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        維生素E改善羊肉品質(zhì)的機理初探

        2010-06-07 10:33:32羅海玲,孟慧,朱虹
        飼料工業(yè) 2010年2期
        關(guān)鍵詞:血清水平

        隨著人民生活水平的提高及國際肉類市場的競爭,生產(chǎn)者面臨著既滿足消費者需求又滿足國際市場要求的優(yōu)質(zhì)肉產(chǎn)品的挑戰(zhàn)。飼料安全是動物性食品安全的源頭和保障,動物產(chǎn)品品質(zhì)的形成機制及調(diào)控是國際新課題之一。伴隨著人們對膳食與健康關(guān)系認識的提高,越來越提倡食用多不飽和脂肪酸含量高的動物性食品。因此使用安全性飼料,利用營養(yǎng)調(diào)控方法提高產(chǎn)品品質(zhì)愈來愈迫切。羊肉由于其低密度飼養(yǎng)或放養(yǎng)方式,則逐漸成了一種理想的、安全的替代品。羊肉具有瘦肉多、脂肪少、肉嫩多汁、容易消化、蛋白質(zhì)含量高、膽固醇含量低等特點,是我國傳統(tǒng)的食藥兩用肉類食品。但由于羊肉產(chǎn)量少,價格高,且有膻味,其消費量與豬肉、牛肉、雞肉等肉類相比較小。

        維生素E作為重要的抗氧化劑,可阻止多不飽和脂肪酸的氧化,改善肉的品質(zhì)。Cheah等(1995)研究,豬日糧中添加維生素E能明顯降低Ca2+的釋放,降低糖酵解的速度,從而防止PSE肉的產(chǎn)生。提高肉雞日糧中的維生素E水平,能增強活體和屠體肌肉組織的抗氧化能力,減少肉品中氧化產(chǎn)物的生成,可達到保持肉色新鮮、汁液損失減少和防止脂肪酸敗的效果(文杰,1998;史清河,1999)。Arnold 等(1993)研究表明,相對短時間內(nèi)高劑量補飼維生素E或相對長時間較低劑量補飼維生素E都能起到穩(wěn)定脂質(zhì)氧化的作用。Cho等(2006)研究表明,給閹割牛飼喂含1000和2000 IU的維生素E,其大理石花紋得分、肉品質(zhì)等級均高于其它組(P<0.05)。背最長肌中的維生素E含量會隨日糧中維生素E含量的提高而升高 (P<0.05)。在日糧中添加維生素E對肌肉的顏色有良好的作用,可改善肉色(高秦燕等,2003)。上市前6周,在豬的日糧中添加濃度為200 IU VE/kg有利于提高脂質(zhì)穩(wěn)定性和豬肉品質(zhì)(Guo等,2006)。

        但有關(guān)維生素E對羊肉品質(zhì)的影響研究鮮見報導(dǎo)。本試驗在日糧中添加維生素E,研究其對羊肉品質(zhì)的影響及其機理。旨在探討從營養(yǎng)學(xué)角度改善羊肉品質(zhì)日糧調(diào)控方法,為安全高效的天然抗氧化劑維生素E在養(yǎng)羊生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用提供理論依據(jù),為生產(chǎn)高質(zhì)量的羊肉提供科學(xué)保障。

        1 材料與方法

        1.1 試驗1:日糧維生素E水平對羊肉品質(zhì)的影響

        1.1.1 試驗動物與試驗設(shè)計

        選擇胎次、體重、出生日期相近,同期斷奶的波爾山羊公羔24只,隨機分為對照組、低水平組、中水平組、高水平組,維生素E(α-生育酚醋酸酯,1 mg=1 IU)添加在精料中飼喂,添加量分別為0(對照組)、80(低水平組)、320(中水平組)、880(高水平組)mg/(d·頭)。預(yù)飼7 d,正試期150 d。

        1.1.2 試驗日糧及飼養(yǎng)管理

        根據(jù)NRC綿羊營養(yǎng)需要(1985)配制基礎(chǔ)日糧。試驗全期采用常規(guī)飼養(yǎng)管理,圈舍飼養(yǎng),自由飲水。每天兩次定量飼喂精料,自由采食秸稈和青貯飼料,精料配方及營養(yǎng)水平見表1。

