(xiàn)[8,9]的方法計(jì)算結(jié)晶度.碘親和力的測定:按Schoch法[10]測定,并按式

        本文試驗(yàn)均重復(fù)三次,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)取平均值.

        2 結(jié)果與分析

        淀粉-碘復(fù)合物最大吸收波長測定:按參考文獻(xiàn)[12]的方法測定.

        平均聚合度(DP)、平均鏈長(CL)和摩爾平均鏈數(shù)(NC)的測定:按Hizukuri和Suzuki等人[13-15]的方法測定,并按算.

        2.1 分離方法對玉米淀粉分離組分微觀結(jié)構(gòu)的影響

        圖1 為三種方法分離得到的玉米淀粉組分的電子顯微圖像.由方法一得到的玉米直鏈淀粉聚集成比較致密的單層塊狀(圖1B11),表面布滿裂縫(圖1B12);中間成分呈塊狀(圖1C11),塊狀物由大小比較均勻的片狀物層層堆積而成(圖1C12);支鏈淀粉則聚集成團(tuán)(圖1D11、圖1D12).由方法二得到的玉米直鏈淀粉同樣堆積成單層塊狀(圖1E21、圖1E22),中間成分形成結(jié)構(gòu)比較疏松的層狀物(圖1F21~圖1F23),支鏈淀粉絮凝成團(tuán)(圖1G21、圖1G22).由方法三得到的玉米直鏈淀粉呈橢球狀(圖1H31),由片狀物堆積而成(圖1H32、圖1H33),而支鏈淀粉則形成疏松多孔的團(tuán)塊(圖1I31~圖1I33).

        圖1 分離方法對玉米淀粉分離組分微觀結(jié)構(gòu)的影響

        2.2 分離方法對玉米淀粉分離組分結(jié)晶結(jié)構(gòu)的影響

        圖2 不同分離方法得到玉米淀粉分離組分的X-射線衍射圖譜

        圖2 為不同方法分離得到的玉米淀粉分離組分的X-射線衍射圖譜,其具體計(jì)算結(jié)果見表1.玉米原淀粉為典型的A-型晶體,在其X-衍射圖譜上15.3°、17.1°、18.2°和 23.5°衍射角處分別存在比較強(qiáng)的吸收峰.由圖2可看出,分離方法對玉米原淀粉組成成分的影響很大,玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉結(jié)晶相的晶型均轉(zhuǎn)變?yōu)镃-型.與玉米原淀粉相比,分離方法主要導(dǎo)致玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉的微晶相比例下降,非晶相比例稍有增加,因而它們的結(jié)晶度也有所降低(表1).

        表1 分離方法對玉米淀粉分離組分結(jié)晶度的影響

        2.3 分離方法對玉米淀粉分離組分分子結(jié)構(gòu)的影響

        碘親和力通常用來確定淀粉中直鏈淀粉的含量及評定直鏈淀粉純度,用碘電位滴定法測定各種直鏈淀粉的碘親和力如小麥直鏈淀粉為19.9%、馬鈴薯直鏈淀粉19.9%、木薯直鏈淀粉18.6%和銀杏直鏈淀粉19.2%,而支鏈淀粉的碘親和力一般在0.5%~1.0%以下.藍(lán)值是表示淀粉碘結(jié)合性能的一個(gè)指標(biāo),直鏈淀粉由于其線性聚合度很高(800~1200個(gè)葡萄糖單元),故其藍(lán)值很大,一般為0.8~1.2;支鏈淀粉由于其側(cè)鏈鏈長只有20~30個(gè)葡萄糖基,藍(lán)值僅在0.08~0.22之間.三種分離方法對玉米淀粉分離組分碘親和力、藍(lán)值、平均聚合度和平均鏈長等分子結(jié)構(gòu)參數(shù)的影響見表2.由表2可看出,分離方法對玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉與碘形成復(fù)合物的λmax有影響,方法一和方法二的λmax相同,而方法三的λmax則相差較大.就碘親和力和藍(lán)值來說,方法三分離得到的玉米直鏈淀粉和支鏈淀粉的最大,方法二分離得到的玉米直鏈淀粉和支鏈淀粉的最小;但玉米淀粉中間成分的碘親和力和藍(lán)值,方法一分離得到的比方法二分離得到的要低.無論選用哪種分離方法,直鏈淀粉的聚合度均要低于支鏈淀粉的聚合度,相反直鏈淀粉的分子鏈長度比支鏈淀粉的要長.

        表2 玉米淀粉分離組分的分子結(jié)構(gòu)

        3 結(jié) 論

        (1)分離方法對玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉微觀結(jié)構(gòu)影響較大,特別地由方法三得到的玉米支鏈淀粉形成內(nèi)部疏松多孔的團(tuán)塊.

        (2)分離方法使玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉結(jié)晶相由A型轉(zhuǎn)變?yōu)镃型,并降低它們的微晶相比例和結(jié)晶度.

        (3)分離方法對玉米直鏈淀粉、中間成分和支鏈淀粉碘親和力、藍(lán)值、平均聚合度、平均鏈長和摩爾平均鏈數(shù)的影響較大,而對它們與碘形成復(fù)合物的λmax影響較大的是方法三.

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