淋巴瘤是一種淋巴細(xì)胞增殖性疾病,其確診需要病理學(xué)證實(shí),而免疫組化技術(shù)在協(xié)助診斷上起著決定性作用,不僅可以鑒別與其他類型或其他腫瘤組織學(xué)有重疊的淋巴瘤[1],還可以提示腫瘤組織細(xì)胞的增殖活性。較為常用的免疫標(biāo)記物主要有CD20、CD30、CD45RO、Ki-67及PCNA等。其中Ki-67與細(xì)胞周期高度相關(guān),近年來已廣泛應(yīng)用于研究腫瘤組織細(xì)胞的增生活性。通過此抗原的檢測(cè),可以得知腫瘤細(xì)胞群以哪個(gè)細(xì)胞周期的為主,對(duì)指導(dǎo)臨床選擇治療方案及藥物具有重要的意義。已有研究[2,3]證明Ki-67可以很好地預(yù)測(cè)淋巴瘤臨床行為和判斷預(yù)后,但Ki-67與淋巴瘤分期之間的關(guān)系鮮見報(bào)道。

大量研究證明18F-FDG PET/CT顯像技術(shù)對(duì)淋巴瘤分期有著重要作用,具有較高的敏感性和特異性[4]。但18F-FDG PET/CT半定量指標(biāo)SUV值與淋巴瘤分期之間的關(guān)系也鮮見報(bào)道。本文將針對(duì)PET/CT SUVmax值、核抗原Ki-67與淋巴瘤分期之間的關(guān)系進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 對(duì)象 收集2005-05～2009-04在四川省人民醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科行PET/CT且有免疫組化資料的初診淋巴瘤患者39例,其中非霍奇金淋巴瘤(NHL)32例:彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)17例,NK/T細(xì)胞淋巴瘤7例,套細(xì)胞淋巴瘤(MCL)2例,小B細(xì)胞淋巴瘤(SBCL)2例,皮下脂膜炎樣淋巴瘤2例,T細(xì)胞淋巴瘤(TCL)1例,黏膜相關(guān)淋巴組織結(jié)外邊緣區(qū)B細(xì)胞(MALT-MZL)1例;霍奇金淋巴瘤(HL)7例:混合細(xì)胞型淋巴瘤(MCHL)4例,結(jié)節(jié)硬化型(NSHL)3例。男性24例,女性 15例。年齡 8～85歲,平均 45歲。以臨床綜合評(píng)價(jià)結(jié)果(長(zhǎng)期隨訪、后期病理資料及明確的影像診斷等)為參考依據(jù),對(duì)所有患者進(jìn)行Ann Arbor分期,隨訪時(shí)間6～41個(gè)月。為擴(kuò)大樣本量,將以上四期合并為早期(Ⅰ期～Ⅱ期)和晚期(Ⅲ期～Ⅳ期)兩組。

1.2 方法

1.2.1 儀器及顯像劑 PET/CT儀為德國(guó)Siemens公司的Biograph PET/CT系統(tǒng),回旋加速器為美國(guó)GE公司 MINITracer,生產(chǎn)的18F-FDG放化純 ＞95%。

1.2.2 顯像方法 患者空腹6 h以上,空腹血糖控制在4～6mmol/L,靜脈注射18F-FDG顯像劑0.15～0.2 mCi/kg,靜臥40～60 min后行全身掃描,掃描范圍自頭頂至大腿上1/3。

1.2.3 圖像分析 PET/CT圖像由2位有經(jīng)驗(yàn)的核醫(yī)學(xué)科醫(yī)師共同閱片完成,沿病灶周邊勾畫感興趣區(qū)(ROI)后,由計(jì)算機(jī)程序自動(dòng)獲得其SUVmax。淋巴結(jié)內(nèi)病灶SUVmax＞2.0者為陽性[5];結(jié)外病灶,肺部SUVmax＞2.5者為陽性,其余病灶(不包括骨髓)以SUVmax＞3.0者為陽性,骨髓浸潤(rùn)以18F-FDG攝取等于或高于肝臟者為陽性[6]。

1.2.4 免疫組化方法 切片常規(guī)脫蠟,水化,LDP法(labeled dextran polymer method)初染,Harris復(fù)染,加入EnVision二抗孵育,光鏡下DAB/H2O2顯色。本文免疫組化切片均由本院病理科提供。

1.3 數(shù)據(jù)分析 二分類Logistic回歸分析(Binary Logistic)和 Spearman相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 病理分期 以臨床綜合評(píng)價(jià)為標(biāo)準(zhǔn),對(duì)39例患者進(jìn)行Ann Arbor分期得出:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者分別有 6、13、9、11例,早期(Ⅰ期 ～ Ⅱ期)19例 ,晚期(Ⅲ期～Ⅳ期)20例。