        1.1.3 樣品采集

        在試驗第150 d,從每組中隨機選取3只羊按常規(guī)法進行屠宰,取背最長肌和臀肌樣品。

        1.1.4 測定方法

        常規(guī)法測定pH值、熟肉率、滴水損失、解凍損失等。

        表1 精料配方及營養(yǎng)水平

        1.1.5 統(tǒng)計分析

        數(shù)據(jù)采用Excel軟件整理,運用SPSS11.0中的ANOVA過程進行方差分析,多重比較用Duncan's法,結(jié)果以平均值±標準差表示,以P<0.05表示差異顯著。

        1.2 試驗2:日糧維生素E水平對羊紅細胞膜流動性影響

        試驗動物、試驗設(shè)計、飼養(yǎng)管理、統(tǒng)計方法等同試驗1。

        1.2.1 樣品采集

        試驗動物在試驗第15、120和150 d早上飼喂之前用注射器頸靜脈采血10 ml,肝素鈉抗凝血,待用。

        1.2.2 測定方法

        參照 Shinitzky(1978)、趙春婷(1997)、馮端浩(2003)的方法分離得到紅細胞 (RBC),并制備紅細胞懸液,DPH(1,6-二苯基-1,3,5-己三烯,Sigma)作為熒光探針標記,用PBS配置2×10-6mol/l DPH-PBS標記溶液,37℃孵育30 min,熒光偏振法測定。

        采用日本KYOTO公司RF-510熒光分光光度計,光源為150 W氙燈,激發(fā)波長(λ激發(fā))362 nm,發(fā)射波長(λ發(fā)射)453 nm,根據(jù)下列公式分別計算偏振度(P)、微粘度(η)及紅細胞膜脂流動性(εLFU):

        式中:Ivv——起偏器和檢測器光軸均在垂直方向的光強度;

        Ivh——起偏器光軸在垂直方向,檢測器光軸在

        水平方向的光強度。

        1.3 試驗3:日糧維生素E水平對羊血清抗氧化性酶活性影響

        試驗動物、試驗設(shè)計、飼養(yǎng)管理、統(tǒng)計方法等同試驗1。

        1.3.1 血清抗氧化指標血樣采集

        試驗動物在試驗第 15、30、60、90、120 和 150 d早上飼喂之前用注射器頸靜脈采血10 ml,注射入離心管中靜置 2 h后3000 r/min離心10 min,取上層血清,-20℃保存直至分析。

        1.3.2 測定方法

        T-SOD(總超氧化物歧化酶)、GSH-Px(谷胱甘肽過氧化物酶)、MDA(丙二醛)活性測定所用試劑盒購自南京建成生物工程研究所,采用比色法測定。具體操作按照試劑盒說明書進行,計算公式為:

        1.4 試驗4:日糧維生素E水平對肌肉抗氧化性酶活性影響

        試驗動物、試驗設(shè)計、飼養(yǎng)管理、統(tǒng)計方法、肌肉樣品采集同試驗1。測定方法如下:

        T-SOD、GSH-Px、MDA活性測定所用試劑盒購自南京建成生物工程研究所,采用比色法測定。具體操作按照試劑盒說明書進行,計算公式為:

        2 結(jié)果與討論

        2.1 不同水平維生素E對波爾山羊肉質(zhì)的影響(見表2)

        表2 不同水平維生素E對波爾山羊肉質(zhì)的影響

        肌肉滴水損失和解凍損失越低,組織系水力越高,保水性能越好,熟肉率越高則烹調(diào)損失越少,表明肉的品質(zhì)越好。由表2可以看出,試驗組背最長肌和臀肌的滴水損失均低于對照組,背最長肌的中水平組顯著低于對照組(P<0.05),臀肌的中、高水平維生素E組顯著低于對照組(P<0.05);隨維生素E添加水平的提高肌肉中解凍損失有降低趨勢,熟肉率有提高的趨勢。結(jié)果說明肉質(zhì)有改善的趨勢,可能由于維生素E能夠維持細胞膜的完整性,提高了肌肉的保水能力,降低了解凍損失,進而提高了熟肉率。

        2.2 維生素E對肌肉中常規(guī)營養(yǎng)成分的影響(見表3)

        表3顯示,日糧中添加維生素E可不同程度影響肌肉中的水分、干物質(zhì)、蛋白以及肌間脂肪含量。為了保持肌肉有良好的適口性,肌肉中必須有一定量的肌內(nèi)脂肪(Smith,1980),以 2%~3%為較理想(Mundi,1999),肌內(nèi)脂肪含量與肉品的風味多汁性和嫩度呈正相關(guān),并對于肌肉的紋理、緊實性和保水性能有明顯的改善作用(Seideman,1986)。本試驗肉樣中脂肪含量均在2%~4%,并且試驗組的肌間脂肪含量較對照組有所提高,因而改善口感嫩度及保水能力,從而提高肉品質(zhì)。

        2.3 維生素E對肌肉中脂肪酸組成的影響(見表4)

        羊肉脂肪酸是影響肉品質(zhì)又一決定性因素,研究羊肉中脂肪酸組成對改善肉品質(zhì)和風味很重要。表4證明,隨日糧維生素E含量增加,肌肉中多不飽和脂肪酸含量增加,中水平組可顯著降低背最長肌中飽和脂肪酸含量(P<0.05);油酸和亞麻酸的含量隨維生素E添加水平的升高有提高趨勢。CLA具有抑制及抗癌、抗動脈粥樣硬化的作用和抗膽固醇血癥的功能(Lee等,1994)。本試驗中 CLA c9,t11、CLA c10,t12含量隨著維生素E添加水平升高表現(xiàn)出上升趨勢,這可能是由于維生素E可以保護PUFA,防止其氧化而實現(xiàn)的。本試驗也證明隨日糧維生素E含量增加羊肉中與膻味有關(guān)的短鏈脂肪酸和硬脂酸含量有降低趨勢。

        表3 不同水平維生素E對波爾山羊肉中營養(yǎng)成分的影響

        表4 不同水平維生素E對波爾山羊肌肉脂肪酸組成的影響(%)

        2.4 維生素E對血液紅細胞膜流動性的影響(見表5)

        紅細胞膜流動性是生物膜的重要特征之一,膜脂流動性的改變往往在氧化損傷的一般形態(tài)學(xué)和生化改變之前就可以表現(xiàn)出來,因而常常作為檢測細胞早期氧化損傷的敏感指標。膜的微粘度和流動性互為倒數(shù)關(guān)系,即膜的微粘度越大,流動性越小,反之越大(聶松青等,1983)。

        表5顯示在120 d時,隨維生素E添加水平的提高,紅細胞膜微粘度有降低的趨勢,膜脂流動性有升高趨勢,并且隨著添加水平的提高,變化幅度變大。同時,各組內(nèi)隨著添加時間的延長,P、η有下降的趨勢,εLFU升高趨勢明顯。添加維生素E的三個試驗組在添加后的120 d和150 d與第15 d相比,P、η顯著降低(P<0.05),εLFU顯著升高(P<0.05)。說明隨添加時間的延長,日糧中添加維生素E可以改善紅細胞膜流動性。

        2.5 維生素E對血清抗氧化性酶活性的影響(見表6)

        表5 日糧VE水平對波爾山羊紅細胞膜流動性的影響

        表6 日糧不同水平維生素E對波爾山羊血清T-SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影響

        T-SOD、GSH-Px對動物機體內(nèi)的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用。SOD活力高低可以間接反映出動物機體內(nèi)清除氧自由基的能力 (方允中等,1989),SOD活性低時,削弱了體內(nèi)氧自由基清除酶體系,出現(xiàn)因過多氧自由基積累而造成的膜脂過氧化作用的加強,體內(nèi)積累過多膜脂質(zhì)過氧化物(張文玲,2001)。MDA是體內(nèi)自由基攻擊生物膜中多不飽和脂肪酸,引發(fā)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的一類較穩(wěn)定的脂質(zhì)過氧化物,MDA的含量則反映了機體脂質(zhì)過氧化的程度(Lauridsen等,1999)。維生素E能給脂質(zhì)的自由基提供一個氫,與游離電子發(fā)揮作用,抑制自由基,阻止脂質(zhì)過氧化的鏈式反應(yīng),減少了MDA的形成(董曉慧等,2003)。

        表6顯示不同水平VE對波爾山羊血清T-SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影響。結(jié)果說明在15 d,高水平組與其他三組相比,顯著提高了血清T-SOD活性(P<0.05);120 d,添加不同水平維生素 E 的各組與對照組相比,T-SOD活性均有所提高,其中中水平組與對照組、低水平組相比,顯著性的提高了T-SOD活性(P<0.05)。第 30、60、90 及 150 d,隨著添加水平的增大,各處理組T-SOD活性有升高的趨勢,并且隨著添加水平的提高,T-SOD活性升高的幅度變大。維生素E提高奶牛血漿中T-SOD的活性(P<0.05)(楊仁貴等,2006)和夏寒雜交羊血清 SOD 的活性(P<0.01),且效果隨著補飼時間的延長而愈加明顯(陳玉艷,2006)。以上兩個結(jié)果都表明,血清中SOD活性隨著維生素E添加時間的延長而增加,本試驗得到類似趨勢。