2.2 分析結(jié)果 所有患者淋巴瘤病灶共193處,每例患者的病灶數(shù)為2～17處不等。將每例患者病灶的SUVmax求平均獲得平均SUVmax值,每個(gè)平均值都有對(duì)應(yīng)的Ki-67陽性指數(shù)(表1)。

表1 淋巴瘤各期患者的平均SUVm ax值和 Ki-67指數(shù)

將早期、晚期作為Binary Logistic回歸分析的二分類因變量,平均SUVmax值和Ki-67指數(shù)作為自變量進(jìn)行逐步回歸分析,結(jié)果見表2?；貧w模型中不包含變量 SUVmax值,即與分期之間無顯著關(guān)系(P=0.132)。包含在回歸模型中的變量為ki-67,提示與臨床早、晚分期有關(guān)系,且與分期呈顯著正相關(guān)(P＜0.001),Ki-67陽性指數(shù)越高,分期越晚。

表2 包含在方程中的變量估計(jì)及檢驗(yàn)值

將表1中平均SUVmax值與ki-67陽性指數(shù)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行Spearman相關(guān)分析得出:Spearman相關(guān)系數(shù)為0.251,兩者間呈顯著正相關(guān)(P＜0.001),但關(guān)系不密切(相關(guān)系數(shù)＜0.5)。

3 討論

對(duì)于SUV值與腫瘤臨床分期之間的關(guān)系,目前報(bào)道尚為少見。Lapela等[7]研究證實(shí)FDG SUV值與淋巴瘤惡性程度明顯相關(guān),與分期是否有關(guān)未做分析。Sachs對(duì)肺癌的研究[8]表明:PET SUV值與肺癌臨床分期有相關(guān)性。但本文結(jié)果顯示SUVmax值與淋巴瘤分期無關(guān),兩者之間是否存在一定聯(lián)系,還需進(jìn)一步研究證實(shí)。但本文存在一定缺陷可能對(duì)結(jié)果會(huì)有影響:納入病灶既有結(jié)外病灶,又有結(jié)內(nèi)病灶,且結(jié)內(nèi)、外病灶數(shù)多少不等,導(dǎo)致每例患者的平均SUVmax缺乏一致性。

Ki-67作為一種增殖細(xì)胞核抗原,其陽性指數(shù)的高低可以指導(dǎo)周期特異性化療藥物的選擇[2,3]。在淋巴瘤分類和臨床行為學(xué)方面,Ki-67作為一項(xiàng)早期預(yù)測(cè)指標(biāo),不僅與腫瘤組織的侵襲性、腫塊大小等有關(guān)[9,10],而且其陽性率在低、中、高度惡性NHL之間具有顯著性差異[2,3]。Broyde等[11]指出Ki-67陽性指數(shù)45%是鑒別惰性和侵襲性NHL的分界值;70%是判斷DLBCL預(yù)后良、差的分界值,但Ki-67在DLBCLⅠ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期之間無差異。與本組結(jié)果相矛盾,分析主要原因可能有:①本組病例同時(shí)包括NHL和HL;②亞型分類較多,共有9種。正像Mochen等[12]發(fā)現(xiàn)的Ki-67陽性指數(shù)與歐美淋巴瘤分類(PEAL)密切相關(guān),而且本組各亞型例數(shù)懸殊,勢(shì)必影響患者之間Ki-67的平衡。另外,本組病例明顯少于文獻(xiàn)報(bào)道(141例)也可能是導(dǎo)致不同結(jié)果的原因之一。所以Ki-67與淋巴瘤臨床分期之間的關(guān)系,需要多中心、大樣本研究進(jìn)一步證實(shí)。

SUVmax值與Ki-67在淋巴瘤研究中具有很大的相似性:除與淋巴瘤組織惡性程度(低、中、高度)[13]、腫瘤病灶大小相關(guān)外[14],還可以很好地指導(dǎo)淋巴瘤治療和判斷預(yù)后[15]。從對(duì)淋巴瘤的診斷意義來講,SUV值以18氟-脫氧葡萄糖(18F-FDG)攝取高低評(píng)價(jià)細(xì)胞的代謝活躍程度,SUV值越高,代謝愈活躍;Ki-67以其陽性細(xì)胞的陽性率反應(yīng)細(xì)胞的增殖情況,陽性率越大,增殖程度越高。試想兩者在分子水平上可能存在一定聯(lián)系,而且Lapela等[7]證明PET SUV值也與 NHL細(xì)胞增殖有關(guān)。為此,我們就 PET/CT SUVmax值與核抗原Ki-67之間的關(guān)系做了初步探討,結(jié)果證明兩者呈顯著正相關(guān),與Tang BF等[16]的近期研究相近:活檢部位的SUV值與Ki-67呈線性正相關(guān)。所以,PET/CT SUV值可以反映細(xì)胞的增殖情況及病灶的侵襲程度,為淋巴瘤治療方案的選擇提供了重要依據(jù)。

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