        本試驗中,隨著添加時間的延長,GSH-Px的含量呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢,由此可見,短時間添加維生素E對GSH-Px的影響不大,但是長時間添加VE可以提高血清中GSH-Px的水平。與對照組相比,在添加低水平維生素E后的15、150 d,中水平維生素E后的第30、90 d可以顯著提高GSH-Px活性,可見,長時間添加低水平的維生素E可以提高血清中GSHPx的活性,添加水平過高反而影響其活性。

        楊仁貴等(2006)向奶牛日糧中分別添加0、600、1800、3600 IU/(d·頭)的維生素 E,降低了血漿中 MDA含量,與對照組相比,在40 d時,組3和組4中濃度顯著降低(P<0.05)。日糧中添加維生素E,羊血清MDA含量顯著降低(P<0.01),且效果隨著補飼時間的延長而愈加明顯(陳玉艷 2006)。本試驗中,與對照組相比,添加維生素E均使MDA水平降低,其中添加低水平組第 30、60 d,添加中水平組第 15、30、90 d,可以顯著降低MDA含量(P<0.05),高水平添加組也能降低血清MDA含量,但是未達到顯著性差異(P>0.05)。由此可見,添加低中水平的維生素E可有效降低血清MDA含量。

        2.6 日糧不同水平維生素E對肌肉組織抗氧化性的影響(見表 7)

        表7 日糧不同水平維生素E對波爾山羊肌肉組織抗氧化性的影響

        在日糧中添加維生素E可以改善肉質(zhì),有可能是由于提高其抗氧化性能而使其肉質(zhì)得以改善。有研究表明(Bartov,1992;Sheehy,1999),提高日糧維生素 E水平能增強活體和屠體肌肉組織的抗氧化能力,從而減少肉品之中過氧化物的生成,以達到減少汁液損失和防止脂肪酸敗的效果,起到改善肉品質(zhì)的作用(文杰,1998;史清河,1999)。

        黃素珍等(1998)給雞添加維生素E(100 mg/kg)5周,宰殺后48 h血液、肝臟、胸肌、腿肌中GSH-Px,SOD活性顯著高于對照組。Sander等 (1997)于宰前100 d每日給雜交閹牛補飼1000或2000 IU的α-生育酚醋酸酯,明顯較未補飼維生素E組降低了大排的脂質(zhì)氧化。Arnold等(1992)相繼報道,日糧維生素E的添加可以顯著地降低新鮮牛肉的TBARS值,抑制了脂質(zhì)氧化。Fanstman等(1998)試驗結(jié)果顯示,日糧添加維生素E有效地提高了脂質(zhì)的穩(wěn)定性。Liu等(1996)于宰前42 d和126 d每日給荷斯坦閹牛補飼0、250、500和2000 IU的α-生育酚醋酸酯。結(jié)果表明,隨著維生素E添加量的增加及添加期的延長,肌肉中過氧化物含量明顯降低(P<0.01)。本試驗結(jié)果證明日糧中添加適宜水平的維生素E可以提高肌肉組織中T-SOD、GSH-Px活性,并且降低MDA含量,此結(jié)果與以上這些報道一致。

        本試驗中,試驗組山羊血清和肌肉組織中TSOD、GSH-Px活性高于對照組,一方面表明維生素E提高了T-SOD、GSH-Px活性,另一方面說明維生素E引起脂質(zhì)氧化反應(yīng)代謝產(chǎn)物MDA的減少,而MDA可以直接滅活SOD,這樣,維生素E導(dǎo)致SOD活性升高,使超氧陰離子自由基在體內(nèi)大量蓄積并損傷組織細胞膜的危害大大降低,從而維持了細胞的保水性能,達到改善肉品質(zhì)的效果。

        3 結(jié)論

        日糧添加維生素E提高紅細胞膜流動性,維持細胞膜完整性,提高血清及肌肉組織中抗氧化性能,保護肌肉組織中多不飽和脂肪酸不被氧化,改善羊肉品質(zhì),降低羊肉滴水損失,提高肌肉中共軛亞油酸和不飽和脂肪酸的含量,降低與膻味有關(guān)的硬脂酸和短鏈脂肪酸的含量。本試驗中以添加水平320 mg/(d·頭)效果最好。

